რამდენიმე მოსაზრება ვირუსის სინჯის აღების მილზე. ვირუსის სინჯის აღების მილის შესახებ.

1. ვირუსის სინჯის აღების მილების დამზადების შესახებ
ვირუსის სინჯის აღების მილი სამედიცინო მოწყობილობების პროდუქტებს მიეკუთვნება. ადგილობრივი მწარმოებლების უმეტესობა რეგისტრირებულია პირველი კლასის პროდუქციის მიხედვით და მხოლოდ რამდენიმე კომპანიაა რეგისტრირებული მეორე კლასის პროდუქციის მიხედვით. ბოლო დროს, უხანისა და სხვა ადგილების გადაუდებელი საჭიროებების დასაკმაყოფილებლად, ბევრმა კომპანიამ აირჩია „გადაუდებელი არხი“ - „მიმართეთ პირველი კლასის ჩანაწერის ნებართვის მისაღებად“. ვირუსის სინჯის აღების მილი შედგება სინჯის აღების ტამპონისგან, ვირუსის შესანახი ხსნარისა და გარე შეფუთვისგან. ვინაიდან არ არსებობს ერთიანი ეროვნული სტანდარტი ან ინდუსტრიის სტანდარტი, სხვადასხვა მწარმოებლის პროდუქცია მნიშვნელოვნად განსხვავდება.

1. ნიმუშის აღების ტამპონი: ნიმუშის ტამპონი პირდაპირ ეხება ნიმუშის აღების ადგილს და ნიმუშის თავის მასალა მჭიდრო კავშირშია შემდგომ აღმოჩენასთან. ნიმუშის ტამპონის თავი უნდა იყოს დამზადებული პოლიესტერის (PE) სინთეტიკური ბოჭკოსგან ან რაიონისგან (ხელოვნური ბოჭკო). კალციუმის ალგინატის ღრუბლის ან ხის ჩხირების ტამპონის (მათ შორის ბამბუკის ჩხირების) გამოყენება არ შეიძლება და ტამპონის თავის მასალისგან არ შეიძლება ბამბის ნაწარმი. რადგან ბამბის ბოჭკოს აქვს ცილის ძლიერი ადსორბცია, მისი შემდგომი შენახვის ხსნარში გამოყოფა ადვილი არ არის; და როდესაც კალციუმის ალგინატის და ხის კომპონენტების შემცველი ხის ჩხირი ან ბამბუკის ჩხირი გატეხილია, შესანახ ხსნარში დალბობა ასევე შეიწოვს ცილას და შეიძლება შეაფერხოს შემდგომი PCR რეაქცია. ტამპონის თავის მასალისთვის რეკომენდებულია სინთეტიკური ბოჭკოების, როგორიცაა PE ბოჭკო, პოლიესტერის ბოჭკო და პოლიპროპილენის ბოჭკოების გამოყენება. ბუნებრივი ბოჭკოების, როგორიცაა ბამბა, გამოყენება არ არის რეკომენდებული. ნეილონის ბოჭკოების გამოყენება ასევე არ არის რეკომენდებული, რადგან ნეილონის ბოჭკოები (კბილის ჯაგრისის თავების მსგავსი) შთანთქავენ წყალს. ცუდია, რაც იწვევს ნიმუშის არასაკმარის მოცულობას, რაც გავლენას ახდენს აღმოჩენის სიჩქარეზე. კალციუმის ალგინატის ღრუბელი აკრძალულია ტამპონის მასალის ასაღებად! ტამპონის სახელური ორი ტიპისაა: გატეხილი და ჩაშენებული. გატეხილი ტამპონი ნიმუშის აღების შემდეგ თავსდება შესანახ მილში და მილის თავსახური ტყდება ნიმუშის აღების თავთან ახლოს მდებარე პოზიციიდან გატეხვის შემდეგ; ჩაშენებული ტამპონი ნიმუშის აღების შემდეგ პირდაპირ ათავსებს ნიმუშის აღების ტამპონს შესანახ მილში და შესანახი მილის საფარი ჩაშენებულია. პატარა ნახვრეტი სახელურის ზედა ნაწილთან გაასწორეთ და მილის საფარი მოუჭირეთ. ორი მეთოდის შედარებისას, ეს უკანასკნელი შედარებით უსაფრთხოა. როდესაც გატეხილი ტამპონი გამოიყენება უფრო პატარა ზომის შესანახ მილთან ერთად, გატეხვის შემთხვევაში შეიძლება მილში სითხის შხეფება გამოიწვიოს და სრული ყურადღება უნდა მიექცეს პროდუქტის არასათანადო გამოყენებით გამოწვეულ დაბინძურების რისკს. ტამპონის სახელურის მასალისთვის რეკომენდებულია ღრუ პოლისტიროლის (PS) ექსტრუდირებული მილის ან პოლიპროპილენის (PP) ინექციური დასაკეცი მილის გამოყენება. გამოყენებული მასალის მიუხედავად, კალციუმის ალგინატის დანამატების დამატება არ შეიძლება; ხის ჩხირები ან ბამბუკის ჩხირები. მოკლედ, ნიმუშის ტამპონმა უნდა უზრუნველყოს ნიმუშის აღების და გამოყოფის რაოდენობა და შერჩეულ მასალებს არ უნდა ჰქონდეს ნივთიერებები, რომლებიც გავლენას ახდენს შემდგომ ტესტირებაზე.

