Մի քանի մտքեր վիրուսի նմուշառման խողովակի վերաբերյալ

1. Վիրուսի նմուշառման խողովակների արտադրության մասին
Վիրուսի նմուշառման խողովակները պատկանում են բժշկական սարքավորումների արտադրանքին: Տեղական արտադրողների մեծ մասը գրանցված է առաջին դասի արտադրանքի համար, և մի քանի ընկերություններ են գրանցված երկրորդ դասի արտադրանքի համար: Վերջերս, Ուհանի և այլ վայրերի արտակարգ կարիքները բավարարելու համար, շատ ընկերություններ ընտրել են «արտակարգ իրավիճակների ալիքը»՝ «դիմել առաջին դասի գրանցման թույլտվության համար»: Վիրուսի նմուշառման խողովակը բաղկացած է նմուշառման շվաբրից, վիրուսի պահպանման լուծույթից և արտաքին փաթեթավորումից: Քանի որ չկա միասնական ազգային ստանդարտ կամ արդյունաբերական ստանդարտ, տարբեր արտադրողների արտադրանքը մեծապես տարբերվում է:

1. Նմուշառման փայտիկ. Նմուշառման փայտիկը անմիջապես շփվում է նմուշառման տեղամասի հետ, և նմուշառման գլխիկի նյութը սերտորեն կապված է հետագա հայտնաբերման հետ: Նմուշառման փայտիկի գլխիկը պետք է պատրաստված լինի պոլիեսթերային (PE) սինթետիկ մանրաթելից կամ արհեստական մազաթելից: Կալցիումի ալգինատային սպունգ կամ փայտե փայտիկներ (ներառյալ բամբուկե փայտիկները) չեն կարող օգտագործվել, և փայտիկի գլխիկի նյութը չի կարող լինել բամբակյա արտադրանք: Քանի որ բամբակյա մանրաթելն ունի սպիտակուցի ուժեղ ադսորբցիա, այն հեշտ չէ էլուացնել հետագա պահեստավորման լուծույթի մեջ. և երբ կալցիումի ալգինատ և փայտե բաղադրիչներ պարունակող փայտե կամ բամբուկե փայտիկը կոտրված է, պահեստավորման լուծույթում թրջելը նույնպես կներծծի սպիտակուցը և նույնիսկ կարող է խոչընդոտել հետագա ՊՇՌ ռեակցիան: Խորհուրդ է տրվում փայտիկի գլխիկի նյութի համար օգտագործել սինթետիկ մանրաթելեր, ինչպիսիք են PE մանրաթելը, պոլիեսթեր մանրաթելը և պոլիպրոպիլենային մանրաթելը: Բնական մանրաթելերը, ինչպիսիք են բամբակը, խորհուրդ չեն տրվում: Նեյլոնե մանրաթելերը նույնպես խորհուրդ չեն տրվում, քանի որ նեյլոնե մանրաթելերը (նման են ատամի խոզանակի գլխիկներին) կլանում են ջուրը: Վատ են, ինչը հանգեցնում է նմուշառման անբավարար ծավալի, ինչը ազդում է հայտնաբերման արագության վրա: Կալցիումի ալգինատային սպունգը արգելված է փայտիկի նյութի նմուշառման համար: Փամփուշտի բռնակը լինում է երկու տեսակի՝ կոտրված և ներկառուցված: Կոտրված շամպունը նմուշառումից հետո տեղադրվում է պահեստավորման խողովակի մեջ, և խողովակի կափարիչը կոտրվում է նմուշառման գլխիկի մոտ գտնվող դիրքից կոտրվելուց հետո։ Ներկառուցված շամպունը նմուշառումից հետո նմուշառման շամպունը ուղղակիորեն տեղադրում է պահեստավորման խողովակի մեջ, և պահեստավորման խողովակի կափարիչը ներկառուցվում է։ Հարթեցրեք փոքր անցքը բռնակի վերին մասի հետ և ամրացրեք խողովակի կափարիչը։ Համեմատելով երկու մեթոդները, վերջինս համեմատաբար անվտանգ է։ Երբ կոտրված շամպունն օգտագործվում է ավելի փոքր չափի պահեստավորման խողովակի հետ համատեղ, կոտրվելիս կարող է հեղուկի ցայտք առաջացնել խողովակի մեջ, և պետք է լիարժեք ուշադրություն դարձնել արտադրանքի ոչ պատշաճ օգտագործման հետևանքով առաջացող աղտոտման ռիսկին։ Շամպունի բռնակի նյութի համար խորհուրդ է տրվում օգտագործել խոռոչ պոլիստիրոլային (PS) էքստրուդացված խողովակ կամ պոլիպրոպիլենային (PP) ներարկման ծալքավոր խողովակ։ Անկախ օգտագործվող նյութից, կալցիումի ալգինատի հավելանյութեր չեն կարող ավելացվել՝ փայտե ձողիկներ կամ բամբուկե ձողիկներ։ Ամփոփելով՝ նմուշառման շամպունը պետք է ապահովի նմուշառման և արտանետման քանակը, և ընտրված նյութերը չպետք է պարունակեն նյութեր, որոնք ազդում են հետագա փորձարկման վրա։

