ဗိုင်းရပ်စ်နမူနာပြွန်အပေါ် အတွေးများစွာ

1. ဗိုင်းရပ်စ်နမူနာပြွန်များထုတ်လုပ်ခြင်းအကြောင်း
ဗိုင်းရပ်စ်နမူနာပြွန်များသည် ဆေးဘက်ဆိုင်ရာ ကိရိယာ ထုတ်ကုန်များနှင့် သက်ဆိုင်ပါသည်။ပြည်တွင်းထုတ်လုပ်သူအများစုသည် ပထမတန်းစားထုတ်ကုန်များအတိုင်း မှတ်ပုံတင်ကြပြီး ကုမ္ပဏီအနည်းငယ်သည် ဒုတိယတန်းစားထုတ်ကုန်များအတိုင်း မှတ်ပုံတင်ကြသည်။မကြာသေးမီက၊ ဝူဟန်မြို့နှင့် အခြားနေရာများ၏ အရေးပေါ်လိုအပ်ချက်များကို ဖြည့်ဆည်းရန်အတွက် ကုမ္ပဏီများစွာသည် "အရေးပေါ်ချန်နယ်" "ပထမတန်းစားမှတ်တမ်းခွင့်ပြုချက်အတွက် လျှောက်ထားခြင်း" ကို အသုံးပြုခဲ့သည်။ဗိုင်းရပ်စ်နမူနာပြွန်တွင် နမူနာနမူနာပြွန်၊ ဗိုင်းရပ်စ်ကာကွယ်မှုဖြေရှင်းချက်နှင့် ပြင်ပထုပ်ပိုးမှုများဖြင့် ဖွဲ့စည်းထားသည်။ပေါင်းစည်းထားသော အမျိုးသားအဆင့် စံနှုန်း သို့မဟုတ် စက်မှုလုပ်ငန်း စံနှုန်းမရှိသောကြောင့်၊ အမျိုးမျိုးသော ထုတ်လုပ်သူ၏ ထုတ်ကုန်များသည် အလွန်ကွဲပြားပါသည်။

