व्हायरस सॅम्पलिंग ट्यूबबद्दल काही विचार

१. विषाणू सॅम्पलिंग ट्यूबच्या निर्मितीबद्दल
व्हायरस सॅम्पलिंग ट्यूब वैद्यकीय उपकरण उत्पादनांमध्ये येतात. बहुतेक देशांतर्गत उत्पादक प्रथम श्रेणीच्या उत्पादनांनुसार नोंदणीकृत असतात आणि काही कंपन्या द्वितीय श्रेणीच्या उत्पादनांनुसार नोंदणीकृत असतात. अलीकडे, वुहान आणि इतर ठिकाणांच्या आपत्कालीन गरजा पूर्ण करण्यासाठी, अनेक कंपन्यांनी "आपत्कालीन चॅनेल" "प्रथम श्रेणीच्या रेकॉर्ड परवानगीसाठी अर्ज करा" घेतला आहे. व्हायरस सॅम्पलिंग ट्यूबमध्ये सॅम्पलिंग स्वॅब, व्हायरस संरक्षण उपाय आणि बाह्य पॅकेजिंग असते. कोणतेही एकीकृत राष्ट्रीय मानक किंवा उद्योग मानक नसल्यामुळे, विविध उत्पादकांची उत्पादने मोठ्या प्रमाणात बदलतात.

१. सॅम्पलिंग स्वॅब: सॅम्पलिंग स्वॅब थेट सॅम्पलिंग साइटशी संपर्क साधतो आणि सॅम्पलिंग हेडची सामग्री त्यानंतरच्या शोधण्याशी जवळून संबंधित असते. सॅम्पलिंग स्वॅब हेड पॉलिस्टर (पीई) सिंथेटिक फायबर किंवा रेयॉन (मानवनिर्मित फायबर) पासून बनलेले असावे. कॅल्शियम अल्जिनेट स्पंज किंवा लाकडी काठी स्वॅब (बांबूच्या काड्यांसह) वापरता येत नाहीत आणि स्वॅब हेडची सामग्री कापसाचे उत्पादन असू शकत नाही. कापसाच्या फायबरमध्ये प्रथिनांचे तीव्र शोषण असल्याने, नंतरच्या स्टोरेज सोल्युशनमध्ये ते टाकणे सोपे नसते; आणि जेव्हा कॅल्शियम अल्जिनेट आणि लाकडी घटक असलेली लाकडी काठी किंवा बांबूची काठी तुटते तेव्हा स्टोरेज सोल्युशनमध्ये भिजवल्याने प्रथिने देखील शोषली जातील आणि त्यानंतरच्या पीसीआर प्रतिक्रिया देखील रोखू शकतात. स्वॅब हेडच्या सामग्रीसाठी पीई फायबर, पॉलिस्टर फायबर आणि पॉलीप्रॉपिलीन फायबर सारखे कृत्रिम तंतू वापरण्याची शिफारस केली जाते. कापसासारखे नैसर्गिक तंतू शिफारसित नाहीत. नायलॉन तंतू देखील शिफारसित नाहीत कारण नायलॉन तंतू (टूथब्रश हेड्ससारखे) पाणी शोषून घेतात. खराब, परिणामी सॅम्पलिंग व्हॉल्यूम अपुरा पडतो, ज्यामुळे शोध दरावर परिणाम होतो. कॅल्शियम अल्जिनेट स्पंज स्वॅब मटेरियलच्या नमुना घेण्यासाठी निषिद्ध आहे! स्वॅब हँडलचे दोन प्रकार आहेत: तुटलेले आणि बिल्ट-इन. सॅम्पलिंगनंतर तुटलेला स्वॅब स्टोरेज ट्यूबमध्ये ठेवला जातो आणि सॅम्पलिंग हेडजवळील स्थितीतून तुटल्यानंतर ट्यूब कॅप तुटलेली असते; बिल्ट-इन स्वॅब सॅम्पलिंगनंतर सॅम्पलिंग स्वॅब थेट स्टोरेज ट्यूबमध्ये ठेवतो आणि स्टोरेज ट्यूब ट्यूब कव्हर हँडलच्या वरच्या भागाशी लहान छिद्र संरेखित करा आणि ट्यूब कव्हर घट्ट करा. दोन्ही पद्धतींची तुलना केल्यास, नंतरचे तुलनेने सुरक्षित आहे. जेव्हा तुटलेला स्वॅब लहान आकाराच्या स्टोरेज ट्यूबसह वापरला जातो, तेव्हा तुटल्यावर ट्यूबमध्ये द्रव स्प्लॅश होऊ शकतो आणि उत्पादनाच्या अयोग्य वापरामुळे दूषित होण्याच्या जोखमीकडे पूर्ण लक्ष दिले पाहिजे. स्वॅब हँडलच्या मटेरियलसाठी पोकळ पॉलीस्टीरिन (PS) एक्सट्रुडेड ट्यूब किंवा पॉलीप्रॉपिलीन (PP) इंजेक्शन क्रिझिंग ट्यूब वापरण्याची शिफारस केली जाते. कोणतीही सामग्री वापरली असली तरी, कॅल्शियम अल्जिनेट अॅडिटीव्ह जोडता येत नाहीत; लाकडी काठ्या किंवा बांबूच्या काड्या. थोडक्यात, सॅम्पलिंग स्वॅबने सॅम्पलिंगचे प्रमाण आणि रिलीजचे प्रमाण सुनिश्चित केले पाहिजे आणि निवडलेल्या मटेरियलमध्ये असे पदार्थ नसावेत जे नंतरच्या चाचणीवर परिणाम करतात.

