1. Babagan pabrikasi tabung sampling virus
Tabung sampling virus kalebu produk piranti medis. Umume produsen domestik kadhaptar miturut produk kelas siji, lan sawetara perusahaan sing kadhaptar miturut produk kelas loro. Bubar iki, kanggo nyukupi kabutuhan darurat Wuhan lan papan liya, akeh perusahaan sing njupuk "saluran darurat" "Njaluk ijin rekam kelas siji". Tabung sampling virus kasusun saka swab sampling, larutan pengawetan virus, lan kemasan njaba. Amarga ora ana standar nasional utawa standar industri sing terpadu, produk saka macem-macem produsen beda-beda banget.
1. Swab sampling: Swab sampling langsung kontak karo lokasi sampling, lan bahan endhas sampling raket banget karo deteksi sabanjure. Endhas swab sampling kudu digawe saka serat sintetis Poliester (PE) utawa Rayon (serat buatan). Spons kalsium alginat utawa swab kayu (kalebu endhas pring) ora bisa digunakake, lan bahan endhas swab ora bisa digawe saka produk katun. Amarga serat katun nduweni adsorpsi protein sing kuwat, ora gampang dielusi menyang larutan panyimpenan sabanjure; lan nalika endhas kayu utawa endhas pring sing ngemot kalsium alginat lan komponen kayu rusak, rendhem ing larutan panyimpenan uga bakal nyerep protein, lan malah bisa nyegah reaksi PCR sabanjure. Disaranake nggunakake serat sintetis kayata serat PE, serat poliester lan serat polipropilen kanggo bahan endhas swab. Serat alami kayata katun ora disaranake. Serat nilon uga ora disaranake amarga serat nilon (padha karo endhas sikat untu) nyerep banyu. Ala, nyebabake volume sampling ora cukup, sing mengaruhi tingkat deteksi. Spons kalsium alginat dilarang kanggo bahan swab sampling! Gagang swab duwe rong jinis: rusak lan built-in. Swab sing rusak dilebokake ing tabung panyimpenan sawise sampling, lan tutup tabung dipecah sawise dipecah saka posisi cedhak endhas sampling; swab sing wis dipasang langsung nyelehake swab sampling menyang tabung panyimpenan sawise sampling, lan tutup tabung panyimpenan dibangun ing Sejajarkan bolongan cilik karo sisih ndhuwur gagang lan kencengake tutup tabung. Mbandhingake rong cara kasebut, sing terakhir relatif aman. Nalika swab sing rusak digunakake bebarengan karo tabung panyimpenan ukuran sing luwih cilik, bisa nyebabake cipratan cairan ing tabung nalika rusak, lan perhatian lengkap kudu diwenehake marang risiko kontaminasi sing disebabake dening panggunaan produk sing ora bener. Disaranake nggunakake tabung ekstrusi polistirena (PS) berongga utawa tabung lipatan injeksi polipropilena (PP) kanggo bahan gagang swab. Ora preduli bahan apa sing digunakake, aditif kalsium alginat ora bisa ditambahake; batang kayu utawa batang pring. Cekakipun, swab sampling kudu njamin jumlah sampling lan jumlah pelepasan, lan bahan sing dipilih ora kena duwe zat sing mengaruhi pengujian sabanjure.
2. Solusi pengawetan virus: Ana rong jinis solusi pengawetan virus sing akeh digunakake ing pasar, siji yaiku solusi pangopènan virus sing dimodifikasi adhedhasar medium transportasi, lan liyane yaiku solusi sing dimodifikasi kanggo lisat ekstraksi asam nukleat.
Komponen utama saka sing pertama yaiku medium kultur dhasar Eagle (MEM) utawa uyah seimbang Hank, sing ditambahake karo uyah, asam amino, vitamin, glukosa lan protein sing dibutuhake kanggo kaslametané virus. Larutan panyimpenan iki nggunakake uyah natrium fenol abang minangka indikator lan larutan. Nalika nilai pH 6,6-8,0, larutan kasebut wernane jambon. Glukosa, L-glutamin lan protein sing dibutuhake ditambahake menyang larutan pengawetan. Protein kasebut diwenehake ing bentuk serum sapi janin utawa albumin serum sapi, sing bisa nyetabilake cangkang protein virus. Amarga larutan pengawetan sugih nutrisi, iki kondusif kanggo kaslametané virus nanging uga migunani kanggo tuwuhing bakteri. Yen larutan pengawetan tercemar bakteri, bakal berkembang biak kanthi jumlah akeh. Karbon dioksida ing metabolite bakal nyebabake pH larutan pengawetan mudhun saka jambon dadi kuning. Mulane, umume produsen wis nambahake bahan antibakteri menyang formulasi. Agen antibakteri sing disaranake yaiku penisilin, streptomisin, gentamisin lan polimiksin B. Natrium azida lan 2-metil ora disaranake. Inhibitor kayata 4-metil-4-isotiazolin-3-one (MCI) lan 5-kloro-2-metil-4-isotiazolin-3-one (CMCI) amarga komponen kasebut duwe pengaruh marang reaksi PCR. Amarga sampel sing diwenehake dening larutan pengawetan iki sejatine virus urip, keaslian sampel bisa dijaga kanthi maksimal, lan bisa digunakake ora mung kanggo ekstraksi lan deteksi asam nukleat virus, nanging uga kanggo budidaya lan isolasi virus. Nanging, kudu dicathet yen nalika digunakake kanggo deteksi, ekstraksi lan pemurnian asam nukleat kudu ditindakake sawise inaktivasi.
