भाइरस नमूना ट्यूबमा धेरै विचारहरू

१. भाइरस नमूना ट्यूबहरूको निर्माणको बारेमा
भाइरस नमूना ट्यूबहरू चिकित्सा उपकरण उत्पादनहरू हुन्। धेरैजसो घरेलु उत्पादकहरू प्रथम श्रेणीका उत्पादनहरू अनुसार दर्ता गरिएका छन्, र थोरै कम्पनीहरू दोस्रो श्रेणीका उत्पादनहरू अनुसार दर्ता गरिएका छन्। हालै, वुहान र अन्य ठाउँहरूको आपतकालीन आवश्यकताहरू पूरा गर्न, धेरै कम्पनीहरूले "आपतकालीन च्यानल" लिएका छन् "प्रथम श्रेणीको रेकर्ड अनुमतिको लागि आवेदन दिनुहोस्। भाइरस नमूना ट्यूब नमूना स्वाब, भाइरस संरक्षण समाधान र बाहिरी प्याकेजिङबाट बनेको हुन्छ। कुनै एकीकृत राष्ट्रिय मानक वा उद्योग मानक नभएकोले, विभिन्न निर्माताहरूको उत्पादनहरू धेरै फरक हुन्छन्।

१. नमूना लिने स्वाब: नमूना लिने स्वाबले सिधै नमूना लिने साइटलाई सम्पर्क गर्छ, र नमूना लिने टाउकोको सामग्री पछिको पत्ता लगाउनेसँग नजिकको सम्बन्ध छ। नमूना लिने स्वाब हेड पलिएस्टर (PE) सिंथेटिक फाइबर वा रेयन (मानव निर्मित फाइबर) बाट बनेको हुनुपर्छ। क्याल्सियम अल्जिनेट स्पन्ज वा काठको स्टिक स्वाब (बाँसको स्टिक सहित) प्रयोग गर्न सकिँदैन, र स्वाब हेडको सामग्री कपास उत्पादनहरू हुन सक्दैन। कपासको फाइबरमा प्रोटिनको बलियो अवशोषण भएको हुनाले, पछिको भण्डारण घोलमा जान सजिलो हुँदैन; र जब क्याल्सियम अल्जिनेट र काठका घटकहरू भएको काठको लौरो वा बाँसको स्टिक भाँचिन्छ, भण्डारण घोलमा भिजाउँदा प्रोटिन पनि सोस्नेछ, र यसले पछिको PCR प्रतिक्रियालाई पनि रोक लगाउन सक्छ। स्वाब हेडको सामग्रीको लागि PE फाइबर, पलिएस्टर फाइबर र पोलिप्रोपाइलिन फाइबर जस्ता सिंथेटिक फाइबरहरू प्रयोग गर्न सिफारिस गरिन्छ। कपास जस्ता प्राकृतिक फाइबरहरू सिफारिस गरिँदैन। नायलन फाइबरहरू पनि सिफारिस गरिँदैन किनभने नायलन फाइबरहरू (टूथब्रश हेडहरू जस्तै) ले पानी अवशोषित गर्दछ। खराब, अपर्याप्त नमूना मात्राको परिणामस्वरूप, पत्ता लगाउने दरलाई असर गर्छ। क्याल्सियम अल्जिनेट स्पन्ज स्वाब सामग्रीको नमूना लिन निषेध गरिएको छ! स्वाब ह्यान्डल दुई प्रकारका हुन्छन्: भाँचिएको र बिल्ट-इन। भाँचिएको स्वाब नमूना लिएपछि भण्डारण ट्यूबमा राखिन्छ, र नमूना हेड नजिकको स्थितिबाट भाँचिएपछि ट्यूब क्याप भाँचिन्छ; बिल्ट-इन स्वाबले नमूना लिएपछि सिधै नमूना स्वाबलाई भण्डारण ट्यूबमा राख्छ, र भण्डारण ट्यूब ट्यूब कभर ह्यान्डलको माथिल्लो भागसँग सानो प्वाललाई पङ्क्तिबद्ध गर्नुहोस् र ट्यूब कभरलाई कस्नुहोस्। दुई विधिहरूको तुलना गर्दा, पछिल्लो अपेक्षाकृत सुरक्षित छ। जब भाँचिएको स्वाब सानो आकारको भण्डारण ट्यूबसँग संयोजनमा प्रयोग गरिन्छ, यसले भाँचिएको बेला ट्यूबमा तरल पदार्थ छर्कन सक्छ, र उत्पादनको अनुचित प्रयोगबाट हुने प्रदूषणको जोखिममा पूर्ण ध्यान दिनुपर्छ। स्वाब ह्यान्डलको सामग्रीको लागि खोक्रो पोलिस्टीरिन (PS) एक्सट्रुडेड ट्यूब वा पोलीप्रोपाइलीन (PP) इन्जेक्सन क्रिजिङ ट्यूब प्रयोग गर्न सिफारिस गरिन्छ। जुनसुकै सामग्री प्रयोग गरिएको भए पनि, क्याल्सियम अल्जिनेट एडिटिभहरू थप्न सकिँदैन; काठको लट्ठी वा बाँसको लट्ठी। छोटकरीमा, नमूना स्वाबले नमूनाको मात्रा र रिलीजको मात्रा सुनिश्चित गर्नुपर्छ, र चयन गरिएका सामग्रीहरूमा पछिल्ला परीक्षणलाई असर गर्ने पदार्थहरू हुनु हुँदैन।

