वायरस सैंपलिंग ट्यूब पर कई विचार

1. वायरस सैंपलिंग ट्यूब के निर्माण के बारे में
वायरस सैंपलिंग ट्यूब चिकित्सा उपकरण उत्पादों से संबंधित हैं। अधिकांश घरेलू निर्माता प्रथम श्रेणी के उत्पादों के अनुसार पंजीकृत हैं, और कुछ कंपनियां द्वितीय श्रेणी के उत्पादों के अनुसार पंजीकृत हैं। हाल ही में, वुहान और अन्य स्थानों की आपातकालीन आवश्यकताओं को पूरा करने के लिए, कई कंपनियों ने "आपातकालीन चैनल" के माध्यम से "प्रथम श्रेणी रिकॉर्ड अनुमति के लिए आवेदन" किया है। वायरस सैंपलिंग ट्यूब एक सैंपलिंग स्वैब, वायरस संरक्षण घोल और बाहरी पैकेजिंग से बनी होती है। चूँकि कोई एकीकृत राष्ट्रीय मानक या उद्योग मानक नहीं है, इसलिए विभिन्न निर्माताओं के उत्पाद बहुत भिन्न होते हैं।

1. सैंपलिंग स्वैब: सैंपलिंग स्वैब सीधे सैंपलिंग साइट के संपर्क में होता है, और सैंपलिंग हेड की सामग्री का बाद के पता लगाने से गहरा संबंध होता है। सैंपलिंग स्वैब हेड पॉलिएस्टर (पीई) सिंथेटिक फाइबर या रेयान (मानव निर्मित फाइबर) से बना होना चाहिए। कैल्शियम एल्गिनेट स्पंज या लकड़ी की छड़ी स्वैब (बांस की छड़ें सहित) का उपयोग नहीं किया जा सकता है, और स्वैब हेड की सामग्री कपास उत्पाद नहीं हो सकती है। क्योंकि कपास फाइबर में प्रोटीन का एक मजबूत सोखना होता है, इसलिए बाद के भंडारण समाधान में इसे निकालना आसान नहीं होता है; और जब कैल्शियम एल्गिनेट और लकड़ी के घटकों वाली लकड़ी की छड़ी या बांस की छड़ी टूट जाती है, तो भंडारण समाधान में भिगोने से प्रोटीन भी सोख लिया जाएगा, और यहां तक ​​कि यह बाद की पीसीआर प्रतिक्रिया को भी रोक सकता है। खराब, जिसके परिणामस्वरूप अपर्याप्त नमूना मात्रा होती है, जिससे पता लगाने की दर प्रभावित होती है। कैल्शियम एल्गिनेट स्पंज को स्वाब सामग्री के नमूने के लिए निषिद्ध है! स्वाब हैंडल दो प्रकार के होते हैं: टूटा हुआ और अंतर्निर्मित। नमूना लेने के बाद टूटे हुए स्वाब को स्टोरेज ट्यूब में रखा जाता है, और सैंपलिंग हेड के पास की स्थिति से टूटने के बाद ट्यूब कैप को तोड़ दिया जाता है; अंतर्निर्मित स्वाब नमूना लेने के बाद सीधे सैंपलिंग स्वाब को स्टोरेज ट्यूब में डाल देता है, और स्टोरेज ट्यूब ट्यूब कवर को हैंडल के शीर्ष के साथ छोटे छेद को संरेखित करके ट्यूब कवर को कस देता है। दोनों विधियों की तुलना में, उत्तरार्द्ध अपेक्षाकृत सुरक्षित है। जब टूटे हुए स्वाब का उपयोग छोटे आकार की स्टोरेज ट्यूब के साथ किया जाता है, तो टूटने पर ट्यूब में तरल छींटे पड़ सकते हैं, और उत्पाद के अनुचित उपयोग से होने वाले संदूषण के जोखिम पर पूरा ध्यान दिया जाना चाहिए। स्वाब हैंडल की सामग्री के लिए खोखले पॉलीस्टाइनिन (PS) एक्सट्रूडेड ट्यूब या पॉलीप्रोपाइलीन (PP) इंजेक्शन क्रीजिंग ट्यूब का उपयोग करने की सिफारिश की जाती है। चाहे किसी भी सामग्री का उपयोग किया जाए, कैल्शियम एल्गिनेट एडिटिव्स नहीं मिलाए जा सकते; लकड़ी की छड़ें या बांस की छड़ें। संक्षेप में, नमूना लेने वाले स्वाब में नमूने की मात्रा और रिलीज की मात्रा सुनिश्चित होनी चाहिए, तथा चयनित सामग्रियों में ऐसे पदार्थ नहीं होने चाहिए जो बाद के परीक्षण को प्रभावित करें।

