1. Nípa ṣíṣe àwọn páìpù àyẹ̀wò kòkòrò àrùn
Àwọn ọ̀pá ìdánwò àrùn kòkòrò àrùn jẹ́ ti àwọn ọjà ẹ̀rọ ìṣègùn. Ọ̀pọ̀lọpọ̀ àwọn olùṣe àgbékalẹ̀ nílé ni a forúkọ sílẹ̀ gẹ́gẹ́ bí àwọn ọjà ìpele àkọ́kọ́, àwọn ilé-iṣẹ́ díẹ̀ sì ni a forúkọ sílẹ̀ gẹ́gẹ́ bí àwọn ọjà ìpele kejì. Láìpẹ́ yìí, láti lè bá àwọn àìní pajawiri ti Wuhan àti àwọn ibòmíràn mu, ọ̀pọ̀ ilé-iṣẹ́ ti gba “ọ̀nà pajawiri” “Béèrè fún àṣẹ àkọsílẹ̀ ìpele àkọ́kọ́.” Pọ́ọ̀bù ìdánwò àrùn kòkòrò àrùn náà jẹ́ ti ìṣàyẹ̀wò ìṣàyẹ̀wò, omi ìpamọ́ àrùn kòkòrò àrùn àti àpò ìta. Nítorí pé kò sí ìwọ̀n orílẹ̀-èdè tàbí ìwọ̀n ilé-iṣẹ́ tí a ṣọ̀kan, àwọn ọjà onírúurú olùṣe àgbékalẹ̀ yàtọ̀ síra gidigidi.
1. Swáàbù ìṣàyẹ̀wò: Swáàbù ìṣàyẹ̀wò náà kan ibi tí a ti ṣe àyẹ̀wò náà ní tààrà, ohun èlò orí ìṣàyẹ̀wò náà sì ní í ṣe pẹ̀lú ìwádìí tí ó tẹ̀lé e. Orí ìṣàyẹ̀wò náà yẹ kí ó jẹ́ ti okùn àgbékalẹ̀ Polyester (PE) tàbí Rayon (okùn tí a ṣe láti ọwọ́ ènìyàn). A kò le lo sponge calcium alginate tàbí swáàbù igi (pẹ̀lú swáàbù igi), ohun èlò orí ìṣàyẹ̀wò náà kò sì le jẹ́ àwọn ọjà owú. Nítorí pé okùn owú ní ìfàmọ́ra tó lágbára ti amuaradagba, kò rọrùn láti yọ sínú omi ìpamọ́ tí ó tẹ̀lé e; àti nígbà tí okùn igi tàbí swáàbù igi tí ó ní calcium alginate àti àwọn èròjà igi bá fọ́, fífọ sínú omi ìpamọ́ náà yóò tún fa amuaradagba, àti pé yóò lè dí ìṣe PCR tí ó tẹ̀lé e lọ́wọ́. A gbani nímọ̀ràn láti lo okùn àgbékalẹ̀ bíi okùn PE, okùn polyester àti okùn polypropylene fún ohun èlò orí ìṣàyẹ̀wò náà. A kò gbani nímọ̀ràn okùn àdánidá bíi owú. A kò gbani nímọ̀ràn okùn nylon nítorí pé okùn nylon (tí ó jọ ti orí eyín ìfọ́) ń fa omi. Kò dára, tí ó ń yọrí sí ìwọ̀n ìṣàyẹ̀wò tí kò tó, tí ó ń nípa lórí ìwọ̀n ìwádìí náà. Okùn calcium alginate ni a kà léèwọ̀ fún àyẹ̀wò ohun èlò ìṣàyẹ̀wò! Ọwọ́ ìfàmọ́ra ní oríṣi méjì: ó ti fọ́ àti ó ti gbó. A gbé ìfàmọ́ra náà sínú ọpọ́n ìpamọ́ lẹ́yìn tí a bá ti ṣe àyẹ̀wò, a sì ti fọ́ ìbòrí ọpọ́n náà lẹ́yìn tí a bá ti fọ́ láti ibi tí ó wà nítòsí orí ìṣàyẹ̀wò náà; ìfàmọ́ra náà ní tààrà fi ìfàmọ́ra náà sínú ọpọ́n ìpamọ́ náà lẹ́yìn tí a bá ti ṣe àyẹ̀wò náà, a sì ti kọ́ ìbòrí ọpọ́n ìpamọ́ náà ní ọ̀nà tí ó tọ́. Ṣe àfiwé àwọn ọ̀nà méjèèjì, èyí tí ó gbẹ̀yìn náà kò léwu. Tí a bá lo ìfàmọ́ra náà pẹ̀lú ọpọ́n ìpamọ́ kékeré kan, ó lè fa ìfọ́ omi sínú ọpọ́n náà nígbà tí ó bá fọ́, a sì gbọ́dọ̀ kíyèsí ewu ìbàjẹ́ tí lílo ọjà náà lọ́nà tí kò tọ́ lè fà. A gbani nímọ̀ràn láti lo ọpọ́n ìfàmọ́ra polystyrene (PS) tí a fi sínú rẹ̀ tàbí ọpọ́n ìfàmọ́ra polypropylene (PP) fún ohun èlò ọpọ́n ìfàmọ́ra náà. Ohunkóhun tí a bá lò, a kò gbọdọ̀ fi àwọn àfikún calcium alginate kún un; ọpọ́n igi tàbí ọpọ́n Bamboo. Ní kúkúrú, ìfàmọ́ra náà gbọ́dọ̀ rí i dájú pé iye ìṣàyẹ̀wò náà àti iye ìtújáde náà wà níbẹ̀, àwọn ohun èlò tí a yàn kò sì gbọdọ̀ ní àwọn ohun èlò tí ó ní ipa lórí ìdánwò tí ó tẹ̀lé e.
