Virus namunalarini olish naychasi haqida bir nechta fikrlar

1. Virus namunalarini olish naychalarini ishlab chiqarish haqida
Virus namunalarini olish naychalari tibbiy asbob-uskunalar mahsulotlariga tegishli. Ko'pgina mahalliy ishlab chiqaruvchilar birinchi toifali mahsulotlar bo'yicha ro'yxatdan o'tgan va kam sonli kompaniyalar ikkinchi toifali mahsulotlar bo'yicha ro'yxatdan o'tgan. Yaqinda Uxan va boshqa joylarning favqulodda ehtiyojlarini qondirish uchun ko'plab kompaniyalar "favqulodda kanal"dan foydalanishdi. "Birinchi toifali yozuv ruxsatnomasini olish uchun ariza bering. Virus namunalarini olish naychasi namunalar uchun tampon, virusni saqlash eritmasi va tashqi qadoqdan iborat. Yagona milliy standart yoki sanoat standarti mavjud bo'lmaganligi sababli, turli ishlab chiqaruvchilarning mahsulotlari juda katta farq qiladi.

1. Namuna olish tampon: Namuna olish tampon namuna olish joyiga bevosita tegib turadi va namuna olish boshining materiali keyingi aniqlash bilan chambarchas bog'liq. Namuna olish tamponining boshi poliester (PE) sintetik tolasidan yoki Rayon (sun'iy tola) dan tayyorlanishi kerak. Kaltsiy alginat shimgichi yoki yog'och tayoqcha tamponlaridan (shu jumladan bambuk tayoqchalaridan) foydalanib bo'lmaydi va tampon boshining materiali paxta mahsulotlari bo'lishi mumkin emas. Paxta tolasi oqsilning kuchli adsorbsiyasiga ega bo'lgani uchun uni keyingi saqlash eritmasiga singdirish oson emas; va kaltsiy alginat va yog'och komponentlarini o'z ichiga olgan yog'och tayoqcha yoki bambuk tayoqcha singanida, saqlash eritmasida namlash oqsilni ham adsorbsiyalaydi va hatto keyingi PCR reaksiyasini ham inhibe qilishi mumkin. Tampon boshining materiali uchun PE tolasi, poliester tolasi va polipropilen tolasi kabi sintetik tolalardan foydalanish tavsiya etiladi. Paxta kabi tabiiy tolalar tavsiya etilmaydi. Neylon tolalari ham tavsiya etilmaydi, chunki neylon tolalar (tish cho'tkasi boshlariga o'xshash) suvni yutadi. Yomon, natijada namuna olish hajmi yetarli emas, bu aniqlash tezligiga ta'sir qiladi. Namuna olish tampon materiali uchun kaltsiy alginat shimgichi taqiqlanadi! Tampon tutqichi ikki xil: singan va o'rnatilgan. Singan tampon namunalar olingandan so'ng saqlash naychasiga joylashtiriladi va naycha qopqog'i namunalar boshiga yaqin joydan singanidan keyin sinadi; o'rnatilgan tampon namunalar olingandan so'ng namunalar tamponini to'g'ridan-to'g'ri saqlash naychasiga soladi va saqlash naychasi qopqog'i ichiga o'rnatiladi. Kichik teshikni tutqichning yuqori qismi bilan tekislang va naycha qopqog'ini mahkamlang. Ikkala usulni taqqoslaganda, ikkinchisi nisbatan xavfsizdir. Singan tampon kichikroq o'lchamdagi saqlash naychasi bilan birgalikda ishlatilganda, singanida naychada suyuqlik sachrashiga olib kelishi mumkin va mahsulotdan noto'g'ri foydalanish natijasida ifloslanish xavfiga to'liq e'tibor qaratish kerak. Tampon tutqichi materiali uchun ichi bo'sh polistirol (PS) ekstruziyalangan naycha yoki polipropilen (PP) in'ektsiya burma naychasidan foydalanish tavsiya etiladi. Qaysi materialdan foydalanilishidan qat'i nazar, kaltsiy alginat qo'shimchalarini qo'shib bo'lmaydi; yog'och tayoqchalar yoki bambuk tayoqchalar. Xulosa qilib aytganda, namunalar tampon namunalar miqdori va chiqarilish miqdorini ta'minlashi kerak va tanlangan materiallarda keyingi sinovlarga ta'sir qiladigan moddalar bo'lmasligi kerak.