२. विषाणू संरक्षण उपाय: बाजारात मोठ्या प्रमाणात वापरल्या जाणाऱ्या दोन प्रकारच्या विषाणू संरक्षण उपाय आहेत, एक म्हणजे वाहतूक माध्यमावर आधारित सुधारित व्हायरस देखभाल उपाय आणि दुसरा म्हणजे न्यूक्लिक अॅसिड काढण्यासाठी लायसेटसाठी सुधारित द्रावण.
पहिल्या घटकाचा मुख्य घटक म्हणजे ईगलचे बेसिक कल्चर मीडियम (MEM) किंवा हँकचे संतुलित मीठ, जे विषाणूंच्या अस्तित्वासाठी आवश्यक असलेले क्षार, अमीनो आम्ल, जीवनसत्त्वे, ग्लुकोज आणि प्रथिने यांच्यासोबत जोडले जाते. या साठवण द्रावणात फिनॉल लाल सोडियम मीठ सूचक आणि द्रावण म्हणून वापरले जाते. जेव्हा pH मूल्य 6.6-8.0 असते तेव्हा द्रावण गुलाबी असते. आवश्यक ग्लुकोज, L-ग्लुटामाइन आणि प्रथिने प्रिझर्व्हेशन द्रावणात जोडले जातात. हे प्रथिने गर्भातील बोवाइन सीरम किंवा बोवाइन सीरम अल्ब्युमिनच्या स्वरूपात प्रदान केले जातात, जे विषाणूच्या प्रथिने कवचाला स्थिर करू शकतात. प्रिझर्व्हेशन द्रावण पोषक तत्वांनी समृद्ध असल्याने, ते विषाणूच्या अस्तित्वासाठी अनुकूल आहे परंतु बॅक्टेरियाच्या वाढीस देखील फायदेशीर आहे. जर प्रिझर्व्हेशन द्रावण बॅक्टेरियाने दूषित असेल तर ते मोठ्या प्रमाणात वाढेल. त्याच्या मेटाबोलाइट्समधील कार्बन डायऑक्साइडमुळे प्रिझर्व्हेशन द्रावणाचा pH गुलाबी रंगावरून पिवळा होतो. म्हणून, बहुतेक उत्पादकांनी त्यांच्या फॉर्म्युलेशनमध्ये बॅक्टेरियाविरोधी घटक जोडले आहेत. शिफारस केलेले अँटीबॅक्टेरियल एजंट म्हणजे पेनिसिलिन, स्ट्रेप्टोमायसिन, जेंटॅमिसिन आणि पॉलीमायक्सिन बी. सोडियम अझाइड आणि २-मिथाइल हे ४-मिथाइल-४-आयसोथियाझोलिन-३-वन (एमसीआय) आणि ५-क्लोरो-२-मिथाइल-४-आयसोथियाझोलिन-३-वन (सीएमसीआय) सारखे इनहिबिटर वापरण्याची शिफारस केलेली नाही कारण या घटकांचा पीसीआर अभिक्रियेवर परिणाम होतो. या प्रिझर्व्हेशन सोल्युशनद्वारे प्रदान केलेला नमुना मुळात एक जिवंत विषाणू असल्याने, नमुन्याची मौलिकता जास्तीत जास्त ठेवता येते आणि त्याचा वापर केवळ विषाणू न्यूक्लिक अॅसिड काढण्यासाठी आणि शोधण्यासाठीच नाही तर विषाणूंची लागवड आणि पृथक्करण करण्यासाठी देखील केला जाऊ शकतो. तथापि, हे लक्षात घेतले पाहिजे की शोधण्यासाठी वापरताना, निष्क्रियतेनंतर न्यूक्लिक अॅसिड काढणे आणि शुद्धीकरण करणे आवश्यक आहे.
न्यूक्लिक अॅसिड एक्सट्रॅक्शन लायसेटवर आधारित आणखी एक प्रकारचे प्रिझर्वेशन सोल्यूशन तयार केले जाते, मुख्य घटक म्हणजे संतुलित क्षार, EDTA चेलेटिंग एजंट, ग्वानिडाइन मीठ (जसे की ग्वानिडाइन आयसोथियोसायनेट, ग्वानिडाइन हायड्रोक्लोराइड इ.), अॅनिओनिक सर्फॅक्टंट (जसे की डोडेकेन सोडियम सल्फेट), कॅशनिक सर्फॅक्टंट्स (जसे की टेट्राडेसिलट्रायमेथिलॅमोनियम ऑक्सालेट), फिनॉल, 8-हायड्रॉक्सीक्विनोलिन, डायथिओथ्रेइटॉल (DTT), प्रोटीनेज के आणि इतर घटक. हे स्टोरेज सोल्यूशन न्यूक्लिक अॅसिड सोडण्यासाठी आणि RNase काढून टाकण्यासाठी थेट विषाणूला क्लीव्ह करण्यासाठी आहे. जर फक्त RT-PCR साठी वापरले तर ते अधिक योग्य आहे, परंतु लायसेट विषाणूला निष्क्रिय करू शकते. या प्रकारचा नमुना विषाणू संस्कृती वेगळे करण्यासाठी वापरला जाऊ शकत नाही.