२. भाइरस संरक्षण समाधान: बजारमा व्यापक रूपमा प्रयोग हुने दुई प्रकारका भाइरस संरक्षण समाधानहरू छन्, एउटा यातायात माध्यमको आधारमा परिमार्जित भाइरस मर्मत समाधान हो, र अर्को न्यूक्लिक एसिड निकासी लाइसेटको लागि परिमार्जित समाधान हो।
पहिलेको मुख्य घटक ईगलको आधारभूत संस्कृति माध्यम (MEM) वा ह्याङ्कको सन्तुलित नुन हो, जुन भाइरस बाँच्नको लागि आवश्यक लवण, एमिनो एसिड, भिटामिन, ग्लुकोज र प्रोटिनसँग थपिन्छ। यो भण्डारण घोलले फिनोल रातो सोडियम नुनलाई सूचक र घोलको रूपमा प्रयोग गर्दछ। जब pH मान 6.6-8.0 हुन्छ, घोल गुलाबी हुन्छ। आवश्यक ग्लुकोज, L-ग्लुटामाइन र प्रोटिन संरक्षण घोलमा थपिन्छ। प्रोटिन भ्रूण गोवाइन सीरम वा गोवाइन सीरम एल्बुमिनको रूपमा प्रदान गरिन्छ, जसले भाइरसको प्रोटिन शेललाई स्थिर बनाउन सक्छ। संरक्षण घोल पोषक तत्वहरूले भरिपूर्ण भएकोले, यो भाइरसको बाँच्नको लागि अनुकूल छ तर ब्याक्टेरियाको वृद्धिको लागि पनि लाभदायक छ। यदि संरक्षण घोल ब्याक्टेरियाले दूषित छ भने, यो ठूलो मात्रामा गुणा हुनेछ। यसको मेटाबोलाइट्समा रहेको कार्बन डाइअक्साइडले संरक्षण घोलको pH गुलाबीबाट झर्नेछ र पहेंलो हुनेछ। त्यसकारण, धेरैजसो निर्माताहरूले आफ्नो सूत्रहरूमा जीवाणुरोधी तत्वहरू थपेका छन्। सिफारिस गरिएका जीवाणुरोधी एजेन्टहरू पेनिसिलिन, स्ट्रेप्टोमाइसिन, जेन्टामिसिन र पोलिमिक्सिन बी हुन्। सोडियम एजाइड र २-मिथाइल ४-मिथाइल-४-आइसोथियाजोलिन-३-वन (MCI) र ५-क्लोरो-२-मिथाइल-४-आइसोथियाजोलिन-३-वन (CMCI) जस्ता अवरोधकहरू सिफारिस गरिँदैन किनभने यी घटकहरूले PCR प्रतिक्रियामा प्रभाव पार्छन्। यस संरक्षण समाधानद्वारा प्रदान गरिएको नमूना मूल रूपमा जीवित भाइरस भएकोले, नमूनाको मौलिकतालाई अधिकतम हदसम्म राख्न सकिन्छ, र यसलाई भाइरस न्यूक्लिक एसिडको निकासी र पत्ता लगाउन मात्र होइन, तर भाइरसहरूको खेती र अलगावको लागि पनि प्रयोग गर्न सकिन्छ। यद्यपि, यो ध्यान दिनुपर्छ कि पत्ता लगाउन प्रयोग गर्दा, निष्क्रियता पछि न्यूक्लिक एसिड निकासी र शुद्धीकरण गर्नुपर्छ।
न्यूक्लिक एसिड निकासी लाइसेटमा आधारित अर्को प्रकारको संरक्षण घोल तयार पारिएको छ, जसका मुख्य घटकहरू सन्तुलित लवणहरू, EDTA चेलेटिंग एजेन्ट, ग्वानिडाइन नुन (जस्तै ग्वानिडाइन आइसोथियोसाइनेट, ग्वानिडाइन हाइड्रोक्लोराइड, आदि), एनियोनिक सर्फ्याक्टेन्ट (जस्तै डोडेकेन सोडियम सल्फेट), क्याटनिक सर्फ्याक्टेन्टहरू (जस्तै टेट्राडेसिलट्रिमेथिलमोनियम अक्सालेट), फिनोल, ८-हाइड्रोक्सीक्विनोलिन, डिथियोथ्रेइटोल (DTT), प्रोटीनेज K र अन्य घटकहरू हुन्। यो भण्डारण घोल भनेको न्यूक्लिक एसिड रिलिज गर्न र RNase लाई हटाउन भाइरसलाई सिधै क्लिभ गर्नु हो। यदि RT-PCR को लागि मात्र प्रयोग गरियो भने, यो बढी उपयुक्त हुन्छ, तर लाइसेटले भाइरसलाई निष्क्रिय पार्न सक्छ। यस प्रकारको नमूना भाइरस संस्कृति विभाजनको लागि प्रयोग गर्न सकिँदैन।

