1. Maidir le feadáin samplála víreas a mhonarú
Baineann feadáin samplála víreas le táirgí feistí leighis.Tá an chuid is mó de na monaróirí baile cláraithe de réir na dtáirgí den chéad scoth, agus is beag cuideachtaí atá cláraithe de réir na dtáirgí dara rang.Le déanaí, chun freastal ar riachtanais éigeandála Wuhan agus áiteanna eile, ghlac go leor cuideachtaí an “cainéal éigeandála” “Cuir isteach ar chead taifead den chéad scoth.Tá an feadán samplála víreas comhdhéanta de swab samplála, réiteach caomhnaithe víreas agus pacáistiú seachtrach.Ós rud é nach bhfuil aon chaighdeán náisiúnta aontaithe nó caighdeán tionscail ann, tá éagsúlacht mhór ag táirgí monaróirí éagsúla.
1. Swab samplála: Déanann an swab samplála teagmháil dhíreach leis an suíomh samplála, agus tá dlúthbhaint ag ábhar an chinn samplála leis an bhrath ina dhiaidh sin.Ba chóir go mbeadh an ceann swab samplála déanta as snáithín sintéiseach poileistir (PE) nó réón (snáithín de dhéantús an duine).Ní féidir spúinse algináit chailciam nó táithíní bata adhmaid (lena n-áirítear bataí bambú) a úsáid, agus ní féidir le hábhar an chinn swab a bheith ina tháirgí cadáis.Toisc go bhfuil asaithe láidir próitéine ag snáithín cadáis, níl sé éasca é a chur isteach sa réiteach stórála ina dhiaidh sin;agus nuair a bhristear bata adhmaid nó bata bambú ina bhfuil ailgináit chailciam agus comhpháirteanna adhmaid, déanfaidh maos sa réiteach stórála próitéin a ionsú freisin, agus fiú beidh sé in ann bac a chur ar an imoibriú PCR ina dhiaidh sin.Moltar úsáid a bhaint as snáithíní sintéiseacha cosúil le snáithín PE, snáithín poileistear agus snáithín polapróipiléine le haghaidh ábhar an chinn swab.Ní mholtar snáithíní nádúrtha cosúil le cadás.Ní mholtar snáithíní níolón freisin mar go n-ionsúnn snáithíní níolón (cosúil le cinn scuab fiacla) uisce.Go dona, rud a fhágann nach bhfuil dóthain toirte samplála ann, rud a dhéanann difear don ráta braite.Tá cosc ar spúinse algináit chailciam le haghaidh ábhar swab a shampláil!Tá dhá chineál ag láimhseáil swab: briste agus tógtha.Cuirtear an swab briste sa fheadán stórála tar éis samplála, agus tá an caipín feadán briste tar éis é a bhriseadh ón suíomh in aice leis an gceann samplála;cuireann an swab ionsuite go díreach an swab samplála isteach sa fheadán stórála tar éis samplála, agus tógtar clúdach an fheadáin stórála i Ailínigh an poll beag le barr an láimhseála agus déan an clúdach feadán níos doichte.Ag comparáid idir an dá mhodh, tá an dara ceann sách sábháilte.Nuair a úsáidtear an swab briste i gcomhar le feadán stórála méid níos lú, féadfaidh sé a bheith ina chúis le splancadh leachtach sa fheadán nuair a bhíonn sé briste, agus ba cheart aird iomlán a thabhairt ar an mbaol éillithe de bharr úsáid mhíchuí an táirge.Moltar feadán easbhrúite polaistiréin log (PS) nó feadán creasála insteallta polapróipiléine (PP) a úsáid le haghaidh ábhar an láimhseála swab.Is cuma cén t-ábhar a úsáidtear, ní féidir breiseáin algináit chailciam a chur leis;bataí adhmaid nó bataí bambú.I mbeagán focal, ba cheart go n-áiritheodh an swab samplála méid na samplála agus an méid scaoilte, agus ní mór go mbeadh substaintí a dhéanann difear do thástáil ina dhiaidh sin ag na hábhair roghnaithe.
2. Réiteach caomhnaithe víreas: Úsáidtear dhá chineál réitigh caomhnaithe víreas go forleathan ar an margadh, is réiteach cothabhála víreas é ceann amháin arna mhodhnú bunaithe ar an meán iompair, agus is réiteach modhnaithe é an ceann eile le haghaidh eastóscadh aigéad núicléasach lysate.
Is é príomh-chomhpháirt an chéad cheann meán cultúir bhunúsach Eagle (MEM) nó salann chothromaithe Hank, a chuirtear leis na salainn, aimínaigéid, vitimíní, glúcós agus próitéin atá riachtanach chun maireachtáil víreas.Úsáideann an réiteach stórála seo salann sóidiam dearg feanól mar tháscaire agus réiteach.Nuair a bhíonn an luach pH 6.6-8.0, tá an réiteach bándearg.Cuirtear an glúcóis riachtanach, L-glutamine agus próitéin leis an réiteach caomhnaithe.Soláthraítear an próitéin i bhfoirm séiream bó féatais nó albaimin serum bó-ainmhithe, ar féidir leis an bhlaosc próitéine den víreas a chobhsú.Toisc go bhfuil an réiteach caomhnaithe saibhir i gcothaithigh, tá sé a chabhródh le maireachtáil an víris ach freisin tairbheach d'fhás na baictéir.Má tá an réiteach caomhnaithe éillithe le baictéir, méadóidh sé i gcainníochtaí móra.Beidh an dé-ocsaíd charbóin ina meitibilítí faoi deara an pH réiteach caomhnú titim ó bándearg Turns buí.Dá bhrí sin, chuir an chuid is mó de na monaróirí comhábhair antibacterial lena bhfoirmíochtaí.Is iad na gníomhairí antibacterial molta peinicillin, streptomycin, gentamicin agus polymyxin B. Ní mholtar azide sóidiam agus 2-meitile Coscairí mar 4-meitil-4-isothiazolin-3-one (MCI) agus 5-chloro-2-methyl-4 -isothiazolin-3-one (CMCI) toisc go bhfuil éifeacht ag na comhpháirteanna seo ar imoibriú PCR.Ós rud é gur víreas beo é an sampla a sholáthraíonn an réiteach caomhnaithe seo go bunúsach, is féidir úrnuacht an tsampla a choinneáil chomh fada agus is féidir, agus is féidir é a úsáid, ní hamháin chun aigéid núicléacha víreas a eastóscadh agus a bhrath, ach freisin le haghaidh saothrú agus leithlisiú víris.Mar sin féin, ba chóir a thabhairt faoi deara, nuair a úsáidtear é le haghaidh braite, go gcaithfear eastóscadh agus íonú aigéid núicléacha a dhéanamh tar éis díghníomhaithe.