Larutan pengawet liyané sing disiapake adhedhasar lisat ekstraksi asam nukleat, komponen utama yaiku uyah sing seimbang, agen pengkelat EDTA, uyah guanidin (kayata guanidin isotiosianat, guanidin hidroklorida, lan liya-liyane), surfaktan anionik (kayata dodekana Natrium sulfat), surfaktan kationik (kayata tetradesiltrimetilamonium oksalat), fenol, 8-hidroksikuinolin, ditiotreitol (DTT), proteinase K lan komponen liyane. Larutan panyimpenan iki kanggo mbelah virus kanthi langsung kanggo ngeculake asam nukleat lan ngilangi RNase. Yen mung digunakake kanggo RT-PCR, luwih cocog, nanging lisat bisa ngnonaktifake virus. Sampel jinis iki ora bisa digunakake kanggo pamisahan kultur virus.
Agen pengkelat ion logam sing digunakake ing larutan pengawetan virus dianjurake nggunakake uyah EDTA (kayata asam dipotassium ethylenediaminetetraacetic, asam disodium ethylenediaminetetraacetic, lan liya-liyane), lan ora disaranake nggunakake heparin (kayata natrium heparin, lithium heparin), supaya ora mengaruhi deteksi PCR.
3. Tabung pengawet: Bahan tabung pengawet kudu dipilih kanthi teliti. Ana data sing nuduhake yen polipropilena (Polypropylene) ana hubungane karo adsorpsi asam nukleat, utamane ing konsentrasi ion tegangan dhuwur, polietilena (Polyethylene) luwih disenengi tinimbang polipropilena (Polypropylene). DNA/RNA sing gampang dicekel. Plastik polimer polietilena-propilena (Polyallomer) lan sawetara wadhah plastik polipropilena (Polypropylene) sing diproses khusus luwih cocog kanggo panyimpenan DNA/RNA. Kajaba iku, nalika nggunakake swab sing gampang pecah, tabung panyimpenan kudu nyoba milih wadhah kanthi dhuwur luwih saka 8 cm kanggo nyegah isine cipratan lan kontaminasi nalika swab rusak.
4. Banyu kanggo larutan pengawetan produksi: Banyu ultra murni sing digunakake kanggo larutan pengawetan produksi kudu disaring liwat membran ultrafiltrasi kanthi bobot molekul 13.000 kanggo njamin penghapusan rereged polimer saka sumber biologis, kayata RNase, DNase, lan endotoksin, lan pemurnian biasa ora disaranake. Banyu utawa banyu suling.
2. Panggunaan tabung sampling virus
Pengambilan sampel nggunakake tabung pengambilan sampel virus utamane dipérang dadi pengambilan sampel orofaring lan pengambilan sampel nasofaring:
1. Pengambilan sampel orofaringeal: Pencet ilat nganggo penekan ilat, banjur julurake endhas swab sampling menyang tenggorokan kanggo ngusap amandel faring bilateral lan dinding faring posterior, lan usap dinding faring posterior kanthi kekuwatan entheng, aja nganti ndemek unit ilat.
2. Pengambilan sampel nasofaring: ukur jarak saka pucuk irung menyang cuping kuping nganggo swab lan tandhani nganggo driji, lebokake swab sampling menyang rongga irung ing arah irung vertikal (rai), swab kudu dawane paling ora setengah dawa cuping kuping nganti pucuk irung, Lebokake swab ing irung sajrone 15-30 detik, puter alon-alon kaping 3-5, lan copot swab kasebut.
Ora angel dideleng saka cara panggunaan, apa iku swab orofaring utawa nasofaring, sampling minangka tugas teknis, sing angel lan terkontaminasi. Kualitas sampel sing diklumpukake ana hubungane langsung karo deteksi sabanjure. Yen sampel sing diklumpukake duwe viral load Rendah, gampang nyebabake negatif palsu, angel ngonfirmasi diagnosis.
Wektu kiriman: 21 Juni 2020