1. Sampling swab- နမူနာ swab သည် နမူနာယူသည့်နေရာသို့ တိုက်ရိုက်ဆက်သွယ်ပြီး sampling head ၏ပစ္စည်းသည် နောက်ဆက်တွဲရှာဖွေတွေ့ရှိမှုနှင့် နီးကပ်စွာဆက်စပ်နေသည်။နမူနာ swab ဦးခေါင်းအား Polyester (PE) ဓာတုဖိုက်ဘာ သို့မဟုတ် ရေယွန် (လူလုပ်ဖိုက်ဘာ) ဖြင့် ပြုလုပ်သင့်သည်။Calcium alginate sponge သို့မဟုတ် သစ်သားချောင်း swabs (ဝါးချောင်းများ အပါအဝင်) ကို အသုံးမပြုနိုင်ပါ၊ နှင့် swab ဦးခေါင်း၏ ပစ္စည်းသည် ချည်ထည်ပစ္စည်းများ မဖြစ်ရပါ။ဝါဂွမ်းဖိုက်ဘာတွင် ပရိုတင်းဓာတ်ကို စုပ်ယူမှုအားကောင်းသောကြောင့်၊ ၎င်းသည် နောက်ဆက်တွဲသိုလှောင်မှုဖြေရှင်းချက်သို့ ဆင့်ခေါ်ရန် မလွယ်ကူပါ။ကယ်လစီယမ် အယ်လ်ဂျီနိတ်နှင့် သစ်သားအစိတ်အပိုင်းများပါရှိသော သစ်သားချောင်း သို့မဟုတ် ဝါးချောင်းတစ်ခု ကျိုးသွားသောအခါ သိုလှောင်မှုဖြေရှင်းချက်တွင် စိမ်ထားခြင်းဖြင့် ပရိုတင်းဓာတ်ကို စုပ်ယူနိုင်ပြီး ၎င်းသည် နောက်ဆက်တွဲ PCR တုံ့ပြန်မှုကိုပင် တားဆီးနိုင်သည်။swab ဦးခေါင်း၏ပစ္စည်းအတွက် PE ဖိုက်ဘာ၊ polyester ဖိုင်ဘာနှင့် polypropylene ဖိုင်ဘာကဲ့သို့သော ဓာတုအမျှင်များကို အသုံးပြုရန် အကြံပြုထားသည်။ဂွမ်းကဲ့သို့သော သဘာဝအမျှင်များကို မထောက်ခံပါ။နိုင်လွန်အမျှင်များ (သွားပွတ်တံခေါင်းများနှင့် ဆင်တူသည်) သည် ရေကိုစုပ်ယူနိုင်သောကြောင့် နိုင်လွန်အမျှင်များကိုလည်း မထောက်ခံပါ။ညံ့ဖျင်းသည်၊ လုံလောက်သောနမူနာထုထည်ကို ဖြစ်ပေါ်စေပြီး ထောက်လှမ်းမှုနှုန်းကို ထိခိုက်စေသည်။ကယ်လ်စီယမ်အယ်လ်ဂျင်နိတ်ရေမြှုပ်ကို နမူနာယူရန် တားမြစ်ထားသည်။Swab လက်ကိုင်တွင် ကွဲနေပြီး တပ်ဆင်ထားသည့် အမျိုးအစား နှစ်မျိုးရှိသည်။ကျိုးနေသော swab ကို နမူနာယူပြီးနောက် သိုလှောင်မှုပြွန်အတွင်း ထားရှိကာ နမူနာခေါင်းအနီး အနေအထားမှ ကျိုးသွားပြီးနောက် ပြွန်ဦးထုပ်သည် ကျိုးသွားပါသည်။တပ်ဆင်ထားသော swab သည် နမူနာယူပြီးနောက် သိုလှောင်မှုပြွန်ထဲသို့ တိုက်ရိုက်ထည့်ပေးပြီး သိုလှောင်မှုပြွန်ပြွန်အဖုံးကို လက်ကိုင်ထိပ်နှင့် အပေါက်ငယ်ဖြင့် ညှိထားပြီး ပြွန်အဖုံးကို တင်းကျပ်ထားသည်။နည်းလမ်းနှစ်ခုကို နှိုင်းယှဉ်ကြည့်ပါက၊ နောက်တစ်ခုက အတော်လေး အန္တရာယ်ကင်းပါတယ်။ကျိုးနေသော swab ကို အရွယ်အစားသေးငယ်သော သိုလှောင်မှုပြွန်နှင့် တွဲဖက်အသုံးပြုသောအခါ၊ ၎င်းသည် ကျိုးသွားသည့်အခါ ပြွန်အတွင်း အရည်များ ပက်ကျဲကျဲဖြစ်နိုင်ပြီး ထုတ်ကုန်ကို မှားယွင်းစွာအသုံးပြုခြင်းကြောင့် ညစ်ညမ်းမှုအန္တရာယ်ကို အပြည့်အဝ ဂရုပြုသင့်သည်။swab လက်ကိုင်၏ပစ္စည်းအတွက် hollow polystyrene (PS) extruded tube သို့မဟုတ် polypropylene (PP) ဆေးထိုးပြွန်ကို အသုံးပြုရန် အကြံပြုထားသည်။မည်သည့်ပစ္စည်းကိုအသုံးပြုသည်ဖြစ်စေ Calcium alginate additives များကို ထည့်၍မရနိုင်ပါ။သစ်သားချောင်း သို့မဟုတ် ဝါးချောင်းများ။အတိုချုပ်အားဖြင့်၊ sampling swab သည် နမူနာပမာဏနှင့် ထုတ်လွှတ်မှုပမာဏကို သေချာစေသင့်ပြီး ရွေးချယ်ထားသောပစ္စည်းများသည် နောက်ဆက်တွဲစမ်းသပ်မှုအပေါ် သက်ရောက်မှုရှိသော အရာများမရှိစေရပါ။