Réitigh caomhnaithe de chineál eile a ullmhaítear bunaithe ar lysate eastóscadh aigéid núicléacha, is iad na príomhchodanna ná salainn chothromaithe, gníomhaire chelating EDTA, salann guanidine (cosúil le isothiocyanate guanidine, hidreaclóiríd guanidine, etc.), surfactant anionic (cosúil le dodecanán sulfáit sóidiam), cationic. dromchlaghníomhaithe (cosúil le tetradecyltrimethylammonium oxalate), feanól, 8-hydroxyquinoline, dithiothreitol (DTT), proteinase K agus comhpháirteanna eile, Is é an réiteach stórála seo ná an víreas a ghlanadh go díreach chun an t-aigéad núicléach a scaoileadh agus an RNase a dhíchur.Mura n-úsáidtear é ach le haghaidh RT-PCR, tá sé níos oiriúnaí, ach is féidir leis an lysate an víreas a dhíghníomhachtú.Ní féidir an cineál seo sampla a úsáid chun cultúr víreas a scaradh.
Moltar an gníomhaire chelating ian miotail a úsáidtear sa tuaslagán caomhnaithe víreas salainn EDTA a úsáid (cosúil le aigéad dipotassium ethylenediaminetetraacetic acid, disodium ethylenediaminetetraacetic acid, etc.), agus ní mholtar heparin a úsáid (cosúil le heparin sóidiam, heparin litiam), ionas nach gcuirfear isteach ar bhrath PCR.
3. Feadán caomhnaithe: Ba cheart ábhar an fheadáin chaomhnaithe a roghnú go cúramach.Tá sonraí ann a thugann le tuiscint go bhfuil baint ag polapróipiléine (polapróipiléine) le asaithe aigéad núicléasach, go háirithe ag tiúchan ard ian teannas, is fearr poileitiléin (polaitiléine) ná polapróipiléine (polapróipiléine) Éasca le DNA/RNA a thuiscint.Tá plaisteach polaiméire poileitiléin-próipiléine (Polyallaiméir) agus roinnt coimeádán plaisteach polapróipiléine (polapróipiléine) próiseáilte go speisialta níos oiriúnaí do stóráil DNA/RNA.Ina theannta sin, nuair a bhíonn swab inbhriste á úsáid agat, ba chóir go ndéanfadh an feadán stórála iarracht coimeádán a roghnú le airde níos mó ná 8 cm chun an t-ábhar a chosc ó splancscáileán agus éillithe nuair a bhíonn an swab briste.
4. Uisce le haghaidh réiteach caomhnaithe táirgthe: Ba cheart an t-uisce ultrapure a úsáidtear le haghaidh réiteach caomhnaithe táirgthe a scagadh trí membrane ultrafiltration le meáchan móilíneach de 13,000 chun a chinntiú go mbaintear neamhíonachtaí polaiméire ó fhoinsí bitheolaíocha, mar shampla RNase, DNase, agus endotoxin, agus ní mholtar gnáth-íonú.Uisce nó uisce driogtha.
2. Feadáin samplála víreas a úsáid
Tá sampláil ag baint úsáide as an bhfeadán samplála víreas roinnte go príomha i sampláil oropharyngeal agus sampláil nasopharyngeal:
1. Sampláil oropharyngeal: An chéad brúigh an teanga leis an depressor teanga, ansin síneadh ceann an swab samplála isteach sa scornach chun na tonsils pharyngeal déthaobhacha agus balla pharyngeal posterior a scriosadh, agus an balla pharyngeal posterior wipe le fórsa éadrom, a sheachaint dteagmháil leis an teanga. aonad.
2. Sampláil nasopharyngeal: tomhas an t-achar ó bharr na srón go dtí an lobe cluaise le swab agus marcáil le finger, cuir isteach an swab samplála isteach sa chuas nasal i dtreo na srón ingearach (aghaidh), ba cheart go leathnódh an swab. ar a laghad leath fhad an lobe cluaise go dtí barr na srón, Fág an swab sa srón ar feadh 15-30 soicind, rothlaigh go réidh 3-5 huaire, agus tarraing siar an swab.
Níl sé deacair a fheiceáil ón modh úsáide, cibé acu is swab oropharyngeal nó swab nasopharyngeal é, is tasc teicniúil é sampláil, atá deacair agus éillithe.Baineann cáilíocht an tsampla bhailithe go díreach leis an mbrath ina dhiaidh sin.Má tá ualach víreasach ar an sampla a bailíodh Íseal, éasca le claonchlónna bréagacha a chur faoi deara, deacair an diagnóis a dhearbhú.
Am postála: Meitheamh-21-2020