2. Ojutu fun itoju kokoro arun: Iru ojutu aabo kokoro meji lo wa ni oja ti a lo ni gbogbogbo, ọkan jẹ ojutu itọju kokoro arun ti a yipada ti o da lori ọna gbigbe, ati ekeji jẹ ojutu ti a yipada fun lysate yiyọ nucleic acid.
Ohun pàtàkì nínú èyí tí ó wà nínú rẹ̀ ni Eagle's basic culture medium (MEM) tàbí iyọ̀ Hank tí ó wà ní ìwọ̀ntúnwọ̀nsì, èyí tí a fi iyọ̀, amino acids, vitamins, glucose àti protein tí ó ṣe pàtàkì fún ìwàláàyè kòkòrò àrùn kún. Oògùn ìpamọ́ yìí ń lo iyọ̀ phenol pupa sodium gẹ́gẹ́ bí àmì àti ojutu. Nígbà tí iye pH bá jẹ́ 6.6-8.0, ojutu náà jẹ́ pink. A fi glucose, L-glutamine àti protein tí ó yẹ kún ojutu itoju. A pese amuaradagba náà ní irisi serum mavine fetal tàbí bovine serum albumin, èyí tí ó lè mú kí ikarahun amuaradagba kòkòrò àrùn náà dúró ṣinṣin. Nítorí pé ojutu itoju náà ní àwọn èròjà oúnjẹ, ó ń ṣe ìrànlọ́wọ́ fún ìwàláàyè kòkòrò àrùn náà ṣùgbọ́n ó tún ń ṣe àǹfààní fún ìdàgbàsókè kòkòrò àrùn náà. Tí ojutu itoju náà bá ní bakteria jẹ́, yóò pọ̀ sí i ní iye púpọ̀. Erogba dioxide nínú metabolites rẹ̀ yóò mú kí ojutu itoju pH jábọ́ láti pupa Yíyọ ofeefee. Nítorí náà, ọ̀pọ̀lọpọ̀ àwọn olùpèsè ti fi àwọn eroja antibacterial kún àwọn agbekalẹ wọn. Àwọn ohun tí a dámọ̀ràn láti fi pa bakiteria jẹ́ penicillin, streptomycin, gentamicin àti polymyxin B. A kò gbani nímọ̀ràn láti fi Sodium azide àti 2-methyl ṣe àwọn ohun tí ó ń dènà àrùn bíi 4-methyl-4-isothiazolin-3-one (MCI) àti 5-chloro-2-methyl-4-isothiazolin-3-one (CMCI) nítorí pé àwọn èròjà wọ̀nyí ní ipa lórí ìṣe PCR. Níwọ̀n ìgbà tí àpẹẹrẹ tí a pèsè láti inú omi ìpamọ́ yìí jẹ́ kòkòrò àrùn alààyè, a lè pa àkọ́bẹ̀rẹ̀ àpẹẹrẹ náà mọ́ dé àyè tó ga jùlọ, a sì lè lò ó fún yíyọ àti wíwá àwọn kòkòrò àrùn nìkan, ṣùgbọ́n fún gbígbin àti yíya àwọn kòkòrò àrùn sọ́tọ̀ pẹ̀lú. Síbẹ̀síbẹ̀, ó yẹ kí a kíyèsí pé nígbà tí a bá lò ó fún wíwá, yíyọ àti mímú àwọn kòkòrò àrùn nucleic acid kúrò gbọ́dọ̀ wáyé lẹ́yìn tí a bá ti dá a dúró.
Irú omi ìpamọ́ mìíràn tí a pèsè láti inú lysate ìyọkúrò nucleic acid, àwọn èròjà pàtàkì ni iyọ̀ tí ó wà ní ìwọ̀ntúnwọ̀nsì, EDTA chelating agent, iyọ̀ guanidine (bíi guanidine isothiocyanate, guanidine hydrochloride, àti bẹ́ẹ̀ bẹ́ẹ̀ lọ), anionic surfactant (bíi dodecane Sodium sulfate), cationic surfactants (bíi tetradecyltrimethylammonium oxalate), phenol, 8-hydroxyquinoline, dithiothreitol (DTT), proteinase K àti àwọn èròjà mìíràn. Ojútùú ìpamọ́ yìí ni láti gé kòkòrò àrùn náà ní tààrà láti tú nucleic acid jáde kí ó sì yọ RNase kúrò. Tí a bá lò ó fún RT-PCR nìkan, ó dára jù, ṣùgbọ́n lysate náà lè pa kòkòrò àrùn náà run. Irú àpẹẹrẹ yìí kò ṣeé lò fún ìyàsọ́tọ̀ àṣà kòkòrò àrùn.