2. ვირუსის შენარჩუნების ხსნარი: ბაზარზე ფართოდ გამოიყენება ვირუსის შენარჩუნების ორი სახის ხსნარი, ერთი არის ტრანსპორტირების გარემოზე მოდიფიცირებული ვირუსის შენარჩუნების ხსნარი, ხოლო მეორე არის ნუკლეინის მჟავას ექსტრაქციის ლიზატის მოდიფიცირებული ხსნარი.
პირველის მთავარი კომპონენტია Eagle-ის ძირითადი კულტურული საშუალება (MEM) ან ჰენკის დაბალანსებული მარილი, რომელსაც ემატება ვირუსის გადარჩენისთვის აუცილებელი მარილები, ამინომჟავები, ვიტამინები, გლუკოზა და ცილა. ეს შესანახი ხსნარი იყენებს ფენოლის წითელ ნატრიუმის მარილს, როგორც ინდიკატორს და ხსნარს. როდესაც pH მნიშვნელობა 6.6-8.0-ია, ხსნარი ვარდისფერია. კონსერვაციის ხსნარს ემატება საჭირო გლუკოზა, L-გლუტამინი და ცილა. ცილა მოწოდებულია ნაყოფის ძროხის შრატის ან ძროხის შრატის ალბუმინის სახით, რომელსაც შეუძლია ვირუსის ცილოვანი გარსის სტაბილიზაცია. რადგან კონსერვაციის ხსნარი მდიდარია საკვები ნივთიერებებით, ის ხელს უწყობს ვირუსის გადარჩენას, მაგრამ ასევე სასარგებლოა ბაქტერიების ზრდისთვის. თუ კონსერვაციის ხსნარი დაბინძურებულია ბაქტერიებით, ის დიდი რაოდენობით გამრავლდება. მის მეტაბოლიტებში შემავალი ნახშირორჟანგი გამოიწვევს კონსერვაციის ხსნარის pH-ის შემცირებას ვარდისფერიდან ყვითელ ფერამდე. ამიტომ, მწარმოებლების უმეტესობამ თავის ფორმულირებებს ანტიბაქტერიული ინგრედიენტები დაამატა. რეკომენდებული ანტიბაქტერიული საშუალებებია პენიცილინი, სტრეპტომიცინი, გენტამიცინი და პოლიმიქსინ B. ნატრიუმის აზიდი და 2-მეთილი არ არის რეკომენდებული ისეთი ინჰიბიტორებისთვის, როგორიცაა 4-მეთილ-4-იზოთიაზოლინ-3-ონი (MCI) და 5-ქლორ-2-მეთილ-4-იზოთიაზოლინ-3-ონი (CMCI), რადგან ეს კომპონენტები გავლენას ახდენენ PCR რეაქციაზე. ვინაიდან ამ კონსერვაციული ხსნარით მოწოდებული ნიმუში ძირითადად ცოცხალი ვირუსია, ნიმუშის ორიგინალურობის მაქსიმალურად შენარჩუნება შესაძლებელია და მისი გამოყენება შესაძლებელია არა მხოლოდ ვირუსის ნუკლეინის მჟავების ექსტრაქციისა და აღმოჩენისთვის, არამედ ვირუსების კულტივაციისა და იზოლაციისთვისაც. თუმცა, უნდა აღინიშნოს, რომ დეტექტირებისთვის გამოყენებისას, ნუკლეინის მჟავის ექსტრაქცია და გაწმენდა უნდა განხორციელდეს ინაქტივაციის შემდეგ.
ნუკლეინის მჟავას ექსტრაქციის ლიზატის საფუძველზე მომზადებული კონსერვაციული ხსნარის კიდევ ერთი სახეობაა, რომლის ძირითადი კომპონენტებია დაბალანსებული მარილები, EDTA ხელატური აგენტი, გუანიდინის მარილი (მაგალითად, გუანიდინის იზოთიოციანატი, გუანიდინის ჰიდროქლორიდი და ა.შ.), ანიონური ზედაპირულად აქტიური ნივთიერება (მაგალითად, დოდეკანის ნატრიუმის სულფატი), კათიონური ზედაპირულად აქტიური ნივთიერებები (მაგალითად, ტეტრადეცილტრიმეთილამონიუმის ოქსალატი), ფენოლი, 8-ჰიდროქსიქინოლინი, დითიოთრეიტოლი (DTT), პროტეინაზა K და სხვა კომპონენტები. ეს შესანახი ხსნარი განკუთვნილია ვირუსის პირდაპირ დასაშლელად, ნუკლეინის მჟავის გამოსათავისუფლებლად და RNase-ის აღმოსაფხვრელად. თუ გამოიყენება მხოლოდ RT-PCR-ისთვის, ის უფრო შესაფერისია, მაგრამ ლიზატს შეუძლია ვირუსის ინაქტივაცია. ამ ტიპის ნიმუშის გამოყენება ვირუსული კულტურის გამოყოფისთვის არ შეიძლება.

