1. Дар бораи истеҳсоли найчаҳои намунагирии вирус
Найчаҳои намунагирии вирус ба маҳсулоти дастгоҳҳои тиббӣ тааллуқ доранд. Аксари истеҳсолкунандагони ватанӣ мувофиқи маҳсулоти дараҷаи аввал ба қайд гирифта шудаанд ва ширкатҳои кам мувофиқи маҳсулоти дараҷаи дуюм ба қайд гирифта шудаанд. Ба наздикӣ, барои қонеъ кардани ниёзҳои фаврии Вуҳан ва дигар ҷойҳо, бисёр ширкатҳо "канали фаврӣ"-ро гирифтанд "Барои иҷозатномаи сабти дараҷаи аввал муроҷиат кунед. Найчаи намунагирии вирус аз тампончаи намунагирӣ, маҳлули нигоҳдории вирус ва бастабандии беруна иборат аст. Азбаски стандарти ягонаи миллӣ ё стандарти саноатӣ вуҷуд надорад, маҳсулоти истеҳсолкунандагони гуногун хеле фарқ мекунанд.
1. Сабукҳои намунагирӣ: Сабукҳои намунагирӣ мустақиман бо макони намунагирӣ тамос мегиранд ва маводи сари намунагирӣ бо ошкоркунии минбаъда алоқамандии зич дорад. Сари сабукҳои намунагирӣ бояд аз нахи синтетикии полиэстер (PE) ё Rayon (нахи сунъӣ) сохта шавад. Исфанҷакҳои алгинати калсий ё сабукҳои чӯбии чӯбӣ (аз ҷумла чӯбҳои бамбук)-ро истифода бурдан мумкин нест ва маводи сари сабукҳо наметавонанд маҳсулоти пахтагӣ бошанд. Азбаски нахи пахта дорои адсорбсияи қавии сафеда аст, ба маҳлули нигоҳдории минбаъда ворид шудан осон нест; ва вақте ки чӯби чӯбӣ ё чӯби бамбук, ки дорои алгинати калсий ва ҷузъҳои чӯбӣ мебошад, шикаста мешавад, тар кардан дар маҳлули нигоҳдорӣ низ сафедаро адсорбсия мекунад ва ҳатто метавонад аксуламали минбаъдаи PCR-ро боздорад. Тавсия дода мешавад, ки барои маводи сари сабукҳо нахҳои синтетикӣ, ба монанди нахи PE, нахи полиэстер ва нахи полипропилен истифода шаванд. Истифодаи нахҳои табиӣ ба монанди пахта тавсия дода намешавад. Истифодаи нахҳои нейлон низ тавсия дода намешавад, зеро нахҳои нейлон (монанд ба сарҳои хасуи дандон) обро ҷаббида мегиранд. Камбудӣ, ки боиси нокифоя будани ҳаҷми намунагирӣ мегардад ва ба суръати ошкоркунӣ таъсир мерасонад. Истифодаи исфанҷакҳои алгинати калсий барои маводи сабукҳои намунагирӣ манъ аст! Дастаки сабук ду намуд дорад: шикаста ва дарунсохт. Пас аз гирифтани намуна, тампон шикаста ба найчаи нигоҳдорӣ гузошта мешавад ва сарпӯши найча пас аз шикастан аз мавқеи наздик ба сари намунагирӣ шикаста мешавад; тампончаи дарунсохт пас аз гирифтани намуна, тампончаи намунагириро мустақиман ба найчаи нигоҳдорӣ мегузорад ва сарпӯши найчаи нигоҳдорӣ дар дохили он сохта шудааст. Сӯрохи хурдро бо болои даста ҳамвор кунед ва сарпӯши найчаро маҳкам кунед. Дар муқоиса бо ин ду усул, усули дуюм нисбатан бехатар аст. Вақте ки тампончаи шикаста якҷоя бо найчаи нигоҳдории андозаи хурдтар истифода мешавад, он метавонад боиси пошидани моеъ дар найча гардад ва бояд ба хатари ифлосшавӣ, ки дар натиҷаи истифодаи нодурусти маҳсулот ба вуҷуд омадааст, диққати пурра дода шавад. Тавсия дода мешавад, ки барои маводи дастаки тампон найчаи холӣ аз полистирол (PS) ё найчаи тазриқи полипропилен (PP) истифода шавад. Новобаста аз он ки кадом мавод истифода мешавад, иловаҳои алгинати калсий илова карда намешаванд; чӯбҳои чӯбӣ ё чӯбҳои бамбук. Хулоса, тампончаи намунагирӣ бояд миқдори намунагирӣ ва миқдори раҳошавиро таъмин кунад ва маводҳои интихобшуда набояд моддаҳое дошта бошанд, ки ба санҷиши минбаъда таъсир расонанд.
