עטלעכע געדאנקען וועגן ווירוס סאַמפּלינג רער

1. וועגן דער פאבריקאציע פון ווירוס סאַמפּלינג רערן
ווירוס סאַמפּלינג רערן געהערן צו מעדיצינישע דעווייס פּראָדוקטן. רובֿ היגע פאַבריקאַנטן זענען רעגיסטרירט לויט די ערשט-קלאַס פּראָדוקטן, און ווייניק קאָמפּאַניעס זענען רעגיסטרירט לויט די צווייט-קלאַס פּראָדוקטן. לעצטנס, כּדי צו באַפרידיקן די נויטפאַל באדערפענישן פון וווהאַן און אַנדערע ערטער, האָבן פילע קאָמפּאַניעס גענומען דעם "נויטפאַל קאַנאַל" "אַפּלייען פֿאַר די ערשט-קלאַס רעקאָרד דערלויבעניש". די ווירוס סאַמפּלינג רער איז צוזאַמענגעשטעלט פון אַ סאַמפּלינג שוואָם, ווירוס פּרעזערוויישאַן לייזונג און ויסווייניקסט פּאַקאַדזשינג. ווייַל עס איז נישט קיין פאַראייניקטע נאַציאָנאַלע סטאַנדאַרט אָדער אינדוסטריע סטאַנדאַרט, די פּראָדוקטן פון פאַרשידענע פאַבריקאַנטן זענען זייער אַנדערש.

1. מוסטערונג שוואָם: דער מוסטערונג שוואָם קומט גלייך אין קאָנטאַקט מיטן מוסטערונג אָרט, און דער מאַטעריאַל פֿון דעם מוסטערונג קאָפּ איז ענג פֿאַרבונדן מיטן דערנאָך דעטעקציע. דער מוסטערונג שוואָם קאָפּ זאָל זיין געמאַכט פֿון פּאָליעסטער (PE) סינטעטישער פֿאַזער אָדער רייאָן (קינסטלעכער פֿאַזער). קאַלסיום אַלדזשינייט שוואָם אָדער האָלץ שטעקן שוואָמען (אַרייַנגערעכנט באַמבו שטעקן) קען נישט ווערן גענוצט, און דער מאַטעריאַל פֿון דעם שוואָם קאָפּ קען נישט זיין פֿון וואַטע פּראָדוקטן. ווייל וואַטע פֿאַזער האט אַ שטאַרקע אַדסאָרפּציע פֿון פּראָטעין, איז עס נישט גרינג צו פֿאַרלאָזן אין דער דערנאָך סטאָרידזש לייזונג; און ווען אַ האָלץ שטעקן אָדער באַמבו שטעקן וואָס כּולל קאַלסיום אַלדזשינייט און האָלץ קאָמפּאָנענטן איז צעבראָכן, וועט אייַנווייקן אין דער סטאָרידזש לייזונג אויך אַדסאָרבירן פּראָטעין, און אפילו עס קען שטערן די דערנאָך PCR רעאַקציע. עס איז רעקאָמענדירט צו נוצן סינטעטיש פֿאַזערס ווי PE פֿאַזער, פּאָליעסטער פֿאַזער און פּאָליפּראָפּילען פֿאַזער פֿאַר דעם מאַטעריאַל פֿון דעם שוואָם קאָפּ. נאַטירלעכע פֿאַזערס ווי וואַטע זענען נישט רעקאָמענדירט. ניילאָן פֿאַזערס זענען אויך נישט רעקאָמענדירט ווייל ניילאָן פֿאַזערס (ענלעך צו ציינבערשטל קעפּ) אַבזאָרבירן וואַסער. שלעכט, וואָס רעזולטירט אין נישט גענוג מוסטערונג באַנד, וואָס אַפֿעקטירט די דעטעקציע קורס. קאַלסיום אַלדזשינייט שוואָם איז פֿאַרווערט פֿאַר מוסטערונג שוואָם מאַטעריאַל! שוואָם הענטל האט צוויי טייפּס: צעבראָכן און איינגעבויט. דער צעבראָכענער שוואָם ווערט געלייגט אין דער סטאָרידזש רער נאָך דעם סאַמפּלינג, און דער רער דעקל ווערט צעבראָכן נאָכדעם וואָס ער איז צעבראָכן געוואָרן פֿון דער פּאָזיציע לעבן דעם סאַמפּלינג קאָפּ; דער איינגעבויטער שוואָם לייגט גלייך דעם סאַמפּלינג שוואָם אין דער סטאָרידזש רער נאָך דעם סאַמפּלינג, און דער סטאָרידזש רער רער דעקל ווערט איינגעבויט. גלייכט אויס דאָס קליינע לאָך מיטן שפּיץ פֿון דער הענטל און פֿעסטשטאַרקט דעם רער דעקל. פֿאַרגלייכנדיק די צוויי מעטאָדן, איז די לעצטערע רעלאַטיוו זיכער. ווען דער צעבראָכענער שוואָם ווערט גענוצט צוזאַמען מיט אַ קלענערער גרייס סטאָרידזש רער, קען עס פֿאַראורזאַכן פֿליסיקייט שפּריצן אין דער רער ווען צעבראָכן, און מען זאָל באַצאָלן פֿולע ופֿמערקזאַמקייט צו דעם ריזיקאָ פֿון קאָנטאַמינאַציע פֿאַראורזאַכט דורך אומרעכט נוצן פֿון דעם פּראָדוקט. עס איז רעקאָמענדירט צו נוצן ליידיקע פּאָליסטירען (PS) אויסגעפּרעסטע רער אָדער פּאָליפּראָפּילען (PP) אינדזשעקשאַן קנייטש רער פֿאַר דעם מאַטעריאַל פֿון דעם שוואָם הענטל. נישט קיין חילוק וואָסער מאַטעריאַל מען נוצט, קען מען נישט צולייגן קאַלסיום אַלדזשינייט אַדיטיוון; האָלץ שטעקן אָדער באַמבו שטעקן. אין קורצן, דער סאַמפּלינג שוואָם זאָל זיכער מאַכן די מאָס פֿון סאַמפּלינג און די מאָס פֿון פֿרײַלאָז, און די אויסגעקליבענע מאַטעריאַלן טאָרן נישט האָבן סובסטאַנצן וואָס ווירקן אויף דער ווײַטערדיקער טעסטינג.

