ແນວຄວາມຄິດຫຼາຍຢ່າງກ່ຽວກັບທໍ່ເກັບຕົວຢ່າງໄວຣັດ

1. ກ່ຽວກັບການຜະລິດທໍ່ເກັບຕົວຢ່າງໄວຣັດ
ທໍ່ເກັບຕົວຢ່າງໄວຣັດເປັນຂອງຜະລິດຕະພັນອຸປະກອນການແພດ. ຜູ້ຜະລິດພາຍໃນປະເທດສ່ວນໃຫຍ່ໄດ້ລົງທະບຽນຕາມຜະລິດຕະພັນຊັ້ນໜຶ່ງ, ແລະມີບໍລິສັດໜ້ອຍທີ່ລົງທະບຽນຕາມຜະລິດຕະພັນຊັ້ນສອງ. ເມື່ອບໍ່ດົນມານີ້, ເພື່ອຕອບສະໜອງຄວາມຕ້ອງການສຸກເສີນຂອງເມືອງອູ່ຮັ່ນ ແລະ ສະຖານທີ່ອື່ນໆ, ບໍລິສັດຫຼາຍແຫ່ງໄດ້ໃຊ້ “ຊ່ອງທາງສຸກເສີນ” “ຍື່ນຂໍອະນຸຍາດບັນທຶກຊັ້ນໜຶ່ງ.” ທໍ່ເກັບຕົວຢ່າງໄວຣັດປະກອບດ້ວຍຜ້າເຊັດເກັບຕົວຢ່າງ, ນ້ຳຢາຮັກສາໄວຣັດ ແລະ ການຫຸ້ມຫໍ່ພາຍນອກ. ເນື່ອງຈາກບໍ່ມີມາດຕະຖານແຫ່ງຊາດ ຫຼື ມາດຕະຖານອຸດສາຫະກຳທີ່ເປັນເອກະພາບ, ຜະລິດຕະພັນຂອງຜູ້ຜະລິດຕ່າງໆຈຶ່ງແຕກຕ່າງກັນຫຼາຍ.

1. ໄມ້ສຳລີເກັບຕົວຢ່າງ: ໄມ້ສຳລີເກັບຕົວຢ່າງສຳຜັດໂດຍກົງກັບສະຖານທີ່ເກັບຕົວຢ່າງ, ແລະວັດສະດຸຂອງຫົວເກັບຕົວຢ່າງແມ່ນກ່ຽວຂ້ອງຢ່າງໃກ້ຊິດກັບການກວດຫາຕໍ່ມາ. ຫົວໄມ້ສຳລີເກັບຕົວຢ່າງຄວນເຮັດດ້ວຍເສັ້ນໃຍສັງເຄາະ Polyester (PE) ຫຼື Rayon (ເສັ້ນໃຍທີ່ມະນຸດສ້າງຂຶ້ນ). ບໍ່ສາມາດໃຊ້ຟອງນໍ້າແຄວຊຽມອານຈິເນດ ຫຼື ໄມ້ສຳລີໄມ້ (ລວມທັງໄມ້ໄຜ່) ໄດ້, ແລະວັດສະດຸຂອງຫົວໄມ້ສຳລີບໍ່ສາມາດເປັນຜະລິດຕະພັນຝ້າຍໄດ້. ເນື່ອງຈາກເສັ້ນໃຍຝ້າຍມີການດູດຊຶມໂປຣຕີນທີ່ແຂງແຮງ, ມັນຈຶ່ງບໍ່ງ່າຍທີ່ຈະລະລາຍເຂົ້າໄປໃນນໍ້າຢາເກັບຮັກສາຕໍ່ມາ; ແລະເມື່ອໄມ້ ຫຼື ໄມ້ໄຜ່ທີ່ມີແຄວຊຽມອານຈິເນດ ແລະສ່ວນປະກອບໄມ້ຖືກຫັກ, ການແຊ່ໃນນໍ້າຢາເກັບຮັກສາຍັງຈະດູດຊຶມໂປຣຕີນ, ແລະແມ້ກະທັ້ງສາມາດຍັບຍັ້ງປະຕິກິລິຍາ PCR ຕໍ່ມາໄດ້. ແນະນໍາໃຫ້ໃຊ້ເສັ້ນໃຍສັງເຄາະເຊັ່ນ: ເສັ້ນໃຍ PE, ເສັ້ນໃຍໂພລີເອສເຕີ ແລະ ເສັ້ນໃຍໂພລີໂພລີລີນສໍາລັບວັດສະດຸຂອງຫົວໄມ້ສຳລີ. ບໍ່ແນະນໍາໃຫ້ໃຊ້ເສັ້ນໃຍທໍາມະຊາດເຊັ່ນ: ຝ້າຍ. ບໍ່ແນະນໍາໃຫ້ໃຊ້ເສັ້ນໃຍໄນລອນເພາະວ່າເສັ້ນໃຍໄນລອນ (ຄ້າຍຄືກັບຫົວແປງຖູແຂ້ວ) ດູດຊຶມນໍ້າໄດ້ດີ. ບໍ່ດີ, ເຮັດໃຫ້ປະລິມານການເກັບຕົວຢ່າງບໍ່ພຽງພໍ, ສົ່ງຜົນກະທົບຕໍ່ອັດຕາການກວດພົບ. ຟອງນໍ້າແຄວຊຽມອານຈິເນດຖືກຫ້າມສໍາລັບວັດສະດຸສໍາລີເກັບຕົວຢ່າງ! ດ້າມຈັບຂອງໄມ້ສຳລີມີສອງປະເພດ: ແຕກຫັກ ແລະ ຕິດຕັ້ງໃນຕົວ. ຜ້າພັນສຳລີທີ່ແຕກຫັກຈະຖືກວາງໄວ້ໃນທໍ່ເກັບມ້ຽນຫຼັງຈາກການເກັບຕົວຢ່າງ, ແລະຝາປິດທໍ່ຈະຖືກຫັກຫຼັງຈາກຖືກຫັກຈາກຕຳແໜ່ງໃກ້ກັບຫົວເກັບຕົວຢ່າງ; ຜ້າພັນສຳລີທີ່ຕິດຕັ້ງໃນຕົວຈະເອົາຜ້າພັນສຳລີເກັບຕົວຢ່າງເຂົ້າໄປໃນທໍ່ເກັບຕົວຢ່າງໂດຍກົງ, ແລະຝາປິດທໍ່ທໍ່ເກັບຕົວຢ່າງຖືກສ້າງຂຶ້ນໃນ. ຈັດຮູນ້ອຍໆໃຫ້ກົງກັບດ້ານເທິງຂອງດ້າມຈັບ ແລະຮັດຝາປິດທໍ່ໃຫ້ແໜ້ນ. ເມື່ອປຽບທຽບສອງວິທີ, ວິທີສຸດທ້າຍແມ່ນຂ້ອນຂ້າງປອດໄພ. ເມື່ອໃຊ້ຜ້າພັນສຳລີທີ່ແຕກຫັກຮ່ວມກັບທໍ່ເກັບຂະໜາດນ້ອຍກວ່າ, ມັນອາດຈະເຮັດໃຫ້ຂອງແຫຼວກະຈາຍໃນທໍ່ເມື່ອແຕກ, ແລະຄວນເອົາໃຈໃສ່ຢ່າງເຕັມທີ່ຕໍ່ຄວາມສ່ຽງຂອງການປົນເປື້ອນທີ່ເກີດຈາກການນຳໃຊ້ຜະລິດຕະພັນທີ່ບໍ່ຖືກຕ້ອງ. ແນະນຳໃຫ້ໃຊ້ທໍ່ບີບອັດໂພລີສະໄຕຣີນ (PS) ຫຼືທໍ່ບີບໂພລີໂພລີລີນ (PP) ສຳລັບວັດສະດຸຂອງດ້າມຈັບຜ້າພັນສຳລີ. ບໍ່ວ່າຈະໃຊ້ວັດສະດຸໃດກໍ່ຕາມ, ບໍ່ສາມາດເພີ່ມສານເຕີມແຕ່ງແຄວຊຽມອານຈິເນດໄດ້; ໄມ້ທ່ອນໄມ້ ຫຼື ໄມ້ໄຜ່. ສະຫຼຸບແລ້ວ, ຜ້າພັນສຳລີເກັບຕົວຢ່າງຄວນຮັບປະກັນປະລິມານການເກັບຕົວຢ່າງ ແລະປະລິມານການປ່ອຍ, ແລະວັດສະດຸທີ່ເລືອກຕ້ອງບໍ່ມີສານທີ່ມີຜົນກະທົບຕໍ່ການທົດສອບຕໍ່ມາ.

