1. Dwar il-manifattura ta' tubi tal-kampjunar tal-virus
Tubi tal-kampjunar tal-virus jappartjenu għal prodotti ta' apparat mediku. Il-biċċa l-kbira tal-manifatturi domestiċi huma rreġistrati skont il-prodotti tal-ewwel klassi, u ftit kumpaniji huma rreġistrati skont il-prodotti tat-tieni klassi. Riċentement, sabiex jissodisfaw il-ħtiġijiet ta' emerġenza ta' Wuhan u postijiet oħra, ħafna kumpaniji ħadu l-"kanal ta' emerġenza" "Applika għall-permess ta' rekord tal-ewwel klassi. It-tubu tal-kampjunar tal-virus huwa magħmul minn swab tal-kampjunar, soluzzjoni ta' preservazzjoni tal-virus u ppakkjar ta' barra. Peress li m'hemm l-ebda standard nazzjonali unifikat jew standard industrijali, il-prodotti ta' diversi manifatturi jvarjaw ħafna.
1. Tampun tal-kampjunar: It-tampun tal-kampjunar jikkuntattja direttament is-sit tal-kampjunar, u l-materjal tar-ras tal-kampjunar huwa relatat mill-qrib mad-detezzjoni sussegwenti. Ir-ras tat-tampun tal-kampjunar għandha tkun magħmula minn fibra sintetika tal-Polyester (PE) jew Rayon (fibra magħmula mill-bniedem). Sponża tal-alġinat tal-kalċju jew tampuni tal-bsaten tal-injam (inklużi stikek tal-bambu) ma jistgħux jintużaw, u l-materjal tar-ras tat-tampun ma jistax ikun prodotti tal-qoton. Minħabba li l-fibra tal-qoton għandha adsorbiment qawwi tal-proteina, mhux faċli li tiġi eluwita fis-soluzzjoni tal-ħażna sussegwenti; u meta stikka tal-injam jew stikka tal-bambu li fiha alġinat tal-kalċju u komponenti tal-injam tkun miksura, it-tixrib fis-soluzzjoni tal-ħażna jassorbi wkoll il-proteina, u saħansitra jista' jinibixxi r-reazzjoni PCR sussegwenti. Huwa rakkomandat li jintużaw fibri sintetiċi bħal fibra PE, fibra tal-poliester u fibra tal-polipropilene għall-materjal tar-ras tat-tampun. Fibri naturali bħall-qoton mhumiex rakkomandati. Fibri tan-najlon mhumiex rakkomandati wkoll għax il-fibri tan-najlon (simili għar-ras tax-xkupilji tas-snien) jassorbu l-ilma. Dgħajjef, jirriżulta f'volum ta' kampjunar insuffiċjenti, li jaffettwa r-rata ta' detezzjoni. Sponża tal-alġinat tal-kalċju hija pprojbita għall-materjal tat-tampun tal-kampjunar! Il-manku tat-tampun għandu żewġ tipi: miksur u integrat. It-tajjar imkisser jitqiegħed fit-tubu tal-ħażna wara l-kampjunar, u l-għatu tat-tubu jinkiser wara li jinkiser mill-pożizzjoni ħdejn ir-ras tal-kampjunar; it-tajjar integrat ipoġġi t-tajjar tal-kampjunar direttament fit-tubu tal-ħażna wara l-kampjunar, u l-għatu tat-tubu tal-ħażna jinbena. Allinja t-toqba ż-żgħira mal-parti ta' fuq tal-manku u ssikka l-għatu tat-tubu. Meta jitqabblu ż-żewġ metodi, dan tal-aħħar huwa relattivament sikur. Meta t-tajjar imkisser jintuża flimkien ma' tubu tal-ħażna ta' daqs iżgħar, jista' jikkawża titjir ta' likwidu fit-tubu meta jinkiser, u għandha tingħata attenzjoni sħiħa għar-riskju ta' kontaminazzjoni kkawżata minn użu mhux xieraq tal-prodott. Huwa rakkomandat li jintuża tubu estruż tal-polistirene (PS) vojt jew tubu tat-tikmix tal-injezzjoni tal-polipropilene (PP) għall-materjal tal-manku tat-tajjar. Irrispettivament minn liema materjal jintuża, ma jistgħux jiżdiedu addittivi tal-alġinat tal-kalċju; stikek tal-injam jew stikek tal-bambu. Fil-qosor, it-tajjar tal-kampjunar għandu jiżgura l-ammont ta' kampjunar u l-ammont ta' rilaxx, u l-materjali magħżula m'għandhomx ikollhom sustanzi li jaffettwaw l-ittestjar sussegwenti.
