1. Kuhusu utengenezaji wa mirija ya sampuli za virusi
Mirija ya sampuli za virusi ni ya bidhaa za vifaa vya matibabu. Watengenezaji wengi wa ndani wamesajiliwa kulingana na bidhaa za daraja la kwanza, na kampuni chache zimesajiliwa kulingana na bidhaa za daraja la pili. Hivi majuzi, ili kukidhi mahitaji ya dharura ya Wuhan na maeneo mengine, kampuni nyingi zimechukua "njia ya dharura" "Omba ruhusa ya rekodi ya daraja la kwanza. Mrija wa sampuli za virusi unaundwa na swab ya sampuli, suluhisho la kuhifadhi virusi na kifungashio cha nje. Kwa kuwa hakuna kiwango cha kitaifa au kiwango cha tasnia, bidhaa za wazalishaji mbalimbali hutofautiana sana.
1. Usufi wa sampuli: Usufi wa sampuli hugusa moja kwa moja eneo la sampuli, na nyenzo za kichwa cha sampuli zinahusiana kwa karibu na ugunduzi unaofuata. Kichwa cha usufi wa sampuli kinapaswa kutengenezwa kwa nyuzi za sintetiki za Polyester (PE) au Rayon (nyuzi zilizotengenezwa na mwanadamu). Sifongo za alginate za kalsiamu au vijiti vya mbao (ikiwa ni pamoja na vijiti vya mianzi) haziwezi kutumika, na nyenzo za kichwa cha usufi haziwezi kuwa bidhaa za pamba. Kwa sababu nyuzi za pamba zina ufyonzaji mkubwa wa protini, si rahisi kuingia kwenye suluhisho linalofuata la kuhifadhi; na wakati kijiti cha mbao au kijiti cha mianzi chenye alginate ya kalsiamu na vipengele vya mbao vimevunjwa, kuloweka kwenye suluhisho la kuhifadhi pia kutafyonza protini, na hata kutafanya hivyo. Inaweza kuzuia mmenyuko unaofuata wa PCR. Inashauriwa kutumia nyuzi za sintetiki kama vile nyuzi za PE, nyuzi za polyester na nyuzi za polypropen kwa nyenzo za kichwa cha usufi. Nyuzi asilia kama vile pamba hazipendekezwi. Nyuzi za nailoni pia hazipendekezwi kwa sababu nyuzi za nailoni (sawa na vichwa vya mswaki) hunyonya maji. Duni, na kusababisha ujazo wa kutosha wa sampuli, na kuathiri kiwango cha kugundua. Sifongo ya alginate ya kalsiamu ni marufuku kwa nyenzo za usufi wa sampuli! Kipini cha usufi kina aina mbili: kilichovunjika na kilichojengewa ndani. Usufi uliovunjika huwekwa kwenye bomba la kuhifadhia baada ya sampuli, na kifuniko cha mirija huvunjika baada ya kuvunjika kutoka mahali karibu na kichwa cha sampuli; usufi uliojengewa ndani huweka moja kwa moja usufi wa sampuli kwenye bomba la kuhifadhia baada ya sampuli, na kifuniko cha mirija ya kuhifadhia hujengwa ndani. Panga shimo dogo na sehemu ya juu ya mpini na kaza kifuniko cha mirija. Ukilinganisha njia hizo mbili, njia ya mwisho ni salama kiasi. Usufi uliovunjika unapotumika pamoja na mirija ya kuhifadhia yenye ukubwa mdogo, inaweza kusababisha kumwagika kwa kioevu kwenye mirija inapovunjika, na umakini kamili unapaswa kulipwa kwa hatari ya uchafuzi unaosababishwa na matumizi yasiyofaa ya bidhaa. Inashauriwa kutumia mirija ya polystyrene (PS) iliyotolewa au mirija ya sindano ya polypropen (PP) kwa ajili ya nyenzo za mpini wa usufi. Haijalishi ni nyenzo gani inayotumika, viongezeo vya kalsiamu alginate haviwezi kuongezwa; vijiti vya mbao au vijiti vya mianzi. Kwa kifupi, usufi wa sampuli unapaswa kuhakikisha kiasi cha sampuli na kiasi cha kutolewa, na vifaa vilivyochaguliwa havipaswi kuwa na vitu vinavyoathiri majaribio yanayofuata.