2. ວິທີແກ້ໄຂການຮັກສາໄວຣັດ: ມີວິທີແກ້ໄຂການຮັກສາໄວຣັດສອງຊະນິດທີ່ຖືກນຳໃຊ້ຢ່າງກວ້າງຂວາງໃນຕະຫຼາດ, ໜຶ່ງແມ່ນວິທີແກ້ໄຂການຮັກສາໄວຣັດທີ່ດັດແປງໂດຍອີງໃສ່ຕົວກາງການຂົນສົ່ງ, ແລະອີກອັນໜຶ່ງແມ່ນວິທີແກ້ໄຂທີ່ດັດແປງສຳລັບ lysate ສະກັດກົດນິວຄລີອິກ.
ສ່ວນປະກອບຫຼັກຂອງອັນກ່ອນແມ່ນສານອາຫານພື້ນຖານ Eagle's basic culture medium (MEM) ຫຼືເກືອທີ່ສົມດຸນຂອງ Hank, ເຊິ່ງຖືກເພີ່ມດ້ວຍເກືອ, ກົດອະມິໂນ, ວິຕາມິນ, ນ້ຳຕານກລູໂຄສ ແລະ ໂປຣຕີນທີ່ຈຳເປັນສຳລັບການຢູ່ລອດຂອງໄວຣັດ. ນ້ຳຢາເກັບຮັກສານີ້ໃຊ້ເກືອ phenol red sodium ເປັນຕົວຊີ້ບອກ ແລະ ນ້ຳຢາ. ເມື່ອຄ່າ pH ເປັນ 6.6-8.0, ນ້ຳຢາຈະເປັນສີບົວ. ນ້ຳຕານກລູໂຄສ, L-glutamine ແລະ ໂປຣຕີນທີ່ຈຳເປັນຈະຖືກເພີ່ມເຂົ້າໃນນ້ຳຢາຮັກສາ. ໂປຣຕີນດັ່ງກ່າວຖືກສະໜອງໃຫ້ໃນຮູບແບບຂອງ serum ງົວໃນຕົວລູກໃນທ້ອງ ຫຼື albumin serum ງົວ, ເຊິ່ງສາມາດເຮັດໃຫ້ເປືອກໂປຣຕີນຂອງໄວຣັດມີຄວາມໝັ້ນຄົງ. ເນື່ອງຈາກວ່ານ້ຳຢາຮັກສາມີສານອາຫານຫຼາຍ, ມັນເອື້ອອຳນວຍຕໍ່ການຢູ່ລອດຂອງໄວຣັດ ແຕ່ຍັງເປັນປະໂຫຍດຕໍ່ການເຕີບໂຕຂອງເຊື້ອແບັກທີເຣຍ. ຖ້ານ້ຳຢາຮັກສາມີເຊື້ອແບັກທີເຣຍປົນເປື້ອນ, ມັນຈະເພີ່ມຂຶ້ນເປັນຈຳນວນຫຼວງຫຼາຍ. ຄາບອນໄດອອກໄຊໃນສານເມຕາໂບໄລຂອງມັນຈະເຮັດໃຫ້ pH ຂອງນ້ຳຢາຮັກສາຫຼຸດລົງຈາກສີບົວກາຍເປັນສີເຫຼືອງ. ດັ່ງນັ້ນ, ຜູ້ຜະລິດສ່ວນໃຫຍ່ໄດ້ເພີ່ມສ່ວນປະກອບຕ້ານເຊື້ອແບັກທີເຣຍໃສ່ໃນສູດຂອງພວກເຂົາ. ສານຕ້ານເຊື້ອແບັກທີເຣຍທີ່ແນະນຳແມ່ນເປນີຊີລິນ, ສະເຕຣບໂຕໄມຊິນ, ເຈນທາມິຊິນ ແລະ ໂພລີມິກຊິນ ບີ. ບໍ່ແນະນຳໃຫ້ໃຊ້ໂຊດຽມອາໄຊ ແລະ 2-ເມທິລ ຕົວຍັບຍັ້ງເຊັ່ນ 4-ເມທິລ-4-ໄອໂຊທີອາໂຊລິນ-3-ອອນ (MCI) ແລະ 5-ຄລໍໂຣ-2-ເມທິລ-4-ໄອໂຊທີອາໂຊລິນ-3-ອອນ (CMCI) ເພາະວ່າສ່ວນປະກອບເຫຼົ່ານີ້ມີຜົນກະທົບຕໍ່ປະຕິກິລິຍາ PCR. ເນື່ອງຈາກຕົວຢ່າງທີ່ສະໜອງໃຫ້ໂດຍນ້ຳຢາຮັກສານີ້ແມ່ນໄວຣັດທີ່ມີຊີວິດ, ຄວາມເປັນຕົ້ນສະບັບຂອງຕົວຢ່າງສາມາດຮັກສາໄດ້ໃນລະດັບສູງສຸດ, ແລະມັນສາມາດໃຊ້ບໍ່ພຽງແຕ່ສຳລັບການສະກັດ ແລະ ການກວດຫາກົດນິວຄລີອິກຂອງໄວຣັດເທົ່ານັ້ນ, ແຕ່ຍັງສຳລັບການເພາະລ້ຽງ ແລະ ການແຍກໄວຣັດອີກດ້ວຍ. ຢ່າງໃດກໍຕາມ, ຄວນສັງເກດວ່າເມື່ອໃຊ້ສຳລັບການກວດຫາ, ການສະກັດ ແລະ ການເຮັດໃຫ້ບໍລິສຸດຂອງກົດນິວຄລີອິກຕ້ອງໄດ້ປະຕິບັດຫຼັງຈາກການປິດການໃຊ້ງານ.
ນ້ຳຢາຮັກສາອີກຊະນິດໜຶ່ງທີ່ກະກຽມໂດຍອີງໃສ່ lysate ສະກັດຈາກກົດນິວຄລີອິກ, ສ່ວນປະກອບຫຼັກແມ່ນເກືອທີ່ສົມດຸນ, ຕົວແທນ EDTA chelating, ເກືອ guanidine (ເຊັ່ນ guanidine isothiocyanate, guanidine hydrochloride, ແລະອື່ນໆ), surfactant anionic (ເຊັ່ນ dodecane Sodium sulfate), surfactants cationic (ເຊັ່ນ tetradecyltrimethylammonium oxalate), phenol, 8-hydroxyquinoline, dithiothreitol (DTT), proteinase K ແລະສ່ວນປະກອບອື່ນໆ. ນ້ຳຢາເກັບຮັກສານີ້ແມ່ນເພື່ອຕັດໄວຣັດໂດຍກົງເພື່ອປ່ອຍກົດນິວຄລີອິກ ແລະ ກຳຈັດ RNase. ຖ້າໃຊ້ສຳລັບ RT-PCR ເທົ່ານັ້ນ, ມັນຈະເໝາະສົມກວ່າ, ແຕ່ lysate ສາມາດເຮັດໃຫ້ໄວຣັດບໍ່ເຮັດວຽກໄດ້. ຕົວຢ່າງປະເພດນີ້ບໍ່ສາມາດໃຊ້ສຳລັບການແຍກເຊື້ອໄວຣັດໄດ້.

