வைரஸ் மாதிரி குழாய் பற்றிய பல கருத்துக்கள்

1. வைரஸ் மாதிரி குழாய்களின் உற்பத்தி பற்றி
வைரஸ் மாதிரி குழாய்கள் மருத்துவ சாதன தயாரிப்புகளைச் சேர்ந்தவை. பெரும்பாலான உள்நாட்டு உற்பத்தியாளர்கள் முதல் தர தயாரிப்புகளின்படி பதிவு செய்யப்பட்டுள்ளனர், மேலும் சில நிறுவனங்கள் இரண்டாம் தர தயாரிப்புகளின்படி பதிவு செய்யப்பட்டுள்ளன. சமீபத்தில், வுஹான் மற்றும் பிற இடங்களின் அவசரத் தேவைகளைப் பூர்த்தி செய்வதற்காக, பல நிறுவனங்கள் "அவசர சேனலை" எடுத்துள்ளன. "முதல் தர பதிவு அனுமதிக்கு விண்ணப்பிக்கவும். வைரஸ் மாதிரி குழாய் ஒரு மாதிரி ஸ்வாப், வைரஸ் பாதுகாப்பு தீர்வு மற்றும் வெளிப்புற பேக்கேஜிங் ஆகியவற்றைக் கொண்டுள்ளது. ஒருங்கிணைந்த தேசிய தரநிலை அல்லது தொழில்துறை தரநிலை இல்லாததால், பல்வேறு உற்பத்தியாளர்களின் தயாரிப்புகள் பெரிதும் வேறுபடுகின்றன.

