1. Konsènan fabrikasyon tib echantiyonaj viris yo
Tib echantiyonaj viris yo fè pati pwodwi aparèy medikal yo. Pifò manifakti lokal yo anrejistre dapre pwodwi premye klas yo, epi kèk konpayi anrejistre dapre pwodwi dezyèm klas yo. Dènyèman, pou satisfè bezwen ijans Wuhan ak lòt kote yo, anpil konpayi te pran "chanèl ijans" "Aplike pou pèmisyon anrejistreman premye klas la. Tib echantiyonaj viris la konpoze de yon ti kouvè echantiyonaj, yon solisyon prezèvasyon viris ak yon anbalaj ekstèn. Piske pa gen okenn estanda nasyonal inifye oswa estanda endistri, pwodwi divès manifakti yo varye anpil.
1. Ti koton echantiyonaj: Ti koton echantiyonaj la an kontak dirèk ak sit echantiyonaj la, epi materyèl tèt echantiyonaj la gen yon rapò sere avèk deteksyon ki vin apre a. Tèt ti koton echantiyonaj la ta dwe fèt ak fib sentetik Polyester (PE) oswa Rayon (fib sentetik). Ou pa ka itilize eponj aljinat kalsyòm oswa ti koton bwa (ki gen ladan baton banbou), epi materyèl tèt ti koton an pa ka fèt ak pwodui koton. Paske fib koton an gen yon gwo absòpsyon pwoteyin, li pa fasil pou li rantre nan solisyon depo ki vin apre a; epi lè yon baton an bwa oswa yon baton banbou ki gen aljinat kalsyòm ak konpozan an bwa kase, tranpe nan solisyon depo a ap absòbe pwoteyin tou, e menm li ka anpeche reyaksyon PCR ki vin apre a. Li rekòmande pou itilize fib sentetik tankou fib PE, fib Polyester ak fib polipropilèn pou materyèl tèt ti koton an. Fib natirèl tankou koton pa rekòmande. Fib nilon pa rekòmande tou paske fib nilon (menm jan ak tèt bwòs dan) absòbe dlo. Si li pòv, sa ka lakòz yon volim echantiyonaj ensifizan, sa ki afekte to deteksyon an. Eponj aljinat kalsyòm entèdi pou materyèl ti koton echantiyonaj! Manch ti koton an gen de kalite: kase ak entegre. Apre echantiyonaj la, yo mete ti koton ki kase a nan tib depo a, epi bouchon tib la kase apre yo fin kase l nan pozisyon ki toupre tèt echantiyonaj la; ti koton entegre a mete ti koton echantiyonaj la dirèkteman nan tib depo a apre echantiyonaj la, epi yo entegre kouvèti tib depo a. Aliyen ti twou a ak tèt manch lan epi sere kouvèti tib la. Lè nou konpare de metòd yo, dezyèm lan relativman an sekirite. Lè yo itilize ti koton kase a ansanm ak yon tib depo ki pi piti, li ka lakòz likid gaye nan tib la lè li kase, epi yo ta dwe peye tout atansyon sou risk kontaminasyon ki koze pa move itilizasyon pwodwi a. Li rekòmande pou itilize tib èkstrude polystyrène (PS) kre oswa tib pliye piki polypropylène (PP) pou materyèl manch ti koton an. Kèlkeswa materyèl yo itilize a, yo pa ka ajoute aditif aljinat kalsyòm; baton an bwa oswa baton banbou. An brèf, ti koton echantiyonaj la ta dwe asire kantite echantiyonaj ak kantite liberasyon an, epi materyèl yo chwazi yo pa dwe gen sibstans ki afekte tès ki vin apre yo.
2. Solisyon prezèvasyon viris: Gen de kalite solisyon prezèvasyon viris ki lajman itilize sou mache a, youn se yon solisyon antretyen viris modifye ki baze sou mwayen transpò a, epi lòt la se yon solisyon modifye pou lizat ekstraksyon asid nikleyik.
Konpozan prensipal premye a se mwayen kilti bazik Eagle a (MEM) oubyen sèl balanse Hank la, kote yo ajoute sèl, asid amine, vitamin, glikoz ak pwoteyin ki nesesè pou siviv viris la. Solisyon depo sa a itilize sèl sodyòm wouj fenol kòm yon endikatè ak solisyon. Lè valè pH la se 6.6-8.0, solisyon an woz. Yo ajoute glikoz, L-glutamin ak pwoteyin ki nesesè yo nan solisyon prezèvasyon an. Pwoteyin nan bay sou fòm serom fetal bovin oubyen albumin serom bovin, ki ka estabilize kouch pwoteyin viris la. Paske solisyon prezèvasyon an rich an eleman nitritif, li fezab pou siviv viris la men tou li benefik pou kwasans bakteri yo. Si solisyon prezèvasyon an kontamine ak bakteri, li pral miltipliye an gwo kantite. Diyoksid kabòn nan metabolit li yo ap lakòz pH solisyon prezèvasyon an bese soti nan woz pou vin jòn. Se poutèt sa, pifò manifaktirè yo te ajoute engredyan anti-bakteri nan fòmilasyon yo. Ajan anti-bakteri yo rekòmande yo se penisilin, streptomisin, gentamisin ak polimixin B. Yo pa rekòmande azid sodyòm ak 2-metil. Inibitè tankou 4-metil-4-izotiazolin-3-on (MCI) ak 5-kloro-2-metil-4-izotiazolin-3-on (CMCI) paske konpozan sa yo gen yon efè sou reyaksyon PCR a. Piske echantiyon solisyon prezèvasyon sa a bay la se fondamantalman yon viris vivan, orijinalite echantiyon an ka konsève nan pi gwo limit, epi li ka itilize non sèlman pou ekstraksyon ak deteksyon asid nikleyik viris, men tou pou kiltivasyon ak izolasyon viris. Sepandan, li ta dwe note ke lè yo itilize pou deteksyon, ekstraksyon ak pirifikasyon asid nikleyik la dwe fèt apre inaktivasyon.
