1. Birusen laginketa-hodien fabrikazioari buruz
Birusen laginketa-hodiak gailu medikoen produktuen artean daude. Bertako fabrikatzaile gehienak lehen mailako produktuen arabera erregistratuta daude, eta enpