کاست تست سریع آنتی ژن SARS-CoV-2

کاربرد مورد نظر

کاست تست سریع آنتی ژن SARS-CoV-2یک روش ایمونواسی کروماتوگرافی سریع برای تشخیص کیفی آنتی‌ژن SARS-CoV-2 در سواب‌های دهانی-حلقی انسان است. شناسایی بر اساس آنتی‌بادی‌های مونوکلونال اختصاصی برای پروتئین نوکلئوکپسید (N) SARS-CoV-2 انجام می‌شود. این روش برای کمک به تشخیص افتراقی سریع موارد زیر در نظر گرفته شده است:کووید 19عفونت

مشخصات بسته

۲۵ تست در هر بسته، ۵۰ تست در هر بسته، ۱۰۰ تست در هر بسته

مقدمه

کروناویروس‌های جدید متعلق به جنس β هستند.کووید 19یک بیماری عفونی حاد تنفسی است. افراد عموماً مستعد ابتلا به آن هستند. در حال حاضر، بیماران آلوده به ویروس کرونای جدید منبع اصلی عفونت هستند؛ افراد آلوده بدون علامت نیز می‌توانند منبع عفونی باشند. بر اساس تحقیقات اپیدمیولوژیک فعلی، دوره کمون ۱ تا ۱۴ روز، عمدتاً ۳ تا ۷ روز است. علائم اصلی شامل تب، خستگی و سرفه خشک است. گرفتگی بینی، آبریزش بینی، گلودرد، درد عضلانی و اسهال در موارد کمی مشاهده می‌شود.

معرف‌ها

کاست آزمایش حاوی ذرات پروتئین نوکلئوکپسید ضد SARS-CoV-2 و پروتئین نوکلئوکپسید ضد SARS-CoV-2 است که روی غشاء پوشانده شده است.

موارد احتیاط

لطفا قبل از انجام آزمایش، تمام اطلاعات موجود در این بروشور داخل بسته را مطالعه کنید.

۱. فقط برای تشخیص حرفه‌ای آزمایشگاهی. پس از تاریخ انقضا استفاده نشود.

۲. تست باید تا زمان آماده شدن برای استفاده، در کیسه دربسته باقی بماند.

۳. تمام نمونه‌ها باید بالقوه خطرناک تلقی شوند و مانند یک عامل عفونت با آنها برخورد شود.

۴. تست استفاده شده باید طبق مقررات محلی دور ریخته شود.

۵. از استفاده از نمونه‌های خونی خودداری کنید.

۶. هنگام تحویل نمونه‌ها از دستکش استفاده کنید، از لمس غشای معرف خودداری کنید و نمونه را به خوبی تکان دهید.

نگهداری و پایداری

مدت اعتبار ۱۸ ماه است اگر این محصول در محیطی نگهداری شود که

۲-۳۰℃. این تست تا تاریخ انقضای چاپ شده روی بسته‌بندی قابل استفاده است. تست باید تا زمان استفاده در بسته‌بندی باقی بماند.منجمد نکنید.فراتر از تاریخ انقضا استفاده نکنید.

جمع‌آوری و آماده‌سازی نمونه

۱. جمع‌آوری ترشحات گلو: یک سواب استریل را به طور کامل از دهان وارد گلو کنید، مرکز آن را دیواره گلو و ناحیه قرمز شده لوزه‌های کام قرار دهید، لوزه‌های حلقی دو طرفه و دیواره خلفی حلق را با فشار متوسط پاک کنید.

با زور، از لمس زبان خودداری کنید و سواب را بیرون بیاورید.

۲. بلافاصله پس از جمع‌آوری نمونه، آن را با محلول استخراج نمونه که در کیت موجود است، پردازش کنید. اگر امکان پردازش فوری وجود ندارد، نمونه باید در یک لوله پلاستیکی خشک، استریل و کاملاً مهر و موم شده نگهداری شود. می‌توان آن را به مدت ۸ ساعت در دمای ۲-۸ درجه سانتیگراد و برای مدت طولانی در دمای -۷۰ درجه سانتیگراد نگهداری کرد.

۳. نمونه‌هایی که به شدت توسط بقایای مواد غذایی دهانی آلوده شده‌اند، نمی‌توانند برای آزمایش این محصول استفاده شوند. نمونه‌های جمع‌آوری‌شده از سواب‌هایی که بیش از حد چسبناک یا آگلومره هستند، برای آزمایش این محصول توصیه نمی‌شوند. اگر سواب‌ها به مقدار زیادی خون آلوده باشند، برای آزمایش توصیه نمی‌شوند. استفاده از نمونه‌هایی که با محلول استخراج نمونه که در این کیت ارائه نشده است، پردازش می‌شوند، برای آزمایش این محصول توصیه نمی‌شود.

