1. Iwwer d'Hierstellung vu Virusprobenentnahmerréier
Virusprobenahmenröhrchen gehéieren zu Produkter fir medizinesch Geräter. Déi meescht inlännesch Hiersteller sinn no den éischtklassege Produkter registréiert, a wéineg Firmen sinn no den zweetklassege Produkter registréiert. Fir den Noutfallbedürfnisser vu Wuhan an anere Plazen gerecht ze ginn, hunn vill Firmen an der leschter Zäit den "Noutfallkanal" benotzt, "Ufro fir d'Erlaabnes fir d'éischt Klass ze kréien". D'Virusprobenahmenröhrchen besteet aus engem Probenahmenstäbchen, enger Viruskonservéierungsléisung an enger baussenzeger Verpackung. Well et keen eenheetleche nationale Standard oder Industriestandard gëtt, variéiere d'Produkter vu verschiddene Hiersteller staark.
1. Proufstäbchen: De Proufstäbchen ass a direkten Kontakt mat der Proufplaz, an d'Material vum Proufkapp hänkt enk mat der spéiderer Detektioun zesummen. De Proufstäbchenkapp soll aus Polyester (PE) synthetescher Faser oder Rayon (Kënschtlech Faser) gemaach sinn. Kalziumalginat-Schwamm oder Holzstäbchen (och Bambusstäbchen) kënnen net benotzt ginn, an d'Material vum Stäbchenkapp däerf net aus Kottengprodukter bestoen. Well d'Kottengfaser eng staark Adsorptioun vu Protein huet, ass et net einfach, se an déi spéider Lagerléisung ze eluéieren; a wann en Holzstäbchen oder Bambusstäbchen, deen Kalziumalginat an Holzkomponenten enthält, gebrach ass, wäert d'Aweiung an der Lagerléisung och Protein adsorbéieren, an et kann souguer déi spéider PCR-Reaktioun hemmen. Et ass recommandéiert, synthetesch Faseren wéi PE-Faser, Polyesterfaser a Polypropylenfaser als Material vum Stäbchenkapp ze benotzen. Natierlech Faseren wéi Kotteng sinn net recommandéiert. Nylonfasere sinn och net recommandéiert, well Nylonfaseren (ähnlech wéi Zännbürkskäpp) Waasser absorbéieren. Schlecht, wat zu engem net genuch Proufvolumen féiert, wat d'Detektiounsquote beaflosst. Kalziumalginat-Schwamm ass verbueden fir Stäbchenmaterial ze probéieren! Et ginn zwou Zorten Stäbchengrëffer: gebrach an agebaut. De gebrachene Stäbchen gëtt no der Proufnahme an d'Späicherröhrchen geluecht, an den Deckel vum Röhrchen gëtt gebrach, nodeems en vun der Positioun beim Proufnahmekapp gebrach gouf; de Stäbchen gëtt direkt no der Proufnahme an d'Späicherröhrchen gesat, an den Deckel vum Späicherröhrchen gëtt agebaut. Riicht dat klengt Lach mat der Spëtzt vum Grëff aus a zitt den Deckel vum Röhrchen fest. Am Verglach vun den zwou Methoden ass déi lescht relativ sécher. Wann de gebrachene Stäbchen zesumme mat engem méi klenge Späicherröhrchen benotzt gëtt, kann et zu Flëssegkeetssprëtzer am Röhrchen kommen, wann e gebrach ass, an et sollt voll Opmierksamkeet op de Risiko vun enger Kontaminatioun gezu ginn, déi duerch falsch Benotzung vum Produkt verursaacht gëtt. Et ass recommandéiert, huel Polystyrol (PS) extrudéiert Röhrchen oder Polypropylen (PP) Injektiounsfalzröhrchen als Material vum Stäbchengrëff ze benotzen. Egal wéi e Material benotzt gëtt, Kalziumalginat-Additiver kënnen net derbäigesat ginn; Holzstäbchen oder Bambusstäbchen. Kuerz gesot, de Proufnahmestäbchen soll d'Quantitéit vun der Proufnahme an d'Quantitéit vun der Fräisetzung garantéieren, an déi gewielte Materialien däerfen keng Substanzen enthalen, déi spéider Tester beaflossen.