2. Viruslarni saqlash yechimi: Bozorda keng qo'llaniladigan ikki xil viruslarni saqlash yechimlari mavjud, biri transport vositasiga asoslangan holda o'zgartirilgan viruslarni saqlash eritmasi, ikkinchisi esa nuklein kislota ekstraksiya lizati uchun o'zgartirilgan eritma.
Birinchisining asosiy komponenti Eagle asosiy kultura muhiti (MEM) yoki Hankning muvozanatli tuzi bo'lib, u virusning omon qolishi uchun zarur bo'lgan tuzlar, aminokislotalar, vitaminlar, glyukoza va oqsil bilan qo'shiladi. Ushbu saqlash eritmasida indikator va eritma sifatida fenol qizil natriy tuzi ishlatiladi. pH qiymati 6,6-8,0 bo'lganda, eritma pushti rangga ega bo'ladi. Kerakli glyukoza, L-glyutamin va oqsil konservatsiya eritmasiga qo'shiladi. Oqsil homila sigir zardobi yoki sigir zardobi albumin shaklida taqdim etiladi, bu virusning oqsil qobig'ini barqarorlashtirishi mumkin. Konservatsiya eritmasi ozuqaviy moddalarga boy bo'lgani uchun u virusning omon qolishiga yordam beradi, ammo bakteriyalarning ko'payishi uchun ham foydalidir. Agar konservatsiya eritmasi bakteriyalar bilan ifloslangan bo'lsa, u ko'p miqdorda ko'payadi. Uning metabolitlaridagi karbonat angidrid konservatsiya eritmasining pH qiymatining pushti rangdan pasayishiga olib keladi. Sariq rangga aylanadi. Shuning uchun, ko'pchilik ishlab chiqaruvchilar o'z formulalariga antibakterial ingredientlarni qo'shishgan. Tavsiya etilgan antibakterial vositalar penitsillin, streptomitsin, gentamitsin va polimiksin B. Natriy azid va 2-metil tavsiya etilmaydi. 4-metil-4-izotiazolin-3-on (MCI) va 5-xloro-2-metil-4-izotiazolin-3-on (CMCI) kabi ingibitorlar, chunki bu komponentlar PZR reaksiyasiga ta'sir qiladi. Ushbu konservatsiya eritmasi bilan taqdim etilgan namuna asosan tirik virus bo'lgani uchun namunaning o'ziga xosligini maksimal darajada saqlash mumkin va u nafaqat virus nuklein kislotalarini ajratib olish va aniqlash uchun, balki viruslarni yetishtirish va ajratish uchun ham ishlatilishi mumkin. Biroq, aniqlash uchun ishlatilganda, nuklein kislotasini ajratib olish va tozalash inaktivatsiyadan keyin amalga oshirilishi kerakligini ta'kidlash kerak.
Nuklein kislotasi ekstraktsiyasi lizatiga asoslangan yana bir turdagi konservatsiya eritmasi, asosiy tarkibiy qismlar muvozanatli tuzlar, EDTA xelatlovchi agenti, guanidin tuzi (guanidin izotiyosiyanat, guanidin gidroxlorid va boshqalar), anion sirt faol moddasi (dodekan natriy sulfati kabi), kation sirt faol moddalar (tetradetsiltrimetilamonyum oksalat kabi), fenol, 8-gidroksikinolin, ditiotreitol (DTT), proteinaza K va boshqa komponentlardir. Ushbu saqlash eritmasi virusni to'g'ridan-to'g'ri parchalash va nuklein kislotasini chiqarish va RNazni yo'q qilish uchun ishlatiladi. Agar faqat RT-PCR uchun ishlatilsa, u ko'proq mos keladi, ammo lizat virusni inaktivatsiya qilishi mumkin. Ushbu turdagi namunani virus madaniyatini ajratish uchun ishlatib bo'lmaydi.