اجزای کیت

مواد ارائه می‌دهند

مواد مورد نیاز اما ارائه نشده

مشخصات فنی25

تست‌ها/بسته50

تست‌ها/بسته ۱۰۰

آزمایش/بسته استخراج نمونه معرف ۲۵ آزمایش/بسته ۵۰ آزمایش/بسته ۱۰۰ آزمایش/بسته استخراج نمونه

لوله≥۲۵ تست/بسته≥۵۰ تست/بسته≥۱۰۰ تست/بستهدستورالعمل به دستورالعمل مراجعه کنید

بسته بندیمراجعه کنید به

بسته بندیمراجعه کنید به

بسته

دستورالعمل استفاده

قبل از آزمایش، اجازه دهید دمای آزمایش، نمونه و بافر استخراج به دمای اتاق (15-30 درجه سانتیگراد) برسد.

۱. کاست تست را از کیسه فویل بسته شده خارج کرده و ظرف ۱۵ دقیقه از آن استفاده کنید. بهترین نتایج در صورتی حاصل می‌شود که سنجش بلافاصله پس از باز کردن کیسه فویل انجام شود.

۲. لوله استخراج را در محل کار قرار دهید. بطری معرف استخراج را به صورت عمودی وارونه نگه دارید. بطری را فشار دهید و بگذارید تمام محلول (تقریباً ۲۵۰ میکرولیتر) آزادانه و بدون تماس لبه لوله با لوله استخراج، داخل لوله استخراج بریزد.

۳. نمونه سواب را در لوله استخراج قرار دهید. سواب را به مدت تقریباً ۱۰ ثانیه بچرخانید و در عین حال سر آن را به داخل لوله فشار دهید تا آنتی‌ژن موجود در سواب آزاد شود.

۴. سواب را در حالی که سر سواب را به داخل لوله استخراج فشار می‌دهید، بردارید تا مایع تا حد امکان از سواب خارج شود. سواب را مطابق با پروتکل دفع زباله‌های خطرناک زیستی خود دور بریزید.

5. نوک قطره چکان را روی لوله استخراج قرار دهید. کاست آزمایش را روی یک سطح تمیز و صاف قرار دهید.

6. دو قطره از محلول (تقریباً 65 میکرولیتر) را به چاهک نمونه اضافه کنید و سپس تایمر را روشن کنید. نتیجه نمایش داده شده را ظرف 20 تا 30 دقیقه بخوانید و نتایج خوانده شده پس از 30 دقیقه نامعتبر است.

تفسیر نتایج

یک خط رنگی در ناحیه خط کنترل (C) ظاهر می‌شود. هیچ خطی در ناحیه تست (T) ظاهر نمی‌شود. نتیجه منفی نشان می‌دهد که آنتی‌ژن SARS-CoV-2 در نمونه وجود ندارد یا پایین‌تر از سطح قابل تشخیص تست است.

مثبتنتیجه:

دو خط ظاهر می‌شود. یک خط رنگی باید در ناحیه کنترل (C) و یک خط رنگی آشکار دیگر باید در ناحیه آزمایش (T) باشد. نتیجه مثبت نشان می‌دهد که SARS-CoV-2 در نمونه شناسایی شده است.

نتیجه نامعتبر:

خط کنترل ظاهر نمی‌شود. حجم ناکافی نمونه یا تکنیک‌های نادرست رویه، محتمل‌ترین دلایل خرابی خط کنترل هستند. مراحل کار را مرور کنید و آزمایش را با یک آزمایش جدید تکرار کنید. اگر مشکل همچنان ادامه داشت، فوراً استفاده از کیت آزمایش را متوقف کرده و با توزیع‌کننده محلی خود تماس بگیرید.

توجه:

شدت رنگ در ناحیه خط آزمایش (T) بسته به غلظت آنتی‌ژن SARS-CoV-2 موجود در نمونه متفاوت خواهد بود. بنابراین، هر سایه رنگی در ناحیه خط آزمایش (T) باید مثبت در نظر گرفته شود.

کنترل کیفیت

• یک کنترل رویه‌ای در آزمایش گنجانده شده است. خط رنگی که در ناحیه کنترل (C) ظاهر می‌شود، یک کنترل رویه‌ای داخلی در نظر گرفته می‌شود. این امر، جذب کافی غشا را تأیید می‌کند.
• استانداردهای کنترل همراه این کیت ارائه نمی‌شوند؛ با این حال، توصیه می‌شود که به عنوان یک روش آزمایشگاهی خوب، کنترل‌های مثبت و منفی برای تأیید روش آزمایش و تأیید عملکرد صحیح آزمایش، آزمایش شوند.