1. மாதிரி ஸ்வாப்: மாதிரி ஸ்வாப் நேரடியாக மாதிரி தளத்தைத் தொடர்பு கொள்கிறது, மேலும் மாதிரி தலையின் பொருள் அடுத்தடுத்த கண்டறிதலுடன் நெருக்கமாக தொடர்புடையது. மாதிரி ஸ்வாப் தலை பாலியஸ்டர் (PE) செயற்கை இழை அல்லது ரேயான் (மனிதனால் உருவாக்கப்பட்ட இழை) ஆகியவற்றால் செய்யப்பட வேண்டும். கால்சியம் ஆல்ஜினேட் கடற்பாசி அல்லது மர குச்சி ஸ்வாப்களை (மூங்கில் குச்சிகள் உட்பட) பயன்படுத்த முடியாது, மேலும் ஸ்வாப் தலையின் பொருள் பருத்தி பொருட்களாக இருக்க முடியாது. பருத்தி இழை புரதத்தின் வலுவான உறிஞ்சுதலைக் கொண்டிருப்பதால், அதை அடுத்தடுத்த சேமிப்புக் கரைசலில் கரைப்பது எளிதல்ல; மேலும் கால்சியம் ஆல்ஜினேட் மற்றும் மரக் கூறுகளைக் கொண்ட ஒரு மரக் குச்சி அல்லது மூங்கில் குச்சி உடைந்தால், சேமிப்புக் கரைசலில் ஊறவைப்பது புரதத்தையும் உறிஞ்சும், மேலும் அது அடுத்தடுத்த PCR எதிர்வினையைத் தடுக்கலாம். ஸ்வாப் தலையின் பொருளுக்கு PE ஃபைபர், பாலியஸ்டர் ஃபைபர் மற்றும் பாலிப்ரொப்பிலீன் ஃபைபர் போன்ற செயற்கை இழைகளைப் பயன்படுத்த பரிந்துரைக்கப்படுகிறது. பருத்தி போன்ற இயற்கை இழைகள் பரிந்துரைக்கப்படவில்லை. நைலான் இழைகள் (பல் துலக்கும் தலைகளைப் போன்றவை) தண்ணீரை உறிஞ்சுவதால் நைலான் இழைகளும் பரிந்துரைக்கப்படவில்லை. மோசமானது, போதுமான மாதிரி அளவு இல்லாததால், கண்டறிதல் விகிதத்தை பாதிக்கிறது. ஸ்வாப் பொருளை மாதிரி செய்வதற்கு கால்சியம் ஆல்ஜினேட் கடற்பாசி தடைசெய்யப்பட்டுள்ளது! ஸ்வாப் கைப்பிடி இரண்டு வகைகளைக் கொண்டுள்ளது: உடைந்த மற்றும் உள்ளமைக்கப்பட்ட. மாதிரி எடுத்த பிறகு உடைந்த ஸ்வாப் சேமிப்புக் குழாயில் வைக்கப்படுகிறது, மேலும் மாதிரி எடுத்த தலைக்கு அருகிலுள்ள நிலையில் இருந்து உடைந்த பிறகு குழாய் மூடி உடைக்கப்படுகிறது; உள்ளமைக்கப்பட்ட ஸ்வாப் மாதிரி எடுத்த பிறகு நேரடியாக சேமிப்புக் குழாயில் மாதிரி ஸ்வாப்பை வைக்கிறது, மேலும் சேமிப்புக் குழாய் குழாய் மூடி கட்டப்பட்டுள்ளது. சிறிய துளையை கைப்பிடியின் மேற்புறத்துடன் சீரமைத்து குழாய் மூடியை இறுக்குகிறது. இரண்டு முறைகளையும் ஒப்பிடுகையில், பிந்தையது ஒப்பீட்டளவில் பாதுகாப்பானது. உடைந்த ஸ்வாப்பை ஒரு சிறிய அளவிலான சேமிப்புக் குழாயுடன் இணைந்து பயன்படுத்தும்போது, அது உடைந்தால் குழாயில் திரவம் தெறிக்கக்கூடும், மேலும் தயாரிப்பின் முறையற்ற பயன்பாட்டினால் ஏற்படும் மாசுபாட்டின் அபாயத்திற்கு முழு கவனம் செலுத்தப்பட வேண்டும். ஸ்வாப் கைப்பிடியின் பொருளுக்கு வெற்று பாலிஸ்டிரீன் (PS) வெளியேற்றப்பட்ட குழாய் அல்லது பாலிப்ரொப்பிலீன் (PP) ஊசி மடிப்பு குழாயைப் பயன்படுத்த பரிந்துரைக்கப்படுகிறது. எந்தப் பொருள் பயன்படுத்தப்பட்டாலும், கால்சியம் ஆல்ஜினேட் சேர்க்கைகளைச் சேர்க்க முடியாது; மரக் குச்சிகள் அல்லது மூங்கில் குச்சிகள். சுருக்கமாக, மாதிரி ஸ்வாப் மாதிரியின் அளவு மற்றும் வெளியீட்டின் அளவை உறுதி செய்ய வேண்டும், மேலும் தேர்ந்தெடுக்கப்பட்ட பொருட்களில் அடுத்தடுத்த சோதனையை பாதிக்கும் பொருட்கள் இருக்கக்கூடாது.