2. वायरस संरक्षण समाधान: बाजार में दो प्रकार के वायरस संरक्षण समाधान व्यापक रूप से उपयोग किए जाते हैं, एक परिवहन माध्यम के आधार पर संशोधित वायरस रखरखाव समाधान है, और दूसरा न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण लाइसेट के लिए संशोधित समाधान है।
पूर्व का मुख्य घटक ईगल का मूल संवर्धन माध्यम (एमईएम) या हैंक का संतुलित नमक है, जिसमें वायरस के अस्तित्व के लिए आवश्यक लवण, अमीनो एसिड, विटामिन, ग्लूकोज और प्रोटीन मिलाया जाता है। यह भंडारण समाधान एक संकेतक और समाधान के रूप में फिनोल लाल सोडियम नमक का उपयोग करता है। जब पीएच मान 6.6-8.0 होता है, तो समाधान गुलाबी होता है। आवश्यक ग्लूकोज, एल-ग्लूटामाइन और प्रोटीन को संरक्षण समाधान में मिलाया जाता है। प्रोटीन भ्रूण गोजातीय सीरम या गोजातीय सीरम एल्ब्यूमिन के रूप में प्रदान किया जाता है, जो वायरस के प्रोटीन खोल को स्थिर कर सकता है। क्योंकि संरक्षण समाधान पोषक तत्वों से समृद्ध होता है, यह वायरस के अस्तित्व के लिए अनुकूल है लेकिन बैक्टीरिया के विकास के लिए भी फायदेमंद है। यदि संरक्षण समाधान बैक्टीरिया से दूषित है, तो यह बड़ी मात्रा में गुणा करेगा अनुशंसित जीवाणुरोधी एजेंट पेनिसिलिन, स्ट्रेप्टोमाइसिन, जेंटामाइसिन और पॉलीमीक्सिन बी हैं। सोडियम एज़ाइड और 2-मिथाइल की सिफारिश नहीं की जाती है। 4-मिथाइल-4-आइसोथियाज़ोलिन-3-वन (एमसीआई) और 5-क्लोरो-2-मिथाइल-4-आइसोथियाज़ोलिन-3-वन (सीएमसीआई) जैसे अवरोधक क्योंकि इन घटकों का पीसीआर प्रतिक्रिया पर प्रभाव पड़ता है। चूंकि इस संरक्षण समाधान द्वारा प्रदान किया गया नमूना मूल रूप से एक जीवित वायरस है, इसलिए नमूने की मौलिकता को सबसे बड़ी सीमा तक रखा जा सकता है, और इसका उपयोग न केवल वायरस न्यूक्लिक एसिड के निष्कर्षण और पता लगाने के लिए किया जा सकता है, बल्कि वायरस की खेती और अलगाव के लिए भी किया जा सकता है। हालांकि, यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि जब पता लगाने के लिए उपयोग किया जाता है, तो निष्क्रियता के बाद न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण और शुद्धिकरण किया जाना चाहिए।
न्यूक्लिक एसिड निष्कर्षण लाइसेट के आधार पर तैयार एक अन्य प्रकार का संरक्षण समाधान, मुख्य घटक संतुलित लवण, EDTA कीलेटिंग एजेंट, गुआनिडीन नमक (जैसे गुआनिडीन आइसोथियोसाइनेट, गुआनिडीन हाइड्रोक्लोराइड, आदि), एनायनिक सर्फेक्टेंट (जैसे डोडेकेन सोडियम सल्फेट), कैशनिक सर्फेक्टेंट (जैसे टेट्राडेसिलट्राइमिथाइलअमोनियम ऑक्सालेट), फिनोल, 8-हाइड्रॉक्सीक्विनोलिन, डाइथियोथ्रेइटोल (DTT), प्रोटीनएज़ K और अन्य घटक हैं। यह भंडारण समाधान सीधे वायरस को विभाजित करने के लिए न्यूक्लिक एसिड को मुक्त करता है और RNase को खत्म करता है। यदि केवल RT-PCR के लिए उपयोग किया जाता है, तो यह अधिक उपयुक्त है, लेकिन लाइसेट वायरस को निष्क्रिय कर सकता है