2. Маҳлули нигоҳдории вирус: Ду намуди маҳлули нигоҳдории вирусҳо мавҷуданд, ки дар бозор ба таври васеъ истифода мешаванд, яке маҳлули нигоҳдории вирус аст, ки дар асоси муҳити интиқол тағйир дода шудааст ва дигаре маҳлули тағйирёфта барои лизати истихроҷи кислотаи нуклеинӣ мебошад.
Ҷузъи асосии аввалӣ муҳити асосии парвариши Игл (MEM) ё намаки мутавозини Ханк мебошад, ки бо намакҳо, аминокислотаҳо, витаминҳо, глюкоза ва сафедаҳои зарурӣ барои зинда мондани вирус илова карда мешавад. Ин маҳлули нигоҳдорӣ намаки натрийи фенолсурхро ҳамчун нишондиҳанда ва маҳлул истифода мебарад. Вақте ки арзиши рН 6.6-8.0 аст, маҳлул гулобӣ мешавад. Глюкозаи зарурӣ, L-глутамин ва сафеда ба маҳлули нигоҳдорӣ илова карда мешаванд. Сафеда дар шакли зардоби гови ҷанинӣ ё албумини зардоби гов таъмин карда мешавад, ки метавонад пӯсти сафедаи вирусро устувор кунад. Азбаски маҳлули нигоҳдорӣ аз моддаҳои ғизоӣ бой аст, он барои зинда мондани вирус мусоидат мекунад, аммо инчунин барои афзоиши бактерияҳо муфид аст. Агар маҳлули нигоҳдорӣ бо бактерияҳо олуда бошад, он ба миқдори зиёд афзоиш меёбад. Гази карбон дар метаболитҳои он боиси паст шудани рН маҳлули нигоҳдорӣ аз гулобӣ мегардад. Зард мешавад. Аз ин рӯ, аксари истеҳсолкунандагон ба формулаҳои худ компонентҳои зиддибактериявӣ илова кардаанд. Агентҳои зиддибактериявии тавсияшуда пенитсиллин, стрептомицин, гентамицин ва полимиксин В мебошанд. Азиди натрий ва 2-метил тавсия дода намешаванд. Ингибиторҳо ба монанди 4-метил-4-изотиазолин-3-он (MCI) ва 5-хлор-2-метил-4-изотиазолин-3-он (CMCI), зеро ин ҷузъҳо ба аксуламали PCR таъсир мерасонанд. Азбаски намунае, ки ин маҳлули нигоҳдорӣ пешниҳод мекунад, асосан вируси зинда аст, аслияти намунаро то ҳадди имкон нигоҳ доштан мумкин аст ва онро на танҳо барои истихроҷ ва ошкор кардани кислотаҳои нуклеинии вирус, балки инчунин барои парвариш ва ҷудо кардани вирусҳо низ истифода бурдан мумкин аст. Аммо, бояд қайд кард, ки ҳангоми истифода барои ошкоркунӣ, истихроҷ ва тозакунии кислотаи нуклеин бояд пас аз ғайрифаъолкунӣ анҷом дода шавад.
Навъи дигари маҳлули нигоҳдорӣ, ки дар асоси лизати истихроҷи кислотаи нуклеинӣ омода карда мешавад, ҷузъҳои асосӣ намакҳои мутавозин, агенти хелатии EDTA, намаки гуанидин (ба монанди изотиоцианати гуанидин, гидрохлориди гуанидин ва ғайра), сурфактанти анионӣ (ба монанди додекан натрий сулфат), сурфактантҳои катионӣ (ба монанди тетрадецилтриметиламмоний оксалат), фенол, 8-гидроксихинолин, дитиотреитол (DTT), протеиназа К ва дигар ҷузъҳо мебошанд. Ин маҳлули нигоҳдорӣ барои ҷудо кардани мустақими вирус барои раҳо кардани кислотаи нуклеин ва нест кардани RNase мебошад. Агар танҳо барои RT-PCR истифода шавад, он мувофиқтар аст, аммо лизат метавонад вирусро ғайрифаъол кунад. Ин намуди намунаро барои ҷудо кардани фарҳанги вирус истифода бурдан мумкин нест.