2. Soluzzjoni għall-preservazzjoni tal-virus: Hemm żewġ tipi ta' soluzzjonijiet għall-preservazzjoni tal-virus użati ħafna fis-suq, waħda hija soluzzjoni għall-manutenzjoni tal-virus modifikata bbażata fuq il-mezz tat-trasport, u l-oħra hija soluzzjoni modifikata għal-lisat tal-estrazzjoni tal-aċidu nuklejku.
Il-komponent ewlieni tal-ewwel huwa l-mezz bażiku tal-kultura ta' Eagle (MEM) jew il-melħ bilanċjat ta' Hank, li jiżdied mal-melħ, l-aċidi amminiċi, il-vitamini, il-glukożju u l-proteini meħtieġa għas-sopravivenza tal-virus. Din is-soluzzjoni tal-ħażna tuża l-melħ tas-sodju aħmar tal-fenol bħala indikatur u soluzzjoni. Meta l-valur tal-pH ikun 6.6-8.0, is-soluzzjoni tkun roża. Il-glukożju, l-L-glutamina u l-proteina meħtieġa jiżdiedu mas-soluzzjoni tal-preservazzjoni. Il-proteina hija pprovduta fil-forma ta' serum bovin fetali jew albumina tas-serum bovin, li tista' tistabbilizza l-qoxra tal-proteina tal-virus. Minħabba li s-soluzzjoni tal-preservazzjoni hija rikka fin-nutrijenti, hija favorevoli għas-sopravivenza tal-virus iżda wkoll ta' benefiċċju għat-tkabbir tal-batterji. Jekk is-soluzzjoni tal-preservazzjoni tkun ikkontaminata bil-batterji, timmultiplika fi kwantitajiet kbar. Id-dijossidu tal-karbonju fil-metaboliti tiegħu jikkawża li l-pH tas-soluzzjoni tal-preservazzjoni tinżel minn roża għal isfar. Għalhekk, ħafna manifatturi żiedu ingredjenti antibatteriċi mal-formulazzjonijiet tagħhom. L-aġenti antibatteriċi rakkomandati huma peniċillina, streptomycin, gentamicin u polymyxin B. Sodium azide u 2-methyl mhumiex rakkomandati Inibituri bħal 4-methyl-4-isothiazolin-3-one (MCI) u 5-chloro-2-methyl-4-isothiazolin-3-one (CMCI) għaliex dawn il-komponenti għandhom effett fuq ir-reazzjoni tal-PCR. Peress li l-kampjun ipprovdut minn din is-soluzzjoni ta' preservazzjoni huwa bażikament virus ħaj, l-oriġinalità tal-kampjun tista' tinżamm kemm jista' jkun, u jista' jintuża mhux biss għall-estrazzjoni u d-detezzjoni ta' aċidi nuklejċi tal-virus, iżda wkoll għall-kultivazzjoni u l-iżolament tal-viruses. Madankollu, għandu jiġi nnutat li meta jintuża għad-detezzjoni, l-estrazzjoni u l-purifikazzjoni tal-aċidu nuklejku għandhom isiru wara l-inattivazzjoni.
Tip ieħor ta' soluzzjoni ta' preservazzjoni ppreparata bbażata fuq il-lisat tal-estrazzjoni tal-aċidu nuklejku, il-komponenti ewlenin huma melħ bilanċjat, aġent kelanti EDTA, melħ tal-guanidina (bħal guanidine isothiocyanate, guanidine hydrochloride, eċċ.), surfactant anjoniku (bħal dodecane Sodium sulfate), surfactants katjoniċi (bħal tetradecyltrimethylammonium oxalate), fenol, 8-hydroxyquinoline, dithiothreitol (DTT), proteinase K u komponenti oħra. Din is-soluzzjoni tal-ħażna hija biex taqsam direttament il-virus biex tirrilaxxa l-aċidu nuklejku u telimina l-RNase. Jekk tintuża biss għal RT-PCR, hija aktar adattata, iżda l-lisat jista' jiddiżattiva l-virus. Dan it-tip ta' kampjun ma jistax jintuża għas-separazzjoni tal-kultura tal-virus.