विषाणू संरक्षण द्रावणात वापरल्या जाणाऱ्या धातूच्या आयन चेलेटिंग एजंटमध्ये EDTA क्षार (जसे की डायपोटॅशियम इथिलेनेडायमिनटेट्राएसेटिक अॅसिड, डायसोडियम इथिलेनेडायमिनटेट्राएसेटिक अॅसिड, इ.) वापरण्याची शिफारस केली जाते आणि पीसीआर शोधण्यावर परिणाम होऊ नये म्हणून हेपरिन (जसे की सोडियम हेपरिन, लिथियम हेपरिन) वापरण्याची शिफारस केलेली नाही.
३. प्रिझर्वेशन ट्यूब: प्रिझर्वेशन ट्यूबची सामग्री काळजीपूर्वक निवडली पाहिजे. असे डेटा आहेत की पॉलीप्रोपायलीन (पॉलीप्रोपायलीन) न्यूक्लिक अॅसिडच्या शोषणाशी संबंधित आहे, विशेषतः उच्च ताण आयन एकाग्रतेवर, पॉलीप्रोपायलीन (पॉलीप्रोपायलीन) पेक्षा पॉलीप्रोपायलीन (पॉलीप्रोपायलीन) अधिक पसंत केले जाते जे डीएनए/आरएनए पकडण्यास सोपे आहे. पॉलीप्रोपायलीन-प्रोपायलीन पॉलिमर (पॉलीअॅलोमर) प्लास्टिक आणि काही विशेष प्रक्रिया केलेले पॉलीप्रोपायलीन (पॉलीप्रोपायलीन) प्लास्टिक कंटेनर डीएनए/आरएनए साठवण्यासाठी अधिक योग्य आहेत. याव्यतिरिक्त, ब्रेकेबल स्वॅब वापरताना, स्टोरेज ट्यूबने ८ सेमी पेक्षा जास्त उंचीचा कंटेनर निवडण्याचा प्रयत्न करावा जेणेकरून स्वॅब तुटल्यावर त्यातील सामग्री शिंपडून दूषित होऊ नये.