Агенти хелаткунандаи ионҳои металлӣ, ки дар маҳлули нигоҳдории вирус истифода мешавад, тавсия дода мешавад, ки намакҳои EDTA (ба монанди кислотаи дипотассий этилендиаминтетраасетикӣ, кислотаи динатрий этилендиаминтетраасетикӣ ва ғайра)-ро истифода баранд ва истифодаи гепарин (ба монанди гепарини натрий, гепарини литий) тавсия дода намешавад, то ба муайянкунии PCR таъсир нарасонад.
3. Найчаи нигоҳдорӣ: Маводи найчаи нигоҳдорӣ бояд бодиққат интихоб карда шавад. Маълумоте мавҷуданд, ки нишон медиҳанд, ки полипропилен (полипропилен) бо адсорбсияи кислотаи нуклеинӣ, махсусан дар консентратсияи ионҳои шиддати баланд алоқаманд аст, полиэтилен (полиэтилен) нисбат ба полипропилен (полипропилен) афзалтар аст. ДНК/РНК-ро ба осонӣ дарк кардан мумкин аст. Пластикҳои полиэтилен-пропилен (полиалломер) ва баъзе зарфҳои пластикии полипропилен (полипропилен)-и махсус коркардшуда барои нигоҳдории ДНК/РНК мувофиқтаранд. Илова бар ин, ҳангоми истифодаи тампончаи шикаста, найчаи нигоҳдорӣ бояд кӯшиш кунад, ки зарферо бо баландии аз 8 см зиёдтар интихоб кунад, то аз пошидан ва олуда шудани мундариҷа ҳангоми шикастани тампон пешгирӣ карда шавад.
4. Об барои маҳлули нигоҳдории истеҳсолот: Оби ултрасаф, ки барои маҳлули нигоҳдории истеҳсолот истифода мешавад, бояд тавассути мембранаи ултрасафӣ бо вазни молекулавии 13000 филтр карда шавад, то ки ифлосҳои полимерӣ аз манбаъҳои биологӣ, ба монанди RNase, DNase ва эндотоксин тоза карда шаванд ва тозакунии муқаррарӣ тавсия дода намешавад. Об ё оби дистилятсияшуда.
2. Истифодаи найчаҳои намунагирии вирус
Намунагирӣ бо истифода аз найчаи намунагирии вирус асосан ба намунагирии орофарингеалӣ ва намунагирии назофарингеалӣ тақсим мешавад:
1. Гирифтани намуна аз даҳон ва гулӯ: Аввал забонро бо депрессори забон пахш кунед, сипас сари тампонро ба гулӯ дароз кунед, то бодомакҳои дутарафаи ҳалқ ва девори қафои ҳалқро пок кунед ва девори қафои ҳалқро бо қувваи сабук пок кунед, аз даст нарасондан ба воҳиди забон худдорӣ кунед.
2. Гирифтани намуна аз бинӣ ва ҳалқ: масофаро аз нӯги бинӣ то гӯш бо тампон чен кунед ва бо ангушт нишона гузоред, тампонро ба ковокии бинӣ дар самти бинии амудӣ (рӯй) ворид кунед, тампон бояд ҳадди аққал нисфи дарозии гӯш то нӯги бинӣ дароз шавад, тампонро дар бинӣ барои 15-30 сония гузоред, 3-5 маротиба оҳиста гардонед ва тампонро гиред.
Аз усули истифода фаҳмидани он душвор нест, ки оё он тампон аз орофарингеалӣ аст ё тампон аз бинӣ-ҳалқӣ, намунагирӣ як вазифаи техникӣ аст, ки душвор ва олуда аст. Сифати намунаи ҷамъовардашуда мустақиман бо ошкоркунии минбаъда алоқаманд аст. Агар намунаи ҷамъовардашуда сарбории вирусӣ дошта бошад, он ба осонӣ ба вуҷуд меояд, ки натиҷаи манфии бардурӯғро ба вуҷуд меорад ва тасдиқи ташхис душвор аст.
Вақти нашр: 21 июни соли 2020