2. Վիրուսի պահպանման լուծույթ. Շուկայում լայնորեն օգտագործվում են վիրուսի պահպանման երկու տեսակի լուծույթներ՝ մեկը վիրուսի պահպանման լուծույթ է, որը մոդիֆիկացված է փոխադրման միջավայրի հիման վրա, իսկ մյուսը՝ նուկլեինաթթվի լիզատի արդյունահանման համար նախատեսված մոդիֆիկացված լուծույթ։
Առաջինի հիմնական բաղադրիչը Իգլի հիմնական կուլտուրայի միջավայրն է (MEM) կամ Հենքի հավասարակշռված աղը, որին ավելացվում են վիրուսի գոյատևման համար անհրաժեշտ աղերը, ամինաթթուները, վիտամինները, գլյուկոզը և սպիտակուցը: Այս պահպանման լուծույթն օգտագործում է ֆենոլային կարմիր նատրիումի աղը որպես ինդիկատոր և լուծույթ: Երբ pH-ի արժեքը 6.6-8.0 է, լուծույթը վարդագույն է: Պահպանման լուծույթին ավելացվում են անհրաժեշտ գլյուկոզը, L-գլյուտամինը և սպիտակուցը: Սպիտակուցը տրամադրվում է խոշոր եղջերավոր անասունների շիճուկի կամ խոշոր եղջերավոր անասունների շիճուկի ալբումինի տեսքով, որը կարող է կայունացնել վիրուսի սպիտակուցային թաղանթը: Քանի որ պահպանման լուծույթը հարուստ է սննդարար նյութերով, այն նպաստում է վիրուսի գոյատևմանը, բայց նաև օգտակար է մանրէների աճի համար: Եթե պահպանման լուծույթը աղտոտված է մանրէներով, այն կբազմապատկվի մեծ քանակությամբ: Դրա մետաբոլիտներում պարունակվող ածխաթթու գազը կհանգեցնի պահպանման լուծույթի pH-ի անկմանը՝ վարդագույնից դառնալով դեղին: Հետևաբար, արտադրողների մեծ մասը իրենց բանաձևերին ավելացրել է հակաբակտերիալ բաղադրիչներ: Առաջարկվող հակաբակտերիալ միջոցներն են պենիցիլինը, ստրեպտոմիցինը, գենտամիցինը և պոլիմիքսին B-ն: Նատրիումի ազիդը և 2-մեթիլը խորհուրդ չեն տրվում այնպիսի ինհիբիտորների համար, ինչպիսիք են 4-մեթիլ-4-իզոթիազոլին-3-ոնը (MCI) և 5-քլոր-2-մեթիլ-4-իզոթիազոլին-3-ոնը (CMCI), քանի որ այս բաղադրիչները ազդեցություն ունեն ՊՇՌ ռեակցիայի վրա: Քանի որ այս պահպանման լուծույթով տրամադրված նմուշը հիմնականում կենդանի վիրուս է, նմուշի ինքնատիպությունը կարող է պահպանվել առավելագույն չափով, և այն կարող է օգտագործվել ոչ միայն վիրուսային նուկլեինաթթուների արդյունահանման և հայտնաբերման, այլև վիրուսների մշակման և մեկուսացման համար: Այնուամենայնիվ, պետք է նշել, որ հայտնաբերման համար օգտագործվելիս նուկլեինաթթվի արդյունահանումը և մաքրումը պետք է իրականացվեն ապաակտիվացումից հետո:
Պահպանման լուծույթի մեկ այլ տեսակ է նուկլեինաթթվի արդյունահանման լիզատի հիման վրա պատրաստվածը, որի հիմնական բաղադրիչներն են՝ հավասարակշռված աղերը, EDTA քելացնող նյութը, գուանիդինի աղը (օրինակ՝ գուանիդինի իզոտիոցիանատ, գուանիդինի հիդրոքլորիդ և այլն), անիոնային մակերևութային ակտիվ նյութը (օրինակ՝ դոդեկան նատրիումի սուլֆատ), կատիոնային մակերևութային ակտիվ նյութերը (օրինակ՝ տետրադեցիլտրիմեթիլամոնիումի օքսալատ), ֆենոլը, 8-հիդրօքսիխինոլինը, դիթիոթրեիտոլը (DTT), պրոտեինազ K-ն և այլ բաղադրիչներ: Այս պահպանման լուծույթը նախատեսված է վիրուսը ուղղակիորեն կտրելու համար՝ նուկլեինաթթուն արտազատելու և RNase-ը վերացնելու համար: Ավելի հարմար է, եթե այն օգտագործվում է միայն RT-PCR-ի համար, սակայն լիզատը կարող է ապաակտիվացնել վիրուսը: Այս տեսակի նմուշը չի կարող օգտագործվել վիրուսային կուլտուրայի բաժանման համար:

Վիրուսի պահպանման լուծույթում օգտագործվող մետաղական իոնային քելացնող նյութի համար խորհուրդ է տրվում օգտագործել EDTA աղեր (օրինակ՝ երկկալիումի էթիլենդիամինտետրաքացախաթթու, երկնատրիումի էթիլենդիամինտետրաքացախաթթու և այլն), և խորհուրդ չի տրվում օգտագործել հեպարին (օրինակ՝ նատրիումի հեպարին, լիթիումի հեպարին), որպեսզի չազդի ՊՇՌ հայտնաբերման վրա։
3. Պահպանման խողովակ. Պահպանման խողովակի նյութը պետք է ուշադիր ընտրվի: Կան տվյալներ, որոնք ենթադրում են, որ պոլիպրոպիլենը (պոլիպրոպիլեն) կապված է նուկլեինաթթվի ադսորբցիայի հետ, հատկապես բարձր լարվածության իոնների կոնցենտրացիայի դեպքում, պոլիէթիլենը (պոլիէթիլեն) ավելի նախընտրելի է, քան պոլիպրոպիլենը (պոլիպրոպիլեն): Հեշտ է ընկալել ԴՆԹ/ՌՆԹ: Պոլիէթիլեն-պրոպիլենային պոլիմերային (պոլիալոմեր) պլաստիկը և որոշ հատուկ մշակված պոլիպրոպիլենային (պոլիպրոպիլեն) պլաստիկ տարաները ավելի հարմար են ԴՆԹ/ՌՆԹ պահպանման համար: Բացի այդ, կոտրվող շվաբր օգտագործելիս պահեստավորման խողովակը պետք է փորձի ընտրել 8 սմ-ից մեծ բարձրությամբ տարա՝ կանխելու համար պարունակության ցայտքը և աղտոտումը, երբ շվաբրը կոտրված է:

4. Արտադրական պահպանման լուծույթի համար նախատեսված ջուր. Արտադրական պահպանման լուծույթի համար օգտագործվող գերմաքուր ջուրը պետք է զտվի 13,000 մոլեկուլային քաշ ունեցող ուլտրաֆիլտրացիոն թաղանթով՝ կենսաբանական աղբյուրներից պոլիմերային խառնուրդների, ինչպիսիք են RNase-ը, DNase-ը և էնդոտոքսինը, հեռացումն ապահովելու համար, և սովորական մաքրումը խորհուրդ չի տրվում: Ջուր կամ թորած ջուր:

2. Վիրուսի նմուշառման խողովակների օգտագործումը

Վիրուսի նմուշառման խողովակի միջոցով նմուշառումը հիմնականում բաժանվում է բերանի խոռոչի և քթի խոռոչի նմուշառման։

1. Բերանաըմպանի նմուշառում. Սկզբում լեզուն սեղմեք լեզվի ճնշիչով, այնուհետև նմուշառման փայտիկի գլխիկը մտցրեք կոկորդի մեջ՝ երկկողմանի ըմպանային նշիկներն ու ըմպանի հետին պատը սրբելու համար, ապա թեթև ուժով սրբեք ըմպանի հետին պատը՝ խուսափելով լեզվին դիպչելուց:

2. Քթախորշից նմուշառում. չափեք քթի ծայրից մինչև ականջի բլթակը հեռավորությունը փայտիկի միջոցով և նշեք մատով, մտցրեք նմուշառման փայտիկը քթի խոռոչի մեջ՝ ուղղահայաց քթի (դեմքի) ուղղությամբ, փայտիկը պետք է ձգվի ականջի բլթի երկարության առնվազն կեսը մինչև քթի ծայրը, թողեք փայտիկը քթի մեջ 15-30 վայրկյան, նրբորեն պտտեք 3-5 անգամ և հանեք փայտիկը։
Օգտագործման եղանակից դժվար չէ տեսնել, թե դա բերանի խոռոչից թե քթից վերցված քսուք է, որ նմուշառումը տեխնիկական խնդիր է, որը դժվար է և աղտոտված։ Հավաքված նմուշի որակը ուղղակիորեն կապված է հետագա հայտնաբերման հետ։ Եթե հավաքված նմուշն ունի ցածր վիրուսային բեռ, հեշտ է կեղծ բացասական արդյունքներ առաջացնել, դժվար է հաստատել ախտորոշումը։