Yon lòt kalite solisyon prezèvasyon prepare ki baze sou lizat ekstraksyon asid nikleyik, konpozan prensipal yo se sèl balanse, ajan kelatan EDTA, sèl guanidin (tankou izotiyosyanat guanidin, idroklorid guanidin, elatriye), tensioaktif anyonik (tankou dodekan silfat sodyòm), tensioaktif kasyonik (tankou oksalat tetradesiltrimetilamonyòm), fenol, 8-idwoksikinolin, ditiyotritol (DTT), pwoteyinaz K ak lòt konpozan. Solisyon depo sa a fèt pou fann viris la dirèkteman pou libere asid nikleyik la epi elimine RNaz la. Si yo itilize li sèlman pou RT-PCR, li pi apwopriye, men lizat la ka dezaktive viris la. Kalite echantiyon sa a pa ka itilize pou separasyon kilti viris.
Yo rekòmande pou itilize sèl EDTA kòm ajan kelasyon iyon metalik ki itilize nan solisyon prezèvasyon viris la (tankou asid etilèn diaminetetraacetic dipotasyòm, asid etilèn diaminetetraacetic disodyòm, elatriye), epi yo pa rekòmande pou itilize eparin (tankou eparin sodyòm, eparin ityòm), pou yo pa afekte deteksyon PCR a.
3. Tib prezèvasyon: Yo dwe chwazi materyèl tib prezèvasyon an avèk anpil atansyon. Gen done ki sijere ke polipropilèn (Polipropilèn) gen rapò ak adsorpsyon asid nikleyik, sitou lè konsantrasyon iyon tansyon yo wo, polietilèn (Polietilèn) pi preferab pase polipropilèn (Polipropilèn) ADN/ARN fasil pou kenbe. Plastik polietilèn-propilèn polymère (Polyallomer) ak kèk resipyan plastik polipropilèn (Polipropilèn) ki trete espesyalman pi apwopriye pou depo ADN/ARN. Anplis de sa, lè w ap itilize yon ti kouvè ki ka kraze, yo ta dwe eseye chwazi yon resipyan ki gen yon wotè ki pi gran pase 8 cm nan tib depo a pou anpeche sa ki ladan l tonbe epi kontamine lè ti kouvè a kase.
4. Dlo pou solisyon prezèvasyon pwodiksyon: Dlo ultrapi ki itilize pou solisyon prezèvasyon pwodiksyon an ta dwe filtre atravè yon manbràn ultrafiltrasyon ki gen yon pwa molekilè 13,000 pou asire retire enpurte polymère ki soti nan sous byolojik yo, tankou RNase, DNase, ak andotoksin, epi li pa rekòmande pou pirifye òdinèman. Dlo oswa dlo distile.
2. Itilizasyon tib echantiyonaj viris
Echantiyonaj lè l sèvi avèk tib echantiyonaj viris la divize prensipalman an echantiyonaj orofarenj ak echantiyonaj nazofarenj:
1. Echantiyonaj orofarinjèn: Premyèman, peze lang lan ak peze lang lan, answit lonje tèt ti koton echantiyon an nan gòj la pou siye amidal farinjèn bilateral yo ak miray farinjèn posterior la, epi siye miray farinjèn posterior la ak yon fòs lejè, evite touche inite lang lan.
2. Echantiyonaj nazofarinjen: mezire distans ki genyen ant pwent nen an ak lòb zòrèy la ak yon ti kouvè epi make ak yon dwèt, mete ti kouvè echantiyon an nan kavite nazal la nan direksyon nen vètikal la (figi), ti kouvè a ta dwe pwolonje omwen mwatye longè lòb zòrèy la rive nan pwent nen an, Kite ti kouvè a nan nen an pou 15-30 segonn, vire dousman 3-5 fwa, epi retire ti kouvè a.
Li pa difisil pou wè nan metòd itilizasyon an, kit se yon prelèvman orofarenksyal oswa yon prelèvman nazofarenksyal, echantiyonaj la se yon travay teknik, ki difisil epi ki kontamine. Kalite echantiyon yo kolekte a gen yon rapò dirèk ak deteksyon ki vin apre a. Si echantiyon yo kolekte a gen yon chaj viral ki ba, li fasil pou lakòz fo negatif, sa ki difisil pou konfime dyagnostik la.
Dat piblikasyon: 21 jen 2020