2. ווירוס פּרעזערוויישאַן לייזונג: עס זענען צוויי מינים ווירוס פּרעזערוויישאַן לייזונגען וואָס ווערן וויידלי געניצט אויפן מאַרק, איינע איז אַ ווירוס וישאַלט לייזונג מאָדיפיצירט באַזירט אויף דעם טראַנספּאָרט מעדיום, און די אַנדערע איז אַ מאָדיפיצירט לייזונג פֿאַר נוקלעיק זויער עקסטראַקציע ליסאַטע.
דער הויפּט קאָמפּאָנענט פון דעם ערשטן איז Eagle's basic culture medium (MEM) אדער Hank's באַלאַנסט זאַלץ, וואָס ווערט צוגעגעבן מיט די זאַלץ, אַמינאָ זויערן, וויטאַמינס, גלוקאָזע און פּראָטעין וואָס זענען נייטיק פֿאַר ווירוס איבערלעבן. די סטאָרידזש לייזונג ניצט פענאָל רויט נאַטריום זאַלץ ווי אַן אינדיקאַטאָר און לייזונג. ווען דער pH ווערט איז 6.6-8.0, איז די לייזונג ראָזעווע. די נייטיקע גלוקאָזע, L-גלוטאַמין און פּראָטעין ווערן צוגעגעבן צו דער פּרעזערוויישאַן לייזונג. דער פּראָטעין ווערט צוגעשטעלט אין דער פאָרעם פון פעטאַל רינדער סערום אָדער רינדער סערום אַלבומין, וואָס קען סטאַביליזירן די פּראָטעין שאָל פון דעם ווירוס. ווייַל די פּרעזערוויישאַן לייזונג איז רייך אין נוטריאַנץ, איז עס גינסטיק פֿאַר דעם איבערלעבן פון דעם ווירוס אָבער אויך נוציק פֿאַר דעם וווּקס פון באַקטעריע. אויב די פּרעזערוויישאַן לייזונג איז קאַנטאַמאַנייטאַד מיט באַקטעריע, וועט עס זיך פֿאַרמערן אין גרויסע קוואַנטאַטיז. דער טשאַד דייאַקסייד אין זייַנע מעטאַבאָליטן וועט פאַרשאַפן אַז די פּרעזערוויישאַן לייזונג pH זאָל פאַלן פון ראָזעווע צו געל. דעריבער, האָבן רובֿ פאַבריקאַנטן צוגעגעבן אַנטיבאַקטיריעלע ינגרידיאַנץ צו זייערע פאָרמולאַציעס. די רעקאָמענדירטע אַנטיבאַקטיריעלע אגענטן זענען פּעניסיללין, סטרעפּטאָמיצין, דזשענטאַמיסין און פּאָלימיקסין ב. נאַטריום אַזיד און 2-מעטיל זענען נישט רעקאָמענדירט. אינהיביטאָרן ווי 4-מעטיל-4-איזאָטהיאַזאָלין-3-אָן (MCI) און 5-טשלאָראָ-2-מעטיל-4-איזאָטהיאַזאָלין-3-אָן (CMCI) ווייל די קאָמפּאָנענטן האָבן אַן עפֿעקט אויף דער PCR רעאַקציע. ווייל די מוסטער וואָס ווערט צוגעשטעלט דורך דעם פּרעזערוואַציע לייזונג איז באַזירט אויף אַ לעבעדיקן ווירוס, קען די אָריגינאַליטעט פון דער מוסטער ווערן געהאַלטן אין דער גרעסטער מאָס, און עס קען ווערן גענוצט ניט נאָר פֿאַר דער עקסטראַקציע און דעטעקציע פון ווירוס נוקלעאיק זויערן, נאָר אויך פֿאַר דער קולטיוואַציע און איזאָלאַציע פון ווירוסן. אָבער, עס זאָל ווערן באַמערקט אַז ווען גענוצט פֿאַר דעטעקציע, מוז נוקלעאיק זויער עקסטראַקציע און רייניקונג ווערן דורכגעפירט נאָך ינאַקטיוואַציע.
נאך א סארט קאנסערוואציע לייזונג צוגעגרייט באזירט אויף נוקלעאין זויער עקסטראקציע ליסאטע, די הויפט קאמפאנענטן זענען באלאנסירטע זאלצן, EDTA כעלאטינג אגענט, גואנידין זאלץ (אזוי ווי גואנידין איזאטהיאסיאנאט, גואנידין הידראָטשלאָריד, אאז"וו), אניאנישע סורפאַקטאנט (אזוי ווי דאדעקאן סאדיום סולפאט), קאטיאנישע סורפאַקטאנטן (אזוי ווי טעטראדעצילטרימעטהילאמאניום אקסאלאט), פענאל, 8-הידראקסיקווינאלין, דיטיאטהרעיטאל (DTT), פראטעינאזע K און אנדערע קאמפאנענטן. די סטארעדזש לייזונג איז צו דירעקט צעשפּאַלטן דעם ווירוס צו באפרייען די נוקלעאין זויער און עלימינירן די RNase. אויב עס ווערט נאר גענוצט פאר RT-PCR, איז עס מער פאסיג, אבער דער ליסאטע קען אינאקטיווירן דעם ווירוס. די סארט מוסטער קען נישט ווערן גענוצט פאר ווירוס קולטור צעשיידונג.