2. Virus ထိန်းသိမ်းခြင်းဖြေရှင်းချက်- စျေးကွက်တွင်တွင်ကျယ်စွာအသုံးပြုသောဗိုင်းရပ်စ်ထိန်းသိမ်းခြင်းဖြေရှင်းချက် နှစ်မျိုးရှိပြီး၊ တစ်ခုမှာ သယ်ယူပို့ဆောင်ရေးကြားခံအပေါ်အခြေခံ၍ ပြုပြင်ထားသော ဗိုင်းရပ်စ်ထိန်းသိမ်းမှုဖြေရှင်းချက်ဖြစ်ပြီး အခြားတစ်ခုမှာ nucleic acid ထုတ်ယူခြင်း lysate အတွက် ပြုပြင်ထားသောဖြေရှင်းချက်ဖြစ်သည်။
ယခင် ၏ အဓိက အစိတ်အပိုင်းမှာ Eagle ၏ အခြေခံ ယဉ်ကျေးမှု ကြားခံ (MEM) သို့မဟုတ် Hank ၏ ဟန်ချက်ညီသော ဆားဖြစ်ပြီး ဆားများ၊ အမိုင်နိုအက်ဆစ်များ၊ ဗီတာမင်များ၊ ဂလူးကို့စ် နှင့် ပရိုတင်းဓာတ်များ ပါ၀င်ပြီး ဗိုင်းရပ်စ် ရှင်သန်ရန် လိုအပ်ပါသည်။ဤသိုလှောင်မှုဖြေရှင်းချက်သည် ဖီနောအနီရောင်ဆိုဒီယမ်ဆားကို ညွှန်ပြချက်နှင့် ဖြေရှင်းချက်အဖြစ် အသုံးပြုသည်။pH တန်ဖိုး 6.6-8.0 ဖြစ်သောအခါ အဖြေသည် ပန်းရောင်ဖြစ်သည်။လိုအပ်သောဂလူးကို့စ်၊ L-glutamine နှင့်ပရိုတိန်းတို့ကိုထိန်းသိမ်းမှုဖြေရှင်းချက်တွင်ထည့်သွင်းထားသည်။ပရိုတင်းကို သန္ဓေသား၏သွေးရည်ကြည် သို့မဟုတ် ဗိုင်းရပ်စ်၏ပရိုတင်းခွံကို တည်ငြိမ်စေနိုင်သော ဘော့ဗိုဗိုမင်အယ်လ်ဘမ်ပုံစံဖြင့် ထောက်ပံ့ပေးသည်။အာဟာရဓာတ်များ ကြွယ်ဝစွာ ပါ၀င်သောကြောင့် ပိုးမွှားများ ရှင်သန်ရန် အထောက်အကူ ပြုသော်လည်း ဘက်တီးရီးယား ကြီးထွားမှုကိုလည်း အကျိုးပြုပါသည်။သိုလှောင်မှုအရည်သည် ဘက်တီးရီးယားပိုးများ ညစ်ညမ်းနေပါက၊ ၎င်းသည် များပြားစွာ များပြားလာမည်ဖြစ်သည်။၎င်း၏ ဇီဝဖြစ်စဉ်များတွင် ကာဗွန်ဒိုင်အောက်ဆိုဒ်သည် ထိန်းသိမ်းမှုဖြေရှင်းချက် pH ကို ပန်းရောင်မှ အဝါရောင်သို့ ကျဆင်းစေပါသည်။ထို့ကြောင့်၊ ထုတ်လုပ်သူအများစုသည် ၎င်းတို့၏ဖော်မြူလာများတွင် ဘက်တီးရီးယားပိုးမွှားပါဝင်ပစ္စည်းများကို ထည့်သွင်းထားသည်။အကြံပြုထားသော ဘက်တီးရီးယားပိုးသတ်ဆေးများသည် Penicillin၊ Streptomycin၊ gentamicin နှင့် polymyxin B. Sodium azide နှင့် 2-methyl ကို 4-methyl-4-isothiazolin-3-one (MCI) နှင့် 5-chloro-2-methyl-4 ကဲ့သို့သော တားမြစ်ဆေးများကို အကြံပြုထားခြင်းမရှိပါ။ -isothiazolin-3-one (CMCI) ဤအစိတ်အပိုင်းများသည် PCR တုံ့ပြန်မှုအပေါ်သက်ရောက်မှုရှိသောကြောင့်ဖြစ်သည်။ဤထိန်းသိမ်းမှုဖြေရှင်းချက်မှပေးဆောင်သောနမူနာသည် အခြေခံအားဖြင့်အသက်ရှင်သောဗိုင်းရပ်စ်ဖြစ်သောကြောင့်၊ နမူနာ၏မူလမူလကို အကြီးကျယ်ဆုံးအတိုင်းအတာအထိ ထိန်းသိမ်းထားနိုင်ပြီး ၎င်းကို ဗိုင်းရပ်စ်နျူကလိခ်အက်ဆစ်များထုတ်ယူခြင်းနှင့် ရှာဖွေတွေ့ရှိခြင်းအတွက်သာမက စိုက်ပျိုးခြင်းနှင့် စိုက်ပျိုးခြင်းအတွက်ပါ အသုံးပြုနိုင်သည်။ ဗိုင်းရပ်စ်များ၏အထီးကျန်။သို့ရာတွင်၊ ရှာဖွေတွေ့ရှိရန်အသုံးပြုသောအခါတွင်၊ နျူကလိခ်အက်ဆစ်ထုတ်ယူခြင်းနှင့် သန့်စင်ခြင်းတို့ကို မလှုပ်ရှားပြီးနောက်တွင် လုပ်ဆောင်ရမည်ဖြစ်ကြောင်း သတိပြုသင့်သည်။
nucleic acid ထုတ်ယူခြင်း lysate ကိုအခြေခံ၍ ပြင်ဆင်ထားသော အခြားထိန်းသိမ်းနည်းတစ်မျိုးမှာ မျှတသောဆားများ၊ EDTA chelating agent၊ guanidine ဆား (ဥပမာ guanidine isothiocyanate၊ guanidine hydrochloride စသည်ဖြင့်)၊ anionic surfactant (ဥပမာ dodecane Sodium sulfate)၊ cationic surfactants (ဥပမာ tetradecyltrimethylammonium oxalate), phenol, 8-hydroxyquinoline, dithiothreitol (DTT), proteinase K နှင့် အခြားအစိတ်အပိုင်းများ၊ ဤသိုလှောင်မှုဖြေရှင်းချက်သည် ဗိုင်းရပ်စ်ကိုတိုက်ရိုက်ရှင်းထုတ်ပြီး RNase ကိုဖယ်ရှားပစ်ရန်ဖြစ်သည်။RT-PCR အတွက်သာ အသုံးပြုပါက ပိုမိုသင့်လျော်သော်လည်း lysate သည် ဗိုင်းရပ်စ်ကို အသက်မသွင်းနိုင်ပါ။ဤနမူနာမျိုးသည် ဗိုင်းရပ်စ်ယဉ်ကျေးမှုကို ခွဲခြားရန်အတွက် အသုံးမပြုနိုင်ပါ။