2. வைரஸ் பாதுகாப்பு தீர்வு: சந்தையில் இரண்டு வகையான வைரஸ் பாதுகாப்பு தீர்வுகள் பரவலாகப் பயன்படுத்தப்படுகின்றன, ஒன்று போக்குவரத்து ஊடகத்தின் அடிப்படையில் மாற்றியமைக்கப்பட்ட வைரஸ் பராமரிப்பு தீர்வு, மற்றொன்று நியூக்ளிக் அமிலம் பிரித்தெடுக்கும் லைசேட்டுக்கான மாற்றியமைக்கப்பட்ட தீர்வு.
முந்தையவற்றின் முக்கிய கூறு ஈகிள்ஸ் அடிப்படை கலாச்சார ஊடகம் (MEM) அல்லது ஹாங்கின் சமச்சீர் உப்பு ஆகும், இது வைரஸ் உயிர்வாழ்வதற்குத் தேவையான உப்புகள், அமினோ அமிலங்கள், வைட்டமின்கள், குளுக்கோஸ் மற்றும் புரதத்துடன் சேர்க்கப்படுகிறது. இந்த சேமிப்புக் கரைசல் பீனால் சிவப்பு சோடியம் உப்பை ஒரு குறிகாட்டியாகவும் தீர்வாகவும் பயன்படுத்துகிறது. pH மதிப்பு 6.6-8.0 ஆக இருக்கும்போது, கரைசல் இளஞ்சிவப்பு நிறத்தில் இருக்கும். தேவையான குளுக்கோஸ், எல்-குளுட்டமைன் மற்றும் புரதம் பாதுகாப்புக் கரைசலில் சேர்க்கப்படுகின்றன. புரதம் கரு போவின் சீரம் அல்லது போவின் சீரம் அல்புமின் வடிவத்தில் வழங்கப்படுகிறது, இது வைரஸின் புரத ஓட்டை உறுதிப்படுத்த முடியும். பாதுகாப்புக் கரைசலில் ஊட்டச்சத்துக்கள் நிறைந்திருப்பதால், அது வைரஸின் உயிர்வாழ்வுக்கு உகந்தது, ஆனால் பாக்டீரியாவின் வளர்ச்சிக்கும் நன்மை பயக்கும். பாதுகாப்புக் கரைசல் பாக்டீரியாவால் மாசுபட்டிருந்தால், அது அதிக அளவில் பெருகும். அதன் வளர்சிதை மாற்றங்களில் உள்ள கார்பன் டை ஆக்சைடு, பாதுகாப்புக் கரைசலின் pH இளஞ்சிவப்பு நிறத்தில் இருந்து குறையச் செய்யும். மஞ்சள் நிறமாக மாறும். எனவே, பெரும்பாலான உற்பத்தியாளர்கள் தங்கள் சூத்திரங்களில் பாக்டீரியா எதிர்ப்புப் பொருட்களைச் சேர்த்துள்ளனர். பரிந்துரைக்கப்பட்ட பாக்டீரியா எதிர்ப்பு முகவர்கள் பென்சிலின், ஸ்ட்ரெப்டோமைசின், ஜென்டாமைசின் மற்றும் பாலிமைக்சின் பி. சோடியம் அசைடு மற்றும் 2-மெத்தில் பரிந்துரைக்கப்படவில்லை 4-மெத்தில்-4-ஐசோதியாசோலின்-3-ஒன் (MCI) மற்றும் 5-குளோரோ-2-மெத்தில்-4-ஐசோதியாசோலின்-3-ஒன் (CMCI) போன்ற தடுப்பான்கள் PCR எதிர்வினையில் விளைவைக் கொண்டிருப்பதால். இந்தப் பாதுகாப்புக் கரைசலால் வழங்கப்படும் மாதிரி அடிப்படையில் ஒரு உயிருள்ள வைரஸ் என்பதால், மாதிரியின் அசல் தன்மையை அதிகபட்ச அளவிற்கு வைத்திருக்க முடியும், மேலும் இது வைரஸ் நியூக்ளிக் அமிலங்களைப் பிரித்தெடுப்பதற்கும் கண்டறிவதற்கும் மட்டுமல்லாமல், வைரஸ்களை வளர்ப்பதற்கும் தனிமைப்படுத்துவதற்கும் பயன்படுத்தப்படலாம். இருப்பினும், கண்டறிதலுக்குப் பயன்படுத்தப்படும்போது, நியூக்ளிக் அமிலத்தைப் பிரித்தெடுப்பதும் சுத்திகரிப்பும் செயலிழக்கச் செய்யப்பட்ட பிறகு செய்யப்பட வேண்டும் என்பதை கவனத்தில் கொள்ள வேண்டும்.
நியூக்ளிக் அமிலம் பிரித்தெடுக்கும் லைசேட்டை அடிப்படையாகக் கொண்டு தயாரிக்கப்பட்ட மற்றொரு வகையான பாதுகாப்பு கரைசல், முக்கிய கூறுகள் சமச்சீர் உப்புகள், EDTA செலேட்டிங் முகவர், குவானிடின் உப்பு (குவானிடின் ஐசோதியோசயனேட், குவானிடின் ஹைட்ரோகுளோரைடு போன்றவை), அனானிக் சர்பாக்டான்ட் (டோடெக்கேன் சோடியம் சல்பேட் போன்றவை), கேஷனிக் சர்பாக்டான்ட்கள் (டெட்ராடெசில்ட்ரைமெதிலாமோனியம் ஆக்சலேட் போன்றவை), பீனால், 8-ஹைட்ராக்ஸிகுயினோலின், டைதியோத்ரைட்டால் (DTT), புரோட்டினேஸ் K மற்றும் பிற கூறுகள். இந்த சேமிப்பு தீர்வு, நியூக்ளிக் அமிலத்தை வெளியிடுவதற்கும் RNase ஐ அகற்றுவதற்கும் வைரஸை நேரடியாகப் பிரிப்பதாகும். RT-PCR க்கு மட்டுமே பயன்படுத்தினால், அது மிகவும் பொருத்தமானது, ஆனால் லைசேட் வைரஸை செயலிழக்கச் செய்யலாம். இந்த வகையான மாதிரியை வைரஸ் வளர்ப்பு பிரிப்புக்கு பயன்படுத்த முடியாது.