דער מעטאַל יאָן כעלאַטינג אַגענט געניצט אין דער ווירוס פּרעזערוויישאַן לייזונג איז רעקאַמענדיד צו נוצן EDTA זאַלץ (אַזאַ ווי דיפּאָטאַסיום עטילענדיאַמינטעטראַאַסעטיק זויער, דיסאָדיום עטילענדיאַמינטעטראַאַסעטיק זויער, אאז"ו ו), און עס איז נישט רעקאַמענדיד צו נוצן העפּאַרין (אַזאַ ווי סאָדיום העפּאַרין, ליטהיום העפּאַרין), כּדי נישט צו אַפעקטירן PCR דעטעקשאַן.
3. פּרעזערוואַציע רער: דער מאַטעריאַל פון דער פּרעזערוואַציע רער זאָל אויסגעקליבן ווערן קערפֿול. עס זענען דאָ דאַטן וואָס פֿאָרשלאָגן אַז פּאָליפּראָפּילען (פּאָליפּראָפּילען) איז פֿאַרבונדן מיט דער אַדסאָרפּציע פֿון נוקלעאיק זויער, ספּעציעל ביי הויכער שפּאַנונג יאָן קאָנצענטראַציע, פּאָליעטילען (פּאָליעטילען) איז מער בילכער ווי פּאָליפּראָפּילען (פּאָליפּראָפּילען). גרינג צו כאַפּן דנאַ/רנאַ. פּאָליעטילען-פּראָפּילען פּאָלימער (פּאָליאַלאָמער) פּלאַסטיק און עטלעכע ספּעציעל פּראַסעסט פּאָליפּראָפּילען (פּאָליפּראָפּילען) פּלאַסטיק קאַנטיינערז זענען מער פּאַסיק פֿאַר דנאַ/רנאַ סטאָרידזש. אין דערצו, ווען מען ניצט אַ צעברעכלעך שוואָם, זאָל מען פּרובירן צו קלייַבן אַ קאַנטיינער מיט אַ הייך גרעסער ווי 8 סענטימעטער פֿאַר דער סטאָרידזש רער צו פֿאַרהיטן אַז דער אינהאַלט זאָל נישט געשפּריצט און קאָנטאַמינירט ווערן ווען דער שוואָם איז צעבראָכן.