भाइरस संरक्षण घोलमा प्रयोग हुने धातु आयन चेलेटिंग एजेन्टलाई EDTA लवण (जस्तै डिपोटासियम एथिलेनेडियामिनटेट्राएसेटिक एसिड, डिसोडियम एथिलेनेडियामिनटेट्राएसेटिक एसिड, आदि) प्रयोग गर्न सिफारिस गरिन्छ, र PCR पत्ता लगाउने प्रक्रियालाई असर नगर्न हेपरिन (जस्तै सोडियम हेपरिन, लिथियम हेपरिन) प्रयोग गर्न सिफारिस गरिँदैन।
३. संरक्षण ट्यूब: संरक्षण ट्यूबको सामग्री सावधानीपूर्वक चयन गर्नुपर्छ। पोलिप्रोपाइलिन (पोलिप्रोपाइलिन) न्यूक्लिक एसिडको सोखनासँग सम्बन्धित छ भन्ने तथ्याङ्कहरू छन्, विशेष गरी उच्च तनाव आयन सांद्रतामा, पोलिप्रोपाइलिन (पोलिप्रोपाइलिन) भन्दा पोलिथिलीन (पोलिप्रोपाइलिन) बढी रुचाइन्छ। DNA/RNA बुझ्न सजिलो। पोलिथिलीन-प्रोपाइलिन पोलिमर (पोलिप्रोपाइलिन) प्लास्टिक र केही विशेष रूपमा प्रशोधित पोलिप्रोपाइलिन (पोलिप्रोपाइलिन) प्लास्टिक कन्टेनरहरू DNA/RNA भण्डारणको लागि बढी उपयुक्त छन्। थप रूपमा, भाँच्न मिल्ने स्वाब प्रयोग गर्दा, भण्डारण ट्यूबले ८ सेन्टिमिटरभन्दा बढी उचाइ भएको कन्टेनर चयन गर्ने प्रयास गर्नुपर्छ ताकि स्वाब भाँचिएपछि सामग्रीहरू छ्याप्न र दूषित हुनबाट जोगाउन सकियोस्।

४. उत्पादन संरक्षण घोलको लागि पानी: उत्पादन संरक्षण घोलको लागि प्रयोग गरिने अल्ट्राप्योर पानीलाई १३,००० आणविक भार भएको अल्ट्राफिल्ट्रेसन झिल्ली मार्फत फिल्टर गर्नुपर्छ ताकि RNase, DNase, र endotoxin जस्ता जैविक स्रोतहरूबाट पोलिमर अशुद्धताहरू हटाउन सकियोस्, र सामान्य शुद्धीकरण सिफारिस गरिँदैन। पानी वा आसुत पानी।

२. भाइरस नमूना ट्यूबहरूको प्रयोग

भाइरस नमूना ट्यूब प्रयोग गरेर नमूना लिने कार्यलाई मुख्यतया ओरोफ्यारिंजियल नमूना र नासोफ्यारिंजियल नमूनामा विभाजन गरिएको छ:

१. ओरोफ्यारिङ्गियल नमुना लिने: पहिले जिब्रोलाई जिब्रो डिप्रेसरले थिच्नुहोस्, त्यसपछि द्विपक्षीय ग्रसनी टन्सिल र पोस्टरियर ग्रसनी भित्ता पुछ्नको लागि नमुना स्वाबको टाउको घाँटीमा फैलाउनुहोस्, र हल्का बलले पोस्टरियर ग्रसनी भित्ता पुछ्नुहोस्, जिब्रो युनिटलाई नछुनुहोस्।

२. नासोफ्यारिङ्गियल नमुना लिने: नाकको टुप्पोदेखि कानको लोबसम्मको दूरी स्वाबले नाप्नुहोस् र औंलाले चिन्ह लगाउनुहोस्, नमुना स्वाबलाई ठाडो नाक (अनुहार) को दिशामा नाकको गुहामा घुसाउनुहोस्, स्वाब कानको लोबको लम्बाइको कम्तिमा आधा नाकको टुप्पोसम्म फैलिएको हुनुपर्छ, स्वाबलाई १५-३० सेकेन्डको लागि नाकमा छोड्नुहोस्, बिस्तारै ३-५ पटक घुमाउनुहोस्, र स्वाब निकाल्नुहोस्।
प्रयोगको विधिबाट यो हेर्न गाह्रो छैन, चाहे यो ओरोफ्यारिंजियल स्वाब होस् वा नासोफ्यारिंजियल स्वाब, नमूना लिने काम एक प्राविधिक कार्य हो, जुन गाह्रो र दूषित छ। सङ्कलन गरिएको नमूनाको गुणस्तर पछिको पत्ता लगाउनेसँग प्रत्यक्ष रूपमा सम्बन्धित छ। यदि सङ्कलन गरिएको नमूनामा भाइरल लोड कम छ भने, गलत नकारात्मक परिणामहरू निम्त्याउन सजिलो छ, निदान पुष्टि गर्न गाह्रो छ।