ვირუსის კონსერვაციის ხსნარში გამოყენებული ლითონის იონების ხელატირების აგენტისთვის რეკომენდებულია EDTA მარილების გამოყენება (მაგალითად, დიკალიუმის ეთილენდიამინტეტრაძმარმჟავა, დინატრიუმის ეთილენდიამინტეტრაძმარმჟავა და ა.შ.) და არ არის რეკომენდებული ჰეპარინის (მაგალითად, ნატრიუმის ჰეპარინის, ლითიუმის ჰეპარინის) გამოყენება, რათა არ იმოქმედოს PCR გამოვლენაზე.
3. კონსერვაციის მილი: კონსერვაციის მილისთვის მასალა ფრთხილად უნდა შეირჩეს. არსებობს მონაცემები, რომლებიც მიუთითებს, რომ პოლიპროპილენი (პოლიპროპილენი) დაკავშირებულია ნუკლეინის მჟავას ადსორბციასთან, განსაკუთრებით მაღალი დაძაბულობის იონების კონცენტრაციისას. პოლიეთილენი (პოლიეთილენი) უფრო სასურველია, ვიდრე პოლიპროპილენი (პოლიპროპილენი). ადვილად აღსაქმელი დნმ/რნმ. პოლიეთილენ-პროპილენის პოლიმერის (პოლიალომერი) პლასტმასი და ზოგიერთი სპეციალურად დამუშავებული პოლიპროპილენის (პოლიპროპილენი) პლასტმასის კონტეინერი უფრო შესაფერისია დნმ/რნმ-ის შესანახად. გარდა ამისა, მსხვრევადი ტამპონის გამოყენებისას, შესანახი მილი უნდა ცდილობდეს 8 სმ-ზე მეტი სიმაღლის კონტეინერის შერჩევას, რათა ტამპონის გატეხვისას შიგთავსი არ დაღვრილა და არ დაბინძურდეს.

4. წყალი წარმოების კონსერვაციის ხსნარისთვის: წარმოების კონსერვაციის ხსნარისთვის გამოყენებული ულტრასუფთა წყალი უნდა გაიფილტროს ულტრაფილტრაციის მემბრანის მეშვეობით, რომლის მოლეკულური წონაა 13,000, რათა უზრუნველყოფილი იყოს პოლიმერული მინარევების მოცილება ბიოლოგიური წყაროებიდან, როგორიცაა RNase, DNase და ენდოტოქსინი, და ჩვეულებრივი გაწმენდა არ არის რეკომენდებული. წყალი ან გამოხდილი წყალი.

2. ვირუსის სინჯის აღების მილების გამოყენება

ვირუსის სინჯის აღების მილის გამოყენებით სინჯის აღება ძირითადად იყოფა ოროფარინგეალურ და ცხვირ-ხახის სინჯებად:

1. ოროფარინგეალური ნიმუშის აღება: პირველ რიგში, ენის დეპრესორით დააჭირეთ ენას, შემდეგ ნიმუშის აღების ტამპონის თავი ყელში გაატარეთ ორმხრივი ფარინგეალური ნუშურების და ფარინგეალური კედლის გასაწმენდად და მსუბუქი ძალით გაწმინდეთ ფარინგეალური კედელი, მოერიდეთ ენის ბლოკთან შეხებას.

2. ცხვირ-ხახის ნიმუშის აღება: ტამპონით გაზომეთ მანძილი ცხვირის წვერიდან ყურის ბიბილომდე და თითით მონიშნეთ, ნიმუშის ტამპონი ცხვირის ღრუში მოათავსეთ ვერტიკალური ცხვირის (სახის) მიმართულებით, ტამპონი ყურის ბიბილოს სიგრძის მინიმუმ ნახევრის სიგრძის უნდა იყოს ცხვირის წვერამდე. ტამპონი ცხვირში 15-30 წამის განმავლობაში გააჩერეთ, ფრთხილად შემოატრიალეთ 3-5-ჯერ და ამოიღეთ ტამპონი.
გამოყენების მეთოდიდან ძნელი მისახვედრი არ არის, ოროფარინგეალური თუ ცხვირ-ხახის ნაცხის აღება ტექნიკური ამოცანაა, რაც რთული და დაბინძურებულია. შეგროვებული ნიმუშის ხარისხი პირდაპირ კავშირშია შემდგომ აღმოჩენასთან. თუ შეგროვებულ ნიმუშს დაბალი ვირუსული დატვირთვა აქვს, ადვილია ცრუ უარყოფითი შედეგის გამოწვევა, რაც ართულებს დიაგნოზის დადასტურებას.