1. Ngeunaan pabrikasi tabung sampling virus
Tabung sampling virus kaasup kana produk alat médis. Kaseueuran pabrik domestik kadaptar dumasar kana produk kelas hiji, sareng sakedik perusahaan anu kadaptar dumasar kana produk kelas dua. Anyar-anyar ieu, pikeun minuhan kabutuhan darurat Wuhan sareng tempat-tempat sanés, seueur perusahaan anu nganggo "saluran darurat" "Ngadaptarkeun idin rékaman kelas hiji". Tabung sampling virus diwangun ku swab sampling, larutan pengawetan virus, sareng bungkus luar. Kusabab teu aya standar nasional atanapi standar industri anu ngahiji, produk ti sababaraha pabrik rupa-rupa pisan.
1. Kapas sampling: Kapas sampling langsung kontak sareng tempat sampling, sareng bahan sirah sampling raket patalina sareng deteksi salajengna. Hulu kapas sampling kedah didamel tina serat sintétis Poliéster (PE) atanapi Rayon (serat jieunan). Spons kalsium alginat atanapi kapas iteuk kai (kalebet iteuk awi) teu tiasa dianggo, sareng bahan sirah kapas teu tiasa produk katun. Kusabab serat katun gaduh adsorpsi protéin anu kuat, éta henteu gampang diélusi kana larutan panyimpenan salajengna; sareng nalika iteuk kai atanapi iteuk awi anu ngandung kalsium alginat sareng komponén kai rusak, ngarendem dina larutan panyimpenan ogé bakal nyerep protéin, sareng bahkan bakal ngahambat réaksi PCR salajengna. Disarankeun pikeun nganggo serat sintétis sapertos serat PE, serat poliéster sareng serat polipropilén pikeun bahan sirah kapas. Serat alami sapertos katun henteu disarankeun. Serat nilon ogé henteu disarankeun sabab serat nilon (sarupa sareng sirah sikat gigi) nyerep cai. Goréng, nyababkeun volume sampling anu teu cekap, mangaruhan laju deteksi. Spons kalsium alginat dilarang pikeun bahan kapas sampling! Gagang kapas gaduh dua jinis: rusak sareng built-in. Swab anu rusak disimpen dina tabung panyimpen saatos sampling, sareng tutup tabung rusak saatos rusak tina posisi caket sirah sampling; swab anu dipasang langsung nempatkeun swab sampling kana tabung panyimpen saatos sampling, sareng panutup tabung tabung panyimpenan diwangun dina Luruskeun liang alit sareng luhur gagang sareng kencengkeun panutup tabung. Ngabandingkeun dua metode, anu terakhir relatif aman. Nalika swab anu rusak dianggo babarengan sareng tabung panyimpen ukuran anu langkung alit, éta tiasa nyababkeun cipratan cairan dina tabung nalika rusak, sareng perhatian pinuh kedah dibayar kana résiko kontaminasi anu disababkeun ku panggunaan produk anu teu leres. Disarankeun pikeun nganggo tabung ékstrusi polistirena (PS) kosong atanapi tabung kusut injeksi polipropilén (PP) pikeun bahan gagang swab. Henteu paduli bahan naon anu dianggo, aditif kalsium alginat henteu tiasa ditambihkeun; iteuk kai atanapi iteuk awi. Singkatna, swab sampling kedah mastikeun jumlah sampling sareng jumlah pelepasan, sareng bahan anu dipilih henteu kedah ngandung zat anu mangaruhan tés salajengna.
2. Solusi pangawetan virus: Aya dua jinis solusi pangawetan virus anu seueur dianggo di pasar, anu kahiji nyaéta solusi pangropéa virus anu dimodifikasi dumasar kana média transportasi, sareng anu kadua nyaéta solusi anu dimodifikasi pikeun lisat ékstraksi asam nukléat.
Komponén utama tina anu kahiji nyaéta média kultur dasar Eagle (MEM) atanapi uyah saimbang Hank, anu ditambahkeun ku uyah, asam amino, vitamin, glukosa sareng protéin anu diperyogikeun pikeun salametna virus. Larutan panyimpenan ieu nganggo uyah natrium fenol beureum salaku indikator sareng larutan. Nalika nilai pH 6,6-8,0, larutanna warnana pink. Glukosa, L-glutamin sareng protéin anu diperyogikeun ditambahkeun kana larutan pengawetan. Protéin disayogikeun dina bentuk sérum sapi fétal atanapi albumin sérum sapi, anu tiasa ngastabilkeun cangkang protéin virus. Kusabab larutan pengawetan beunghar nutrisi, éta kondusif pikeun salametna virus tapi ogé mangpaat pikeun kamekaran baktéri. Upami larutan pengawetan kacemar ku baktéri, éta bakal ngalikeun dina jumlah anu ageung. Karbon dioksida dina metabolitna bakal nyababkeun pH larutan pengawetan turun tina pink Janten konéng. Ku alatan éta, kaseueuran produsén parantos nambihan bahan antibakteri kana formulasi na. Agén antibakteri anu disarankeun nyaéta penisilin, streptomisin, gentamisin sareng polimiksin B. Natrium azida sareng 2-metil henteu disarankeun. Inhibitor sapertos 4-metil-4-isotiazolin-3-on (MCI) sareng 5-kloro-2-metil-4-isotiazolin-3-on (CMCI) sabab komponén ieu gaduh pangaruh kana réaksi PCR. Kusabab sampel anu disayogikeun ku larutan pengawetan ieu dasarna mangrupikeun virus hirup, kaaslian sampel tiasa dijaga sacara maksimal, sareng éta tiasa dianggo henteu ngan ukur pikeun ékstraksi sareng deteksi asam nukléat virus, tapi ogé pikeun budidaya sareng isolasi virus. Nanging, kedah dicatet yén nalika dianggo pikeun deteksi, ékstraksi sareng purifikasi asam nukléat kedah dilakukeun saatos inaktivasi.