Virusni saqlash eritmasida ishlatiladigan metall ionlarini xelatlovchi vosita sifatida EDTA tuzlaridan (masalan, dipotassium etilendiamintetraasetik kislota, disodiy etilendiamintetraasetik kislota va boshqalar) foydalanish tavsiya etiladi va PCRni aniqlashga ta'sir qilmaslik uchun geparindan (masalan, natriy geparin, lityum geparin) foydalanish tavsiya etilmaydi.
3. Saqlash naychasi: Saqlash naychasining materiali ehtiyotkorlik bilan tanlanishi kerak. Polipropilen (Polipropilen) nuklein kislotasining adsorbsiyasi bilan bog'liqligini ko'rsatadigan ma'lumotlar mavjud, ayniqsa yuqori kuchlanishli ion konsentratsiyasida, polietilen (Polietilen) polipropilenga (Polipropilen) qaraganda afzalroq. DNK/RNKni oson ushlang. Polietilen-propilen polimer (Poliallomer) plastmassa va ba'zi maxsus ishlov berilgan polipropilen (Polipropilen) plastik idishlar DNK/RNKni saqlash uchun ko'proq mos keladi. Bundan tashqari, sinadigan tampondan foydalanganda, saqlash naychasi tampon singanida tarkibning sachrashi va ifloslanishining oldini olish uchun balandligi 8 sm dan katta bo'lgan idishni tanlashga harakat qilishi kerak.

4. Ishlab chiqarishni saqlash eritmasi uchun suv: Ishlab chiqarishni saqlash eritmasi uchun ishlatiladigan ultra toza suv RNase, DNase va endotoksin kabi biologik manbalardan polimer aralashmalarini olib tashlashni ta'minlash uchun 13000 molekulyar og'irlikdagi ultrafiltratsiya membranasi orqali filtrlanishi kerak va oddiy tozalash tavsiya etilmaydi. Suv yoki distillangan suv.

2. Virus namunalarini olish naychalaridan foydalanish

Virus namunalarini olish naychasi yordamida namunalar olish asosan orofaringeal va nazofaringeal namunalarga bo'linadi:

1. Og'iz-halqum namunalarini olish: Avval tilni depressor bilan bosing, so'ngra namunalar olish tamponining boshini tomoqqa cho'zib, ikki tomonlama faringeal bodomsimon bezlar va orqa faringeal devorni arting va orqa faringeal devorni yengil kuch bilan arting, til bo'linmasiga tegmaslikka harakat qiling.

2. Nazofarenks namunalarini olish: burun uchidan quloq qobig'igacha bo'lgan masofani tampon bilan o'lchang va barmoq bilan belgilang, namunaviy tamponni burun bo'shlig'iga vertikal burun (yuz) yo'nalishi bo'yicha kiriting, tampon quloq qobig'ining uzunligining kamida yarmini burun uchigacha cho'zishi kerak, tamponni burunda 15-30 soniya qoldiring, 3-5 marta sekin aylantiring va tamponni olib tashlang.
Qo'llash usulidan, bu orofaringeal tamponmi yoki nazofaringeal tamponmi, namuna olish texnik vazifa bo'lib, u qiyin va ifloslangan. To'plangan namunaning sifati keyingi aniqlash bilan bevosita bog'liq. Agar to'plangan namunada virus yuki past bo'lsa, noto'g'ri salbiy natijalarga olib kelishi oson, tashxisni tasdiqlash qiyin.