1. За производството на цевки за земање примероци од вируси
Цевките за земање примероци од вируси припаѓаат на медицински помагала. Повеќето домашни производители се регистрирани според производи од прва класа, а малку компании се регистрирани според производи од втора класа. Неодамна, за да ги задоволат итните потреби на Вухан и други места, многу компании го искористија „каналот за итни случаи“ „Аплицирајте за дозвола за евиденција од прва класа“. Цевката за земање примероци од вируси е составена од брис за земање примероци, раствор за зачувување на вируси и надворешно пакување. Бидејќи не постои унифициран национален стандард или индустриски стандард, производите на различни производители се разликуваат многу.
1. Брис за земање примероци: Брисот за земање примероци е директно во контакт со местото на земање примероци, а материјалот на главата за земање примероци е тесно поврзан со последователното откривање. Главата за брисот за земање примероци треба да биде изработена од синтетички влакна од полиестер (PE) или вискоза (вештачко влакно). Не можат да се користат сунѓер од калциум алгинат или дрвени стапчиња (вклучувајќи стапчиња од бамбус), а материјалот на главата за брисот не може да биде од памучни производи. Бидејќи памучните влакна имаат силна адсорпција на протеини, не е лесно да се елуираат во растворот за последователно складирање; а кога дрвен стап или бамбусов стап што содржи калциум алгинат и дрвени компоненти е скршен, потопувањето во растворот за складирање исто така ќе ги адсорбира протеините, па дури и ќе може да ја инхибира последователната PCR реакција. Се препорачува да се користат синтетички влакна како што се PE влакна, полиестерски влакна и полипропиленски влакна за материјалот на главата за брисот. Природните влакна како што е памукот не се препорачуваат. Најлонските влакна исто така не се препорачуваат бидејќи најлонските влакна (слични на главите на четките за заби) апсорбираат вода. Лошо, што резултира со недоволен волумен на земање примероци, што влијае на стапката на откривање. Сунѓерот од калциум алгинат е забранет за земање примероци од материјалот за брисот! Рачката на брисот е од два вида: скршена и вградена. Скршениот стапче се става во цевката за складирање по земањето примероци, а капачето на цевката се крши откако ќе се скрши од позицијата близу до главата за земање примероци; вградениот стапче директно го става стапчето за земање примероци во цевката за складирање по земањето примероци, а капакот на цевката за складирање е вграден. Порамнете ја малата дупка со врвот на рачката и затегнете го капакот на цевката. Споредувајќи ги двата методи, вториот е релативно безбеден. Кога скршениот стапче се користи заедно со цевка за складирање со помала големина, може да предизвика прскање на течност во цевката кога ќе се скрши, и треба да се обрне целосно внимание на ризикот од контаминација предизвикана од неправилна употреба на производот. Се препорачува да се користи шуплива екструдирана цевка од полистирен (PS) или цевка за вбризгување на полипропилен (PP) за материјалот на рачката на стапчето. Без разлика кој материјал се користи, не можат да се додаваат адитиви од калциум алгинат; дрвени стапчиња или бамбусови стапчиња. Накратко, стапчето за земање примероци треба да обезбеди количина на земање примероци и количина на ослободување, а избраните материјали не смеат да содржат супстанции што влијаат на последователното тестирање.
2. Раствор за зачувување на вируси: Постојат два вида раствори за зачувување на вируси кои се широко користени на пазарот, едниот е раствор за одржување на вируси модифициран врз основа на транспортниот медиум, а другиот е модифициран раствор за екстракција на нуклеинска киселина со лизат.
Главната компонента на првиот е основниот медиум за култура на Игл (MEM) или балансираната сол на Ханк, на која се додаваат соли, аминокиселини, витамини, гликоза и протеини неопходни за преживување на вирусот. Овој раствор за складирање користи натриумова сол со фенол црвена боја како индикатор и раствор. Кога pH вредноста е 6,6-8,0, растворот е розов. Потребната гликоза, L-глутамин и протеини се додаваат во растворот за конзервирање. Протеинот е обезбеден во форма на фетален говедски серум или говедски серумски албумин, што може да ја стабилизира протеинската обвивка на вирусот. Бидејќи растворот за конзервирање е богат со хранливи материи, тој е погоден за преживување на вирусот, но исто така е корисен за растот на бактериите. Ако растворот за конзервирање е контаминиран со бактерии, тој ќе се размножува во големи количини. Јаглерод диоксидот во неговите метаболити ќе предизвика pH вредноста на растворот за конзервирање да падне од розова во жолта. Затоа, повеќето производители додале антибактериски состојки во своите формулации. Препорачаните антибактериски агенси се пеницилин, стрептомицин, гентамицин и полимиксин Б. Натриум азид и 2-метил не се препорачуваат. Инхибитори како што се 4-метил-4-изотиазолин-3-он (MCI) и 5-хлоро-2-метил-4-изотиазолин-3-он (CMCI) бидејќи овие компоненти имаат ефект врз PCR реакцијата. Бидејќи примерокот што го обезбедува овој раствор за конзервирање е во основа жив вирус, оригиналноста на примерокот може да се задржи во најголема мера и може да се користи не само за екстракција и детекција на вирусни нуклеински киселини, туку и за култивирање и изолација на вируси. Сепак, треба да се напомене дека кога се користи за детекција, екстракцијата и прочистувањето на нуклеинската киселина мора да се извршат по инактивацијата.