2. Viruskonservéierungsléisung: Et ginn zwou Zorte vu Viruskonservéierungsléisungen, déi wäit verbreet um Maart sinn, eng ass eng Viruskonservéierungsléisung, déi op Basis vum Transportmedium modifizéiert ass, an déi aner ass eng modifizéiert Léisung fir Nukleinsäureextraktiounslysat.
Déi Haaptkomponent vun der éischter ass Eagle's basic culture medium (MEM) oder Hank's balanced salt, deem d'Salzer, Aminosaieren, Vitaminnen, Glukos a Protein bäigefüügt ginn, déi fir d'Iwwerliewe vum Virus néideg sinn. Dës Späicherléisung benotzt Phenolrout-Natriumsalz als Indikator a Léisung. Wann de pH-Wäert 6,6-8,0 ass, ass d'Léisung rosa. Déi néideg Glukos, L-Glutamin a Protein ginn an d'Konservéierungsléisung bäigefüügt. D'Protein gëtt a Form vu fetaltem Rinderserum oder Rinderseralbumin geliwwert, wat d'Proteinschuel vum Virus stabiliséiere kann. Well d'Konservéierungsléisung räich un Nährstoffer ass, ass se förderlech fir d'Iwwerliewe vum Virus, awer och gutt fir d'Wuesstum vu Bakterien. Wann d'Konservéierungsléisung mat Bakterien kontaminéiert ass, wäert se sech a grousse Quantitéiten multiplizéieren. De Kuelendioxid a senge Metabolitten féiert dozou, datt de pH-Wäert vun der Konservéierungsléisung vu rosa op giel fällt. Dofir hunn déi meescht Hiersteller antibakteriell Zutaten an hir Formuléierungen bäigefüügt. Déi recommandéiert antibakteriell Mëttel sinn Penicillin, Streptomycin, Gentamicin a Polymyxin B. Natriumazid an 2-Methyl ginn net recommandéiert. Inhibitoren wéi 4-Methyl-4-Isothiazolin-3-on (MCI) a 5-Chlor-2-Methyl-4-Isothiazolin-3-on (CMCI), well dës Komponenten en Afloss op d'PCR-Reaktioun hunn. Well d'Prouf, déi mat dëser Konservéierungsléisung geliwwert gëtt, am Fong e liewege Virus ass, kann d'Originalitéit vun der Prouf maximal erhale bleiwen, an si kann net nëmme fir d'Extraktioun an den Noweis vu Virusnukleinsäuren, mä och fir d'Kultivatioun an d'Isolatioun vu Virussen benotzt ginn. Et sollt awer bemierkt ginn, datt wann se fir den Noweis benotzt ginn, d'Nukleinsäureextraktioun an d'Reinigung no der Inaktivéierung duerchgefouert musse ginn.
Eng aner Zort Konservéierungsléisung, déi op Basis vun Nukleinsäure-Extraktiounslysat hiergestallt gëtt, besteet aus ausgeglachene Salzer, EDTA-Cheléierungsmëttel, Guanidinsalz (wéi Guanidinisothiocyanat, Guanidinhydrochlorid, etc.), anioneschen Tenside (wéi Dodecan-Natriumsulfat), kationeschen Tenside (wéi Tetradecyltrimethylammoniumoxalat), Phenol, 8-Hydroxychinolin, Dithiothreitol (DTT), Proteinase K an aner Komponenten. Dës Späicherléisung ass dofir geduecht, de Virus direkt ze spalten, fir d'Nukleinsäure fräizesetzen an d'RNase ze eliminéieren. Wann se nëmme fir RT-PCR benotzt gëtt, ass se méi gëeegent, awer de Lysat kann de Virus inaktivéieren. Dës Zort Prouf kann net fir d'Trennung vu Viruskulturen benotzt ginn.