வைரஸ் பாதுகாப்பு கரைசலில் பயன்படுத்தப்படும் உலோக அயனி செலேட்டிங் முகவர் EDTA உப்புகளைப் பயன்படுத்த பரிந்துரைக்கப்படுகிறது (டைபொட்டாசியம் எத்திலீன் டைஅமினெட்ராஅசெடிக் அமிலம், டைசோடியம் எத்திலீன் டைஅமினெட்ராஅசெடிக் அமிலம் போன்றவை), மேலும் PCR கண்டறிதலைப் பாதிக்காத வகையில் ஹெப்பரின் (சோடியம் ஹெப்பரின், லித்தியம் ஹெப்பரின் போன்றவை) பயன்படுத்த பரிந்துரைக்கப்படவில்லை.
3. பாதுகாப்பு குழாய்: பாதுகாப்பு குழாயின் பொருளை கவனமாக தேர்ந்தெடுக்க வேண்டும். பாலிப்ரொப்பிலீன் (பாலிபுரோப்பிலீன்) நியூக்ளிக் அமிலத்தின் உறிஞ்சுதலுடன் தொடர்புடையது என்று பரிந்துரைக்கும் தரவுகள் உள்ளன, குறிப்பாக அதிக அழுத்த அயனி செறிவில், பாலிப்ரொப்பிலீன் (பாலிபுரோப்பிலீன்) ஐ விட பாலிஎதிலீன் (பாலிஎதிலீன்) அதிகம் விரும்பப்படுகிறது. டிஎன்ஏ/ஆர்என்ஏவை எளிதில் கிரகிக்க முடியும். பாலிஎதிலீன்-புரோப்பிலீன் பாலிமர் (பாலிஅலோமர்) பிளாஸ்டிக் மற்றும் சில சிறப்பாக பதப்படுத்தப்பட்ட பாலிப்ரொப்பிலீன் (பாலிபுரோப்பிலீன்) பிளாஸ்டிக் கொள்கலன்கள் டிஎன்ஏ/ஆர்என்ஏ சேமிப்பிற்கு மிகவும் பொருத்தமானவை. கூடுதலாக, உடையக்கூடிய ஸ்வாப்பைப் பயன்படுத்தும் போது, ஸ்வாப் உடைக்கப்படும்போது உள்ளடக்கங்கள் தெறிக்கப்பட்டு மாசுபடுவதைத் தடுக்க சேமிப்புக் குழாய் 8 செ.மீ க்கும் அதிகமான உயரம் கொண்ட கொள்கலனைத் தேர்ந்தெடுக்க முயற்சிக்க வேண்டும்.