वायरस संरक्षण समाधान में उपयोग किए जाने वाले धातु आयन चेलेटिंग एजेंट को EDTA लवण (जैसे डिपोटेशियम एथिलीनडायमिनेटेट्राएसेटिक एसिड, डिसोडियम एथिलीनडायमिनेटेट्राएसेटिक एसिड, आदि) का उपयोग करने की सिफारिश की जाती है, और हेपरिन (जैसे सोडियम हेपरिन, लिथियम हेपरिन) का उपयोग करने की अनुशंसा नहीं की जाती है, ताकि पीसीआर का पता लगाने को प्रभावित न किया जा सके।
3. संरक्षण ट्यूब: संरक्षण ट्यूब की सामग्री का चयन सावधानी से किया जाना चाहिए। ऐसे आंकड़े हैं जो बताते हैं कि पॉलीप्रोपाइलीन (Polypropylene) न्यूक्लिक एसिड के अवशोषण से संबंधित है, खासकर उच्च तनाव आयन सांद्रता पर। पॉलीइथाइलीन (Polyethylene) पॉलीप्रोपाइलीन (Polypropylene) की तुलना में अधिक पसंद किया जाता है, जो डीएनए/आरएनए को आसानी से पकड़ लेता है। पॉलीइथाइलीन-प्रोपाइलीन पॉलीमर (Polyallomer) प्लास्टिक और कुछ विशेष रूप से संसाधित पॉलीप्रोपाइलीन (Polypropylene) प्लास्टिक कंटेनर डीएनए/आरएनए भंडारण के लिए अधिक उपयुक्त हैं। इसके अलावा, टूटने योग्य स्वाब का उपयोग करते समय, भंडारण ट्यूब के लिए 8 सेमी से अधिक ऊँचाई वाले कंटेनर का चयन करने का प्रयास करना चाहिए ताकि स्वाब के टूटने पर सामग्री के छींटे और संदूषण से बचा जा सके।

4. उत्पादन संरक्षण समाधान के लिए पानी: उत्पादन संरक्षण समाधान के लिए उपयोग किए जाने वाले अल्ट्राप्योर पानी को RNase, DNase और एंडोटॉक्सिन जैसे जैविक स्रोतों से बहुलक अशुद्धियों को हटाने के लिए 13,000 आणविक भार वाले अल्ट्राफिल्ट्रेशन झिल्ली के माध्यम से फ़िल्टर किया जाना चाहिए, और साधारण शुद्धिकरण की अनुशंसा नहीं की जाती है। पानी या आसुत जल।

2. वायरस सैंपलिंग ट्यूब का उपयोग

वायरस सैंपलिंग ट्यूब का उपयोग करके नमूनाकरण मुख्य रूप से ओरोफैरिंजियल नमूनाकरण और नासोफैरिंजियल नमूनाकरण में विभाजित किया जाता है:

1. ओरोफेरीन्जियल सैंपलिंग: सबसे पहले जीभ को जीभ डिप्रेसर से दबाएं, फिर सैंपलिंग स्वाब के सिर को गले में बढ़ाकर द्विपक्षीय ग्रसनी टॉन्सिल और पीछे की ग्रसनी दीवार को पोंछें, और पीछे की ग्रसनी दीवार को हल्के बल से पोंछें, जीभ इकाई को छूने से बचें।

2. नासोफेरींजल सैंपलिंग: नाक की नोक से कान की लोब तक की दूरी को एक स्वाब से मापें और उंगली से चिह्नित करें, सैंपलिंग स्वाब को ऊर्ध्वाधर नाक (चेहरे) की दिशा में नाक गुहा में डालें, स्वाब को कान की लोब की कम से कम आधी लंबाई नाक की नोक तक बढ़ाना चाहिए, स्वाब को नाक में 15-30 सेकंड के लिए छोड़ दें, धीरे से 3-5 बार घुमाएं, और स्वाब को वापस ले लें।
उपयोग की विधि से यह देखना मुश्किल नहीं है कि चाहे वह ओरोफेरीन्जियल स्वैब हो या नासोफेरीन्जियल स्वैब, नमूना लेना एक तकनीकी कार्य है, जो कठिन और दूषित है। एकत्रित नमूने की गुणवत्ता सीधे बाद में पता लगाने से संबंधित है। यदि एकत्रित नमूने का वायरल लोड कम है, तो झूठी नकारात्मकता उत्पन्न करना आसान है, और निदान की पुष्टि करना मुश्किल है।