2. Suluhisho la kuhifadhi virusi: Kuna aina mbili za suluhisho la kuhifadhi virusi zinazotumika sana sokoni, moja ni suluhisho la matengenezo ya virusi lililobadilishwa kulingana na njia ya usafirishaji, na nyingine ni suluhisho lililobadilishwa kwa ajili ya kutoa lysate ya asidi ya kiini.
Sehemu kuu ya kwanza ni Eagle's basic culture medium (MEM) au chumvi iliyosawazishwa ya Hank, ambayo huongezwa pamoja na chumvi, amino asidi, vitamini, glukosi na protini muhimu kwa ajili ya kuishi kwa virusi. Myeyusho huu wa kuhifadhi hutumia chumvi nyekundu ya sodiamu ya fenoli kama kiashiria na suluhisho. Wakati thamani ya pH ni 6.6-8.0, suluhisho ni waridi. Glukosi muhimu, L-glutamine na protini huongezwa kwenye suluhisho la kuhifadhi. Protini hutolewa katika mfumo wa seramu ya ng'ombe ya fetasi au albumini ya seramu ya ng'ombe, ambayo inaweza kuimarisha ganda la protini la virusi. Kwa sababu suluhisho la kuhifadhi lina virutubisho vingi, linachangia kuishi kwa virusi lakini pia lina manufaa kwa ukuaji wa bakteria. Ikiwa suluhisho la kuhifadhi limechafuliwa na bakteria, litaongezeka kwa kiasi kikubwa. Dioksidi kaboni katika metaboliti zake itasababisha suluhisho la kuhifadhi pH kuanguka kutoka waridi Hugeuka njano. Kwa hivyo, watengenezaji wengi wameongeza viambato vya antibacterial kwenye michanganyiko yao. Dawa zinazopendekezwa za kuzuia bakteria ni penicillin, streptomycin, gentamicin na polymyxin B. Sodiamu azidi na 2-methyl hazipendekezwi. Vizuizi kama vile 4-methyl-4-isothiazolin-3-one (MCI) na 5-chloro-2-methyl-4-isothiazolin-3-one (CMCI) kwa sababu vipengele hivi vina athari kwenye mmenyuko wa PCR. Kwa kuwa sampuli inayotolewa na suluhisho hili la uhifadhi kimsingi ni virusi hai, uhalisi wa sampuli unaweza kuwekwa kwa kiwango kikubwa zaidi, na inaweza kutumika sio tu kwa ajili ya uchimbaji na ugunduzi wa asidi ya viini vya virusi, lakini pia kwa ajili ya ukuzaji na utenganishaji wa virusi. Hata hivyo, ikumbukwe kwamba inapotumika kwa ajili ya ugunduzi, uchimbaji na utakaso wa asidi ya viini lazima ufanyike baada ya kuzima.
Aina nyingine ya suluhisho la uhifadhi lililoandaliwa kulingana na lysate ya uchimbaji wa asidi ya kiini, vipengele vikuu ni chumvi zenye uwiano, wakala wa chelating wa EDTA, chumvi ya guanidine (kama vile guanidine isothiocyanate, guanidine hydrochloride, nk), surfactant ya anionic (kama vile dodecane Sodium sulfate), surfactants ya cationic (kama vile tetradecyltrimethylammonium oxalate), fenoli, 8-hydroxyquinoline, dithiothreitol (DTT), proteinase K na vipengele vingine. Suluhisho hili la kuhifadhi ni la kugawanya virusi moja kwa moja ili kutoa asidi ya kiini na kuondoa RNase. Ikiwa itatumika tu kwa RT-PCR, inafaa zaidi, lakini lysate inaweza kuzima virusi. Aina hii ya sampuli haiwezi kutumika kwa ajili ya kutenganisha utamaduni wa virusi.