Друг вид на раствор за конзервирање подготвен врз основа на лизат за екстракција на нуклеинска киселина, главните компоненти се избалансирани соли, EDTA хелатирачки агенс, гванидинска сол (како гванидин изотиоцијанат, гванидин хидрохлорид, итн.), анјонски сурфактант (како додекан натриум сулфат), катјонски сурфактанти (како тетрадецилтриметиламониум оксалат), фенол, 8-хидроксихинолин, дитиотреитол (DTT), протеиназа К и други компоненти. Овој раствор за складирање е за директно раскинување на вирусот за ослободување на нуклеинска киселина и елиминирање на RNase. Ако се користи само за RT-PCR, тој е посоодветен, но лизатот може да го инактивира вирусот. Овој вид примерок не може да се користи за сепарација на вирусни култури.
Хелатирачкиот агенс на метални јони што се користи во растворот за зачувување на вирусот се препорачува да користи EDTA соли (како што се дикалиум етилендиаминтетраоцетна киселина, динатриум етилендиаминтетраоцетна киселина, итн.), а не се препорачува употреба на хепарин (како што се натриум хепарин, литиум хепарин), за да не се влијае на PCR откривањето.
3. Цевка за конзервирање: Материјалот на цевката за конзервирање треба внимателно да се избере. Постојат податоци што сугерираат дека полипропиленот (полипропилен) е поврзан со адсорпција на нуклеинска киселина, особено при висока концентрација на јони на напон, полиетиленот (полиетилен) е попосакуван од полипропиленот (полипропилен). Лесно се сфаќа ДНК/РНК. Пластиката од полиетилен-пропилен полимер (полиаломер) и некои специјално обработени пластични контејнери од полипропилен (полипропилен) се посоодветни за складирање на ДНК/РНК. Дополнително, кога се користи кршлив стапче, цевката за складирање треба да се обиде да избере сад со висина поголема од 8 см за да се спречи прскање и контаминација на содржината кога стапчето е скршено.
4. Вода за раствор за конзервирање во производството: Ултрачистата вода што се користи за раствор за конзервирање во производството треба да се филтрира низ ултрафилтрациска мембрана со молекуларна тежина од 13.000 за да се обезбеди отстранување на полимерните нечистотии од биолошки извори, како што се RNase, DNase и ендотоксин, а не се препорачува обично прочистување. Вода или дестилирана вода.
2. Употреба на цевки за земање примероци од вируси
Земањето примероци со помош на цевката за земање примероци од вирусот е главно поделено на орофарингеално и назофарингеално земање примероци:
1. Земање примероци од орофаринксот: Прво притиснете го јазикот со депресорот за јазик, потоа продолжете ја главата од стапчето за земање примероци во грлото за да ги избришете билатералните фарингеални крајници и задниот фарингеален ѕид, и избришете го задниот фарингеален ѕид со лесна сила, избегнувајќи допирање на јазичната единица.
2. Земање примероци од назофаринксот: измерете го растојанието од врвот на носот до ушната школка со брис и означете го со прст, вметнете го брисчето за земање примероци во носната празнина во правец на вертикалниот нос (лице), брисот треба да се протега најмалку половина од должината на ушната школка до врвот на носот. Оставете го брисот во носот 15-30 секунди, нежно завртете го 3-5 пати и извадете го брисот.
Не е тешко да се види од методот на употреба, без разлика дали станува збор за орофарингеален или назофарингеален брис, земањето примероци е техничка задача, која е тешка и контаминирана. Квалитетот на собраниот примерок е директно поврзан со последователното откривање. Ако собраниот примерок има ниско вирусно оптоварување, лесно е да се предизвикаат лажно негативни резултати, тешко е да се потврди дијагнозата.
Време на објавување: 21 јуни 2020 година