L-aġent kelanti tal-jone tal-metall użat fis-soluzzjoni tal-preservazzjoni tal-virus huwa rakkomandat li juża melħ EDTA (bħal dipotassium ethylenediaminetetraacetic acid, disodium ethylenediaminetetraacetic acid, eċċ.), u mhux rakkomandat li tuża heparin (bħal sodium heparin, lithium heparin), sabiex ma taffettwax id-detezzjoni tal-PCR.
3. Tubu tal-preservazzjoni: Il-materjal tat-tubu tal-preservazzjoni għandu jintgħażel bir-reqqa. Hemm dejta li tissuġġerixxi li l-polipropilene (Polipropilene) huwa relatat mal-assorbiment tal-aċidu nuklejku, speċjalment f'konċentrazzjoni għolja ta' joni ta' tensjoni, il-polietilene (Polyethylene) huwa aktar preferut mill-polipropilene (Polypropilene) DNA/RNA faċli biex jinqabad. Il-plastik tal-polimeru tal-polietilene-propilene (Polyallomer) u xi kontenituri tal-plastik tal-polipropilene (Polypropilene) ipproċessati b'mod speċjali huma aktar adattati għall-ħażna tad-DNA/RNA. Barra minn hekk, meta tuża swab li jista' jinkiser, it-tubu tal-ħażna għandu jipprova jagħżel kontenitur b'għoli akbar minn 8 ċm biex jipprevjeni li l-kontenut jiġi mxerred u kkontaminat meta s-swab jinkiser.
4. Ilma għas-soluzzjoni tal-preservazzjoni tal-produzzjoni: L-ilma ultrapur użat għas-soluzzjoni tal-preservazzjoni tal-produzzjoni għandu jiġi ffiltrat permezz ta' membrana ta' ultrafiltrazzjoni b'piż molekulari ta' 13,000 biex tiġi żgurata t-tneħħija ta' impuritajiet tal-polimeri minn sorsi bijoloġiċi, bħal RNase, DNase, u endotossina, u purifikazzjoni ordinarja mhijiex rakkomandata. Ilma jew ilma distillat.
2. Użu ta' tubi tal-kampjunar tal-virus
Il-kampjunar bl-użu tat-tubu tal-kampjunar tal-virus huwa prinċipalment maqsum f'kampjunar orofarinġali u kampjunar nażofarinġali:
1. Kampjunar orofarinġali: L-ewwel agħfas l-ilsien bid-depressor tal-ilsien, imbagħad estendi r-ras tat-tajjara tal-kampjunar fil-gerżuma biex timsaħ it-tonsilli farinġali bilaterali u l-ħajt farinġali posterjuri, u imsaħ il-ħajt farinġali posterjuri b'forza ħafifa, evita li tmiss l-unità tal-ilsien.
2. Kampjunar nażofarinġali: kejjel id-distanza mill-ponta tal-imnieħer sal-lobu tal-widna b'tampun u mmarka b'sebgħek, daħħal it-tampun tal-kampjunar fil-kavità nażali fid-direzzjoni tal-imnieħer vertikali (wiċċ), it-tampun għandu jestendi mill-inqas nofs it-tul tal-lobu tal-widna sal-ponta tal-imnieħer. Ħalli t-tampun fl-imnieħer għal 15-30 sekonda, dawwar bil-mod 3-5 darbiet, u neħħi t-tampun.
Mhuwiex diffiċli li wieħed jara mill-metodu tal-użu, kemm jekk huwiex swab orofarinġali jew swab nażofarinġali, it-teħid ta' kampjuni huwa kompitu tekniku, li huwa diffiċli u kkontaminat. Il-kwalità tal-kampjun miġbur hija direttament relatata mad-detezzjoni sussegwenti. Jekk il-kampjun miġbur għandu tagħbija virali baxxa, faċli li tikkawża negattivi foloz, diffiċli li tikkonferma d-dijanjosi.
Ħin tal-posta: 21 ta' Ġunju 2020