Et ass recommandéiert, datt d'Metallionenchelatéierer, déi an der Viruskonservéierungsléisung benotzt ginn, EDTA-Salzer (wéi Dikaliumethylendiamintetraessigsäure, Dinatriumethylendiamintetraessigsäure, asw.) benotzen, an et ass net recommandéiert, Heparin (wéi Natriumheparin, Lithiumheparin) ze benotzen, fir d'PCR-Detektioun net ze beaflossen.
3. Konservéierungsröhrchen: D'Material vum Konservéierungsröhrchen soll suergfälteg ausgewielt ginn. Et gëtt Donnéeën, déi drop hiweisen, datt Polypropylen (Polypropylen) mat der Adsorptioun vun Nukleinsäure a Verbindung steet, besonnesch bei héijer Spannungsionenkonzentratioun. Polyethylen (Polyethylen) ass méi bevorzugt wéi Polypropylen (Polypropylen). Einfach ze gräifen DNA/RNA. Polyethylen-Propylenpolymer (Polyallomer) Plastik a verschidde speziell veraarbechte Polypropylen (Polypropylen) Plastikbehälter si méi gëeegent fir d'Lagerung vun DNA/RNA. Zousätzlech sollt een, wann een e bréchbare Stäbchen benotzt, probéieren, e Behälter mat enger Héicht vu méi wéi 8 cm ze wielen, fir ze verhënneren, datt den Inhalt sprëtzt a kontaminéiert gëtt, wann de Stäbchen gebrach ass.
4. Waasser fir d'Produktiounskonservéierungsléisung: Dat ultrareint Waasser, dat fir d'Produktiounskonservéierungsléisung benotzt gëtt, soll duerch eng Ultrafiltratiounsmembran mat engem Molekulargewiicht vun 13.000 gefiltert ginn, fir d'Entfernung vu Polymerverunreinheeten aus biologesche Quellen, wéi RNase, DNase an Endotoxin, ze garantéieren, an eng normal Reinigung ass net recommandéiert. Waasser oder destilléiert Waasser.
2. Benotzung vu Virusprobenentnahmer
D'Probenahme mat Hëllef vum Virusprobenahmeröhrchen gëtt haaptsächlech an oropharyngeal an nasopharyngeal Probenahme opgedeelt:
1. Oropharyngeal Proufnahme: Dréckt als éischt d'Zong mat der Zongenspatel, da streckt de Kapp vum Proufnahmestäbchen an den Hals fir déi bilateral Pharyngealmandelen an déi hënnescht Pharyngealwand ofzewëschen, an ofwëscht déi hënnescht Pharyngealwand mat liichter Kraaft, vermeit d'Zongunitéit ze beréieren.
2. Nasofaryngeal Proufnahme: Mooss den Ofstand vun der Nuesspëtz bis zum Ouerläppchen mat engem Stäbchen a markéier en mat engem Fanger. Füügt de Proufnahmestäbchen an d'Nues a Richtung vun der vertikaler Nues (Gesiicht) an. De Stäbchen soll op d'mannst d'Halschent vun der Ouerläppchen bis zur Nuesspëtzt erstrecken. Loosst de Stäbchen 15-30 Sekonnen an der Nues, dréit en virsiichteg 3-5 Mol a zitt de Stäbchen eraus.
Et ass net schwéier un der Benotzungsmethod ze gesinn, ob et sech ëm en oropharyngealen oder en nasopharyngealen Ofstouss handelt, d'Proufnahme ass eng technesch Aufgab, déi schwéier a kontaminéiert ass. D'Qualitéit vun der gesammelter Prouf hänkt direkt vun der spéiderer Detektioun of. Wann déi gesammelt Prouf eng niddreg viral Belaaschtung huet, ass et einfach falsch negativ Resultater ze verursaachen, an et ass schwéier d'Diagnos ze bestätegen.
Zäitpunkt vun der Verëffentlechung: 21. Juni 2020