ຕົວແທນຄີເລດໂລຫະໄອອອນທີ່ໃຊ້ໃນການລະລາຍຮັກສາໄວຣັດແມ່ນແນະນໍາໃຫ້ໃຊ້ເກືອ EDTA (ເຊັ່ນ: ກົດ dipotassium ethylenediaminetetraacetic, ກົດ disodium ethylenediaminetetraacetic, ແລະອື່ນໆ), ແລະມັນບໍ່ໄດ້ຖືກແນະນໍາໃຫ້ໃຊ້ heparin (ເຊັ່ນ: sodium heparin, lithium heparin), ເພື່ອບໍ່ໃຫ້ມີຜົນກະທົບຕໍ່ການກວດຫາ PCR.
3. ທໍ່ຮັກສາ: ຄວນເລືອກວັດສະດຸຂອງທໍ່ຮັກສາຢ່າງລະມັດລະວັງ. ມີຂໍ້ມູນທີ່ຊີ້ໃຫ້ເຫັນວ່າໂພລີໂພລີລີນ (Polypropylene) ກ່ຽວຂ້ອງກັບການດູດຊຶມຂອງກົດນິວເຄຼຍອິກ, ໂດຍສະເພາະຢູ່ທີ່ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຂອງໄອອອນຄວາມຕຶງຄຽດສູງ, ໂພລີເອທິລີນ (Polyethylene) ເປັນທີ່ນິຍົມຫຼາຍກວ່າໂພລີໂພລີລີນ (Polypropylene) ງ່າຍຕໍ່ການຈັບ DNA/RNA. ພາດສະຕິກໂພລີເອທິລີນ-ໂພລີພີລີນໂພລີເມີ (Polyallomer) ແລະພາຊະນະພາດສະຕິກໂພລີໂພລີລີນ (Polypropylene) ທີ່ຜ່ານການປຸງແຕ່ງພິເສດບາງຊະນິດແມ່ນເໝາະສົມກວ່າສຳລັບການເກັບຮັກສາ DNA/RNA. ນອກຈາກນັ້ນ, ເມື່ອໃຊ້ໄມ້ສຳລີທີ່ແຕກຫັກໄດ້, ທໍ່ເກັບຮັກສາຄວນພະຍາຍາມເລືອກພາຊະນະທີ່ມີຄວາມສູງຫຼາຍກວ່າ 8 ຊມ ເພື່ອປ້ອງກັນບໍ່ໃຫ້ເນື້ອໃນກະເດັນ ແລະ ປົນເປື້ອນເມື່ອໄມ້ສຳລີແຕກ.