محدودیت‌هااز آزمون

1. کاست تست سریع آنتی‌ژن SARS-CoV-2 فقط برای استفاده تشخیصی حرفه‌ای در شرایط آزمایشگاهی (in vitro) است. این آزمایش باید برای تشخیص آنتی‌ژن SARS-CoV-2 در سواب دهانی-حلقی استفاده شود. نه مقدار کمی و نه میزان افزایش غلظت SARS-CoV-2 را نمی‌توان با این آزمایش کیفی تعیین کرد.
2. دقت آزمایش به کیفیت نمونه سواب بستگی دارد. نتایج منفی کاذب ممکن است ناشی از نگهداری نامناسب نمونه در محل جمع‌آوری باشد.
3. کاست تست سریع آنتی‌ژن SARS-CoV-2 فقط وجود SARS-CoV-2 را در نمونه از سویه‌های کروناویروس SARS-CoV-2 زنده و غیرزنده نشان می‌دهد.
4. همانند تمام آزمایش‌های تشخیصی، تمام نتایج باید همراه با سایر اطلاعات بالینی موجود برای پزشک تفسیر شوند.
5. نتیجه منفی به‌دست‌آمده از این کیت باید با PCR تأیید شود. اگر غلظت SARS-CoV-2 موجود در سواب کافی نباشد یا پایین‌تر از سطح قابل تشخیص آزمایش باشد، ممکن است نتیجه منفی حاصل شود.
6. خون یا مخاط اضافی روی نمونه سواب ممکن است در عملکرد اختلال ایجاد کند و نتیجه مثبت کاذب ایجاد کند.
7. نتیجه مثبت برای SARS-CoV-2 عفونت همزمان زمینه‌ای با یک پاتوژن دیگر را رد نمی‌کند. بنابراین، احتمال یک عفونت باکتریایی غیر مرتبط باید در نظر گرفته شود.
8. نتایج منفی، عفونت SARS-CoV-2 را رد نمی‌کند، به خصوص در افرادی که با ویروس در تماس بوده‌اند. آزمایش‌های پیگیری با تشخیص مولکولی باید برای رد عفونت در این افراد در نظر گرفته شود.
9. نتایج مثبت ممکن است به دلیل عفونت فعلی با سویه‌های کروناویروس غیر SARS-CoV-2، مانند کروناویروس HKU1، NL63، OC43 یا 229E باشد.
10. نتایج حاصل از آزمایش آنتی‌ژن نباید به عنوان تنها مبنای تشخیص یا رد عفونت SARS-CoV-2 یا برای اطلاع از وضعیت عفونت استفاده شود.
11. معرف استخراج توانایی از بین بردن ویروس را دارد، اما نمی‌تواند ۱۰۰٪ ویروس را غیرفعال کند. روش غیرفعال کردن ویروس را می‌توان به این موارد ارجاع داد: روشی که توسط WHO/CDC توصیه شده است، یا می‌توان طبق مقررات محلی با آن کار کرد.

ویژگی‌های عملکرد

حساسیتوویژگی

کاست تست سریع آنتی‌ژن SARS-CoV-2 با نمونه‌های به‌دست‌آمده از بیماران ارزیابی شده است. PCR به عنوان روش مرجع برای کاست تست سریع آنتی‌ژن SARS-CoV-2 استفاده می‌شود. اگر PCR نتیجه مثبتی را نشان دهد، نمونه‌ها مثبت در نظر گرفته می‌شوند.

حساسیت نسبی: 95.0% (95%CI*: 83.1%-99.4%)

اختصاصیت نسبی: ۹۹.۲٪ (۹۵٪ CI*: ۹۷.۶٪ -۹۹.۸٪)

* فواصل اطمینان

حد تشخیص

وقتی محتوای ویروس بیشتر از 400TCID باشد_۵۰/ml، میزان تشخیص مثبت بیش از 95٪ است. وقتی محتوای ویروس کمتر از 200TCID باشد₅₀/ میلی‌لیتر، میزان تشخیص مثبت کمتر از ۹۵٪ است، بنابراین حداقل حد تشخیص این محصول ۴۰۰TCID5 است.₅₀/ میلی لیتر.

دقت

سه دسته متوالی از معرف‌ها برای دقت آزمایش شدند. دسته‌های مختلف معرف‌ها برای آزمایش یک نمونه منفی یکسان، 10 بار متوالی استفاده شدند و نتایج همه منفی بود. دسته‌های مختلف معرف‌ها برای آزمایش یک نمونه مثبت یکسان، 10 بار متوالی استفاده شدند و نتایج همه مثبت بود.

اثر قلاب

وقتی میزان ویروس در نمونه مورد آزمایش به 4.0*10 برسد⁵تی سی آی دی₅₀/ml، نتیجه آزمایش هنوز اثر HOOK را نشان نمی‌دهد.

واکنش‌پذیری متقاطع

واکنش متقاطع کیت ارزیابی شد. نتایج هیچ واکنش متقاطعی با نمونه زیر نشان نداد.

Iمواد مداخله‌گر

غلظت‌های زیر در نتایج آزمایش با ماده تداخل ایجاد نمی‌کنند:

کتابشناسی

1. وایس اس آر، لیبوویتز جی زد. پاتوژنز ویروس کرونا. Adv Virus Res 2011;81:85-164
2.Cui J,Li F,Shi ZL. منشأ و تکامل ویروس‌های کرونای بیماری‌زا.Nat Rev Microbiol 2019;17:181-192.
۳. سو اس، وانگ جی، شی دبلیو و همکاران. اپیدمیولوژی، نوترکیبی ژنتیکی و پاتوژنز ویروس‌های کرونا. TrendsMicrobiol 2016;24:490-502.