A gbani nímọ̀ràn pé kí a lo iyọ̀ EDTA (bíi dipotassium ethylenediaminetetraacetic acid, disodium ethylenediaminetetraacetic acid, àti bẹ́ẹ̀ bẹ́ẹ̀ lọ), a kò sì gbà nímọ̀ràn pé kí a lo heparin (bíi sodium heparin, lithium heparin), kí ó má baà ní ipa lórí ìwádìí PCR.
3. Pọ́ọ̀bù ìpamọ́: Ó yẹ kí a yan ohun èlò tí ó wà nínú pọ́ọ̀bù ìpamọ́ pẹ̀lú ìṣọ́ra. Àwọn ìwádìí kan wà tí ó fihàn pé polypropylene (Polypropylene) ní í ṣe pẹ̀lú fífa ásíìdì nucleic, pàápàá jùlọ ní ibi tí a ti ń kó ion sókè, polyethylene (Polyethylene) dára ju polypropylene (Polypropylene) lọ. Ó rọrùn láti gbá DNA/RNA mú. Pọ́ọ̀bù polyethylene-propylene (Polyallomer) àti àwọn àpótí ṣiṣu polypropylene (Polypropylene) tí a ṣe àgbékalẹ̀ ní pàtàkì dára jù fún ìtọ́jú DNA/RNA. Ní àfikún, nígbà tí a bá ń lo swab tí ó lè fọ́, pọ́ọ̀bù ìpamọ́ yẹ kí ó gbìyànjú láti yan àpótí kan tí ó ga ju 8 cm lọ láti dènà kí àwọn ohun tí ó wà nínú rẹ̀ má baà tú jáde tàbí kí ó ba jẹ́ nígbà tí swab náà bá fọ́.
4. Omi fún ìtọ́jú ìṣẹ̀dá: Omi ultrapure tí a lò fún ìtọ́jú ìṣẹ̀dá gbọ́dọ̀ jẹ́ àlẹ̀mọ́ nípasẹ̀ àwọ̀ ultrafiltration pẹ̀lú ìwọ̀n molikula ti 13,000 láti rí i dájú pé a ti yọ àwọn èérí polima kúrò láti orísun ẹ̀dá alààyè bíi RNase, DNase, àti endotoxin, a kò sì gbani nímọ̀ràn láti sọ omi di mímọ́ lásán. Omi tàbí omi tí a ti yọ.
2. Lilo awọn ọpọn ayẹwo kokoro arun
A pín àyẹ̀wò nípa lílo ọ̀pá àyẹ̀wò kòkòrò àrùn náà sí ọ̀nà pàtàkì sí àyẹ̀wò ọrùn àti àyẹ̀wò ọrùn:
1. Àyẹ̀wò Oropharyngeal: Kọ́kọ́ tẹ ahọ́n pẹ̀lú ohun tí ń mú kí ahọ́n dẹ́kun, lẹ́yìn náà na orí ìṣàpẹẹrẹ náà sínú ọ̀fun láti nu àwọn ìdọ̀tí pharyngeal méjì àti ògiri pharyngeal posterior nu, kí o sì fi agbára díẹ̀ nu ògiri pharyngeal posterior nu, kí o má baà fọwọ́ kan ẹ̀yà ahọ́n náà.
2. Àyẹ̀wò Nasopharyngeal: wọn ijinna lati opin imu si eti lobe pẹlu swab ki o si fi ika kan samisi, fi swab ayẹwo sinu iho imu ni itọsọna ti imu inaro (oju), swab naa yẹ ki o na o kere ju idaji gigun eti lobe si opin imu, Fi swab silẹ ni imu fun awọn aaya 15-30, yipo ni pẹkipẹki ni igba 3-5, ki o si yọ swab naa kuro.
Kò ṣòro láti rí i láti inú ọ̀nà tí a gbà ń lò ó, bóyá ìpara okùn tàbí ìpara nasopharyngeal, ìṣàyẹ̀wò jẹ́ iṣẹ́-ìmọ̀-ẹ̀rọ, èyí tí ó ṣòro àti tí ó ní ìbàjẹ́. Dídára ìṣàyẹ̀wò tí a gbà ní í ṣe pẹ̀lú ìwádìí tí ó tẹ̀lé e. Tí ìṣàyẹ̀wò tí a gbà bá ní ìwúwo fáírọ́ọ̀sì tí ó kéré, tí ó rọrùn láti fa àwọn àìdáa, ó ṣòro láti fìdí àyẹ̀wò múlẹ̀.
Àkókò ìfìwéránṣẹ́: Oṣù Kẹfà-21-2020