ဗိုင်းရပ်စ်ထိန်းသိမ်းမှုဖြေရှင်းချက်တွင်အသုံးပြုသောသတ္တုအိုင်းယွန်း chelating အေးဂျင့်သည် EDTA ဆားများ (ဥပမာ dipotassium ethylenediaminetetraacetic acid၊ disodium ethylenediaminetetraacetic acid စသည်တို့) ကိုအသုံးပြုရန် အကြံပြုထားပြီး heparin (ဥပမာ ဆိုဒီယမ် ဟေပါရင်၊ လီသီယမ် ဟေပါရင်) ကိုအသုံးပြုရန် အကြံပြုထားသည်။ PCR detection ကိုမထိခိုက်စေရန်။
3. Preservation tube- ထိန်းသိမ်းစောင့်ရှောက်ရေးပြွန်၏ပစ္စည်းကို ဂရုတစိုက်ရွေးချယ်သင့်သည်။polypropylene (Polypropylene) သည် အထူးသဖြင့် တင်းအားမြင့်သော အိုင်းယွန်းအာရုံစူးစိုက်မှုတွင်၊ polypropylene (Polyethylene) သည် polypropylene (Polypropylene) သည် DNA/RNA ကို ဆုပ်ကိုင်ရလွယ်ကူသော DNA/RNA ထက် ပိုမိုနှစ်သက်ကြောင်း အချက်အလက်များရှိပါသည်။Polyethylene-propylene ပေါ်လီမာ (Polyallomer) ပလပ်စတစ်နှင့် အချို့သော အထူးပြုပြင်ထားသော ပိုလီပပီလင်း (Polypropylene) ပလပ်စတစ် ကွန်တိန်နာများသည် DNA/RNA သိုလှောင်မှုအတွက် ပိုမိုသင့်လျော်ပါသည်။ထို့အပြင်၊ ကျိုးနိုင်သော swab ကိုအသုံးပြုသောအခါ၊ swab ကျိုးသွားသောအခါပါဝင်သောအရာများဖျန်းခြင်းနှင့်ညစ်ညမ်းခြင်းမှကာကွယ်ရန်သိုလှောင်မှုပြွန်သည် 8 စင်တီမီတာထက်မြင့်သောကွန်တိန်နာကိုရွေးချယ်ရန်ကြိုးစားသင့်သည်။