4. உற்பத்தி பாதுகாப்பு கரைசலுக்கான நீர்: உற்பத்தி பாதுகாப்பு கரைசலுக்காகப் பயன்படுத்தப்படும் அல்ட்ராப்யூர் தண்ணீரை 13,000 மூலக்கூறு எடை கொண்ட அல்ட்ராஃபில்ட்ரேஷன் சவ்வு மூலம் வடிகட்ட வேண்டும், இது உயிரியல் மூலங்களான RNase, DNase மற்றும் எண்டோடாக்சின்களிலிருந்து பாலிமர் அசுத்தங்களை அகற்றுவதை உறுதிசெய்யும், மேலும் சாதாரண சுத்திகரிப்பு பரிந்துரைக்கப்படவில்லை. நீர் அல்லது காய்ச்சி வடிகட்டிய நீர்.

2. வைரஸ் மாதிரி குழாய்களின் பயன்பாடு

வைரஸ் மாதிரி குழாயைப் பயன்படுத்தி மாதிரி எடுப்பது முக்கியமாக ஓரோபார்னீஜியல் மாதிரி எடுத்தல் மற்றும் நாசோபார்னீஜியல் மாதிரி எடுத்தல் என பிரிக்கப்பட்டுள்ளது:

1. ஓரோபார்னீஜியல் மாதிரி எடுத்தல்: முதலில் நாக்கு அழுத்தி நாக்கை அழுத்தி, பின்னர் மாதிரி ஸ்வாப்பின் தலையை தொண்டைக்குள் நீட்டி இருதரப்பு தொண்டை டான்சில்ஸ் மற்றும் பின்புற தொண்டைச் சுவரைத் துடைக்கவும், மேலும் பின்புற தொண்டைச் சுவரை லேசான சக்தியுடன் துடைக்கவும், நாக்கு அலகைத் தொடுவதைத் தவிர்க்கவும்.

2. நாசோபார்னீஜியல் மாதிரி: மூக்கின் நுனியிலிருந்து காது மடலுக்கான தூரத்தை ஒரு ஸ்வாப் மூலம் அளந்து விரலால் குறிக்கவும், மாதிரி ஸ்வாப்பை நாசி குழிக்குள் செங்குத்து மூக்கின் (முகம்) திசையில் செருகவும், ஸ்வாப் காது மடலின் நீளத்தின் பாதியையாவது மூக்கின் நுனி வரை நீட்டிக்க வேண்டும், ஸ்வாப்பை 15-30 வினாடிகள் மூக்கில் விட்டு, மெதுவாக 3-5 முறை சுழற்றி, ஸ்வாப்பை வெளியே எடுக்கவும்.
பயன்பாட்டு முறையிலிருந்து பார்ப்பது கடினம் அல்ல, அது ஒரு ஓரோபார்னீஜியல் ஸ்வாப் அல்லது நாசோபார்னீஜியல் ஸ்வாப் என்பதை, மாதிரி எடுப்பது ஒரு தொழில்நுட்ப பணியாகும், இது கடினமானது மற்றும் மாசுபட்டது. சேகரிக்கப்பட்ட மாதிரியின் தரம் அடுத்தடுத்த கண்டறிதலுடன் நேரடியாக தொடர்புடையது. சேகரிக்கப்பட்ட மாதிரியில் வைரஸ் சுமை இருந்தால் குறைந்த, தவறான எதிர்மறைகளை ஏற்படுத்த எளிதானது, நோயறிதலை உறுதிப்படுத்துவது கடினம்.