Jenis séjén tina larutan pangawét anu disiapkeun dumasar kana lisat ékstraksi asam nukléat, komponén utama nyaéta uyah saimbang, agén khelat EDTA, uyah guanidin (sapertos guanidin isotiosianat, guanidin hidroklorida, jsb.), surfaktan anionik (sapertos dodekan Natrium sulfat), surfaktan kationik (sapertos tetradesiltrimetilamonium oksalat), fenol, 8-hidroksikuinolin, ditiotreitol (DTT), protéinase K sareng komponén sanésna, larutan panyimpen ieu pikeun langsung meulah virus pikeun ngaleupaskeun asam nukléat sareng ngaleungitkeun RNase. Upami ngan ukur dianggo pikeun RT-PCR, éta langkung cocog, tapi lisat tiasa nganonaktipkeun virus. Sampel sapertos kieu henteu tiasa dianggo pikeun misahkeun kultur virus.
Agen khelat ion logam anu dianggo dina larutan pengawetan virus disarankeun nganggo uyah EDTA (sapertos asam dipotassium ethylenediaminetetraacetic, asam disodium ethylenediaminetetraacetic, jsb.), sareng henteu disarankeun nganggo heparin (sapertos natrium heparin, litium heparin), supados henteu mangaruhan deteksi PCR.
3. Tabung pangawet: Bahan tabung pangawet kedah dipilih kalayan ati-ati. Aya data anu nunjukkeun yén polipropilen (Polipropilen) aya hubunganana sareng adsorpsi asam nukléat, khususna dina konsentrasi ion tegangan tinggi, polietilen (Polietilen) langkung dipikaresep tibatan polipropilen (Polipropilen). DNA/RNA anu gampang kaharti. Plastik polimér polietilen-propilen (Polyallomer) sareng sababaraha wadah plastik polipropilen (Polipropilen) anu diprosés khusus langkung cocog pikeun panyimpenan DNA/RNA. Salaku tambahan, nalika nganggo swab anu gampang peupeus, tabung panyimpenan kedah nyobian milih wadah anu jangkungna langkung ti 8 cm pikeun nyegah eusina nyiprat sareng kacemar nalika swab peupeus.
4. Cai pikeun larutan pengawetan produksi: Cai ultra murni anu dianggo pikeun larutan pengawetan produksi kedah disaring ngalangkungan mémbran ultrafiltrasi kalayan beurat molekul 13.000 pikeun mastikeun panyabutan pangotor polimér tina sumber biologis, sapertos RNase, DNase, sareng endotoksin, sareng pemurnian biasa henteu disarankeun. Cai atanapi cai sulingan.
2. Pamakéan tabung sampling virus
Pangambilan sampel nganggo tabung pangambilan sampel virus utamina dibagi kana pangambilan sampel orofaring sareng pangambilan sampel nasofaring:
1. Sampling orofaring: Mimitina pencét létah ku penekan létah, teras rentangkeun sirah swab sampling kana tikoro pikeun ngusap amandel faring bilateral sareng témbok faring posterior, teras usap témbok faring posterior ku kakuatan anu hampang, ulah noel unit létah.
2. Ngambil sampel nasofaring: ukur jarak ti tungtung irung ka cuping ceuli nganggo swab teras tandai ku ramo, lebetkeun swab sampel kana rongga irung dina arah irung vertikal (beungeut), swab kedah manjang sahenteuna satengah panjang cuping ceuli ka tungtung irung, Keun swab dina irung salami 15-30 detik, puter lalaunan 3-5 kali, teras cabut swabna.
Teu hésé ningali tina metode panggunaanana, naha éta swab orofaring atanapi swab nasofaring, sampling mangrupikeun tugas téknis, anu hésé sareng kacemar. Kualitas sampel anu dikumpulkeun langsung aya hubunganana sareng deteksi salajengna. Upami sampel anu dikumpulkeun ngagaduhan viral load Rendah, gampang nyababkeun négatif palsu, hésé pikeun mastikeun diagnosis.
Waktos posting: 21-Jun-2020