4. ထုတ်လုပ်မှုထိန်းသိမ်းခြင်းအတွက်ရေ- ထုတ်လုပ်မှုထိန်းသိမ်းမှုဖြေရှင်းချက်အတွက်အသုံးပြုသော အလွန်သန့်စင်သောရေကို RNase၊ DNase နှင့် endotoxin ကဲ့သို့သော ဇီဝအရင်းအမြစ်များမှ ပိုလီမာအညစ်အကြေးများကို ဖယ်ရှားကြောင်းသေချာစေရန်အတွက် မော်လီကျူးအလေးချိန် 13,000 ရှိသော ultrafiltration အမြှေးပါးဖြင့် စစ်ထုတ်ရပါမည်။ သာမာန်သန့်စင်ခြင်းကို မထောက်ခံပါ။ရေ သို့မဟုတ် ပေါင်းခံရေ။

2. ဗိုင်းရပ်စ်နမူနာပြွန်များအသုံးပြုခြင်း။

ဗိုင်းရပ်စ်နမူနာပြွန်ကို အသုံးပြု၍ နမူနာယူခြင်းကို အဓိကအားဖြင့် oropharyngeal sampling နှင့် nasopharyngeal sampling ဟူ၍ ပိုင်းခြားထားသည်။

1. Oropharyngeal နမူနာကောက်ယူခြင်း- ပထမဦးစွာ လျှာကို စိတ်ဓာတ်ကျစေသော ကိရိယာဖြင့် လျှာကို ဖိပြီးနောက် လည်ချောင်းအတွင်းသို့ နမူနာယူထားသော ခေါင်းကို လည်ချောင်းအတွင်းသို့ ဆန့်ထုတ်ကာ လျှာကို မထိမိစေရန်၊ လျှာကို မထိမိစေရန်၊ ယူနစ်။

2. Nasopharyngeal sampling- နှာတံဖျားမှ နားရွက်အကွာအဝေးကို လက်ချောင်းဖြင့် အမှတ်အသားပြု၍ နှာတံအကွာအဝေးကို တိုင်းတာပြီး ဒေါင်လိုက်နှာခေါင်း (မျက်နှာ) လမ်းကြောင်းအတိုင်း နှာခေါင်းအတွင်းနမူနာထည့်ပါ၊ အနည်းဆုံး နားရွက်၏ အရှည်တစ်ဝက်ကို နှာတံဖျားအထိ၊ နှာခေါင်းအတွင်း 15-30 စက္ကန့်ကြာအောင် ထားကာ 3-5 ကြိမ် ဖြည်းညှင်းစွာ လှည့်ကာ swab ကို ရုပ်သိမ်းပါ။
oropharyngeal swab (သို့) nasopharyngeal swab ပဲဖြစ်ဖြစ်၊ အသုံးပြုနည်းကနေ ကြည့်ရတာ မခက်ပါဘူး၊ နမူနာယူတာက ခက်ခဲပြီး ညစ်ညမ်းတဲ့ နည်းပညာတစ်ခုပါ။စုဆောင်းထားသောနမူနာများ၏ အရည်အသွေးသည် နောက်ဆက်တွဲရှာဖွေတွေ့ရှိမှုနှင့် တိုက်ရိုက်သက်ဆိုင်သည်။စုဆောင်းထားသောနမူနာတွင် ဗိုင်းရပ်စ်ပိုးများ နည်းပါးနေပါက၊ မှားယွင်းသောအနုတ်လက္ခဏာများဖြစ်စေရန် လွယ်ကူပြီး ရောဂါရှာဖွေအတည်ပြုရန်ခက်ခဲသည်။