4. ນ້ຳສຳລັບສານລະລາຍຮັກສາການຜະລິດ: ນ້ຳບໍລິສຸດພິເສດທີ່ໃຊ້ສຳລັບສານລະລາຍຮັກສາການຜະລິດຄວນໄດ້ຮັບການກັ່ນຕອງຜ່ານເຍື່ອກອງທີ່ມີນ້ຳໜັກໂມເລກຸນ 13,000 ເພື່ອຮັບປະກັນການກຳຈັດສິ່ງເຈືອປົນໂພລີເມີອອກຈາກແຫຼ່ງຊີວະພາບ ເຊັ່ນ RNase, DNase, ແລະ endotoxin, ແລະ ບໍ່ແນະນຳໃຫ້ໃຊ້ນ້ຳ ຫຼື ນ້ຳກັ່ນທຳມະດາ.

2. ການໃຊ້ທໍ່ເກັບຕົວຢ່າງໄວຣັດ

ການເກັບຕົວຢ່າງໂດຍໃຊ້ທໍ່ເກັບຕົວຢ່າງໄວຣັດສ່ວນໃຫຍ່ແມ່ນແບ່ງອອກເປັນການເກັບຕົວຢ່າງທາງປາກ ແລະ ການເກັບຕົວຢ່າງທາງດັງ:

1. ການເກັບຕົວຢ່າງທາງປາກຄໍ: ກ່ອນອື່ນໃຫ້ກົດລີ້ນດ້ວຍເຄື່ອງກົດລີ້ນ, ຈາກນັ້ນຢຽດຫົວຂອງຜ້າເຊັດຕົວຢ່າງເຂົ້າໄປໃນຄໍເພື່ອເຊັດຕ່ອມທອນຊິນຄໍທັງສອງຂ້າງ ແລະ ຝາຄໍດ້ານຫຼັງ, ແລະ ເຊັດຝາຄໍດ້ານຫຼັງດ້ວຍແຮງເບົາໆ, ຫຼີກລ່ຽງການສຳຜັດກັບສ່ວນລີ້ນ.

2. ການເກັບຕົວຢ່າງທາງດັງຄໍ: ໃຊ້ຜ້າເຊັດຕົວຢ່າງວັດແທກໄລຍະຫ່າງຈາກປາຍດັງຫາຕຸ່ມຫູ ແລະ ໝາຍດ້ວຍນິ້ວມື, ໃສ່ຜ້າເຊັດຕົວຢ່າງເຂົ້າໄປໃນຊ່ອງດັງໃນທິດທາງຂອງດັງຕັ້ງ (ໃບໜ້າ), ຜ້າເຊັດຕົວຢ່າງຄວນຍາວຢ່າງໜ້ອຍເຄິ່ງໜຶ່ງຂອງຕຸ່ມຫູຫາປາຍດັງ, ປະໄວ້ຜ້າເຊັດຕົວຢ່າງໄວ້ໃນດັງປະມານ 15-30 ວິນາທີ, ຄ່ອຍໆໝຸນ 3-5 ເທື່ອ, ແລະ ດຶງຜ້າເຊັດອອກ.
ມັນບໍ່ຍາກທີ່ຈະເບິ່ງຈາກວິທີການນໍາໃຊ້, ບໍ່ວ່າຈະເປັນຜ້າເຊັດປາກ ຫຼື ຜ້າເຊັດດັງ, ການເກັບຕົວຢ່າງແມ່ນວຽກງານດ້ານວິຊາການ, ເຊິ່ງມີຄວາມຫຍຸ້ງຍາກ ແລະ ມີການປົນເປື້ອນ. ຄຸນນະພາບຂອງຕົວຢ່າງທີ່ເກັບມາແມ່ນກ່ຽວຂ້ອງໂດຍກົງກັບການກວດຫາຕໍ່ມາ. ຖ້າຕົວຢ່າງທີ່ເກັບມາມີປະລິມານໄວຣັດຕໍ່າ, ງ່າຍທີ່ຈະເຮັດໃຫ້ເກີດຜົນກວດທີ່ບໍ່ຖືກຕ້ອງ, ຍາກທີ່ຈະຢືນຢັນການວິນິດໄສ.