४. उत्पादनासाठी पाणी साठवण्याचे द्रावण: उत्पादनासाठी वापरण्यात येणारे अल्ट्राप्युअर पाणी १३,००० आण्विक वजनाच्या अल्ट्राफिल्ट्रेशन झिल्लीद्वारे फिल्टर केले पाहिजे जेणेकरून RNase, DNase आणि एंडोटॉक्सिन सारख्या जैविक स्रोतांमधून पॉलिमर अशुद्धता काढून टाकता येतील आणि सामान्य शुद्धीकरणाची शिफारस केलेली नाही. पाणी किंवा डिस्टिल्ड वॉटर.

२. विषाणू सॅम्पलिंग ट्यूबचा वापर

विषाणू सॅम्पलिंग ट्यूब वापरून सॅम्पलिंग प्रामुख्याने ऑरोफॅरिंजियल सॅम्पलिंग आणि नासोफॅरिंजियल सॅम्पलिंगमध्ये विभागले गेले आहे:

१. ऑरोफॅरिंजियल सॅम्पलिंग: प्रथम जीभ डिप्रेसरने दाबा, नंतर सॅम्पलिंग स्वॅबचे डोके घशात पसरवा जेणेकरून द्विपक्षीय फॅरेंजियल टॉन्सिल आणि पोस्टरियर फॅरेंजियल वॉल पुसता येईल आणि पोस्टरियर फॅरेंजियल वॉल हलक्या शक्तीने पुसता येईल, जीभ युनिटला स्पर्श करणे टाळा.

२. नाकपुडीचे नमुने घेणे: नाकाच्या टोकापासून कानाच्या कण्यापर्यंतचे अंतर स्वॅबने मोजा आणि बोटाने खूण करा, सॅम्पलिंग स्वॅब नाकाच्या उभ्या भागाच्या (चेहऱ्याच्या) दिशेने अनुनासिक पोकळीत घाला, स्वॅब कानाच्या कण्यापासून नाकाच्या टोकापर्यंतच्या लांबीच्या किमान अर्ध्या लांबीपर्यंत वाढला पाहिजे, स्वॅब नाकात १५-३० सेकंदांसाठी सोडा, हळूवारपणे ३-५ वेळा फिरवा आणि स्वॅब बाहेर काढा.
वापरण्याच्या पद्धतीवरून हे पाहणे कठीण नाही की ते ऑरोफॅरिंजियल स्वॅब आहे की नाकातील स्वॅब, नमुना घेणे हे एक तांत्रिक काम आहे, जे कठीण आणि दूषित आहे. गोळा केलेल्या नमुन्याची गुणवत्ता थेट त्यानंतरच्या तपासणीशी संबंधित आहे. जर गोळा केलेल्या नमुन्यात विषाणूचा भार कमी असेल, खोटे निगेटिव्ह येणे सोपे असेल, तर निदानाची पुष्टी करणे कठीण असेल.