4. וואַסער פֿאַר פּראָדוקציע פּרעזערוויישאַן לייזונג: די אולטראַ-ריינע וואַסער געניצט פֿאַר פּראָדוקציע פּרעזערוויישאַן לייזונג זאָל זיין פֿילטרירט דורך אַן אולטראַפֿילטריישאַן מעמבראַנע מיט אַ מאָלעקולאַר וואָג פון 13,000 צו ענשור די באַזייַטיקונג פון פּאָלימער ימפּיוראַטיז פון ביאָלאָגישע קוואלן, אַזאַ ווי RNase, DNase, און ענדאָטאָקסין, און געוויינטלעכע רייניקונג איז נישט רעקאַמענדיד. וואַסער אָדער דיסטילירט וואַסער.

2. באַניץ פון ווירוס סאַמפּלינג רערן

סאַמפּלינג ניצן די ווירוס סאַמפּלינג רער איז דער הויפּט צעטיילט אין אָראָפאַרינגעאַל סאַמפּלינג און נאַסאָפאַרינדזשאַל סאַמפּלינג:

1. אָראָפאַרינגעאַל סאַמפּלינג: ערשט דריקן די צונג מיטן צונג דעפּרעסאָר, דערנאָך אויסשטרעקן דעם קאָפּ פֿון סאַמפּלינג שוואָם אין האַלדז צו ווישן די ביילאַטעראַלע פאַרינגעאַלע מאַנדלען און הינטערשטע פאַרינגעאַלע וואַנט, און ווישן די הינטערשטע פאַרינגעאַלע וואַנט מיט אַ לייכטער קראַפט, פֿאַרמייַדן צו אָנרירן די צונג אַפּאַראַט.

2. נאזאפארינגעאלע מוסטערונג: מעסט די דיסטאַנץ פון דער שפּיץ פון דער נאָז ביזן אויער לעפּ מיט אַ שטאָך און מאַרקירט מיט אַ פינגער, שטעקט אַרײַן דעם מוסטערונג שטאָך אין דער נאָז קאַוואַטי אין דער ריכטונג פון דער ווערטיקאַלער נאָז (פּנים), דער שטאָך זאָל זיך אויסשטרעקן לפּחות האַלב די לענג פון דער אויער לעפּ ביז דער שפּיץ פון דער נאָז, לאָזט דעם שטאָך אין דער נאָז פֿאַר 15-30 סעקונדעס, דרייט זיך פֿאָרזיכטיק 3-5 מאָל, און נעמט אַרויס דעם שטאָך.
עס איז נישט שווער צו זען פון דער מעטאָדע פון באַניץ, צי עס איז אַן אָראָפאַרינגעאַל סוואַב אָדער אַ נאַסאָפאַרינגעאַל סוואַב, סאַמפּלינג איז אַ טעכנישע אַרבעט, וואָס איז שווער און קאַנטאַמאַנייטאַד. די קוואַליטעט פון די געזאַמלטע מוסטער איז גלייך פֿאַרבונדן מיט די שפּעטערדיקע דעטעקציע. אויב די געזאַמלטע מוסטער האט אַ וויראַל לאָוד נידעריק, גרינג צו פאַרשאַפן פאַלש נעגאַטיוון, שווער צו באַשטעטיקן די דיאַגנאָז.