Wakala wa chelating ya ioni ya chuma inayotumika katika suluhisho la kuhifadhi virusi inashauriwa kutumia chumvi za EDTA (kama vile asidi ya dipotassium ethylenediaminetetraacetic, asidi ya disodium ethylenediaminetetraacetic, nk), na haipendekezwi kutumia heparini (kama vile heparini ya sodiamu, heparini ya lithiamu), ili isiathiri ugunduzi wa PCR.
3. Mrija wa kuhifadhi: Nyenzo ya mrija wa kuhifadhi inapaswa kuchaguliwa kwa uangalifu. Kuna data inayopendekeza kwamba polipropilini (Polipropilini) inahusiana na ufyonzaji wa asidi ya kiini, hasa katika kiwango cha juu cha ioni za mvutano, polyethilini (Poliyelini) inapendelewa zaidi kuliko polipropilini (Polipropilini). Ni rahisi kushika DNA/RNA. Plastiki ya polima ya poliyethilini-propilini (Polyallomer) na baadhi ya vyombo vya plastiki vya polipropilini (Polipropilini) vilivyosindikwa maalum vinafaa zaidi kwa uhifadhi wa DNA/RNA. Zaidi ya hayo, unapotumia swabu inayoweza kuvunjika, mrija wa kuhifadhi unapaswa kujaribu kuchagua chombo chenye urefu wa zaidi ya sentimita 8 ili kuzuia yaliyomo kunyunyiziwa na kuchafuliwa wakati swabu imevunjika.
4. Maji kwa ajili ya kuhifadhi myeyusho: Maji safi kabisa yanayotumika kwa ajili ya kuhifadhi myeyusho yanapaswa kuchujwa kupitia utando wa kuchuja myeyusho wenye uzito wa molekuli wa 13,000 ili kuhakikisha kuondolewa kwa uchafu wa polima kutoka kwa vyanzo vya kibiolojia, kama vile RNase, DNase, na endotoxin, na utakaso wa kawaida haupendekezwi. Maji au maji yaliyosafishwa.
2. Matumizi ya mirija ya sampuli za virusi
Kuchukua sampuli kwa kutumia mrija wa sampuli ya virusi kumegawanywa zaidi katika sampuli ya oropharyngeal na sampuli ya nasopharyngeal:
1. Sampuli ya oropharynx: Kwanza bonyeza ulimi kwa kutumia kifaa cha kukandamiza ulimi, kisha nyoosha kichwa cha swabu ya sampuli kwenye koo ili kufuta tonsils za pande mbili za koromeo na ukuta wa nyuma wa koromeo, na futa ukuta wa nyuma wa koromeo kwa nguvu nyepesi, epuka kugusa kitengo cha ulimi.
2. Sampuli ya pua: pima umbali kutoka ncha ya pua hadi kwenye lobe ya sikio kwa kutumia swabu na uweke alama kwa kidole, ingiza swabu ya sampuli kwenye uwazi wa pua kuelekea pua wima (uso), swabu inapaswa kupanua angalau nusu ya urefu wa lobe ya sikio hadi ncha ya pua. Acha swabu puani kwa sekunde 15-30, zungusha kwa upole mara 3-5, na uondoe swabu.
Si vigumu kuona kutokana na njia ya matumizi, iwe ni swab ya oropharyngeal au swab ya nasopharyngeal, sampuli ni kazi ya kiufundi, ambayo ni ngumu na imechafuliwa. Ubora wa sampuli iliyokusanywa unahusiana moja kwa moja na ugunduzi unaofuata. Ikiwa sampuli iliyokusanywa ina mzigo wa virusi. Ni rahisi kusababisha matokeo hasi yasiyo sahihi, ni vigumu kuthibitisha utambuzi.
Muda wa chapisho: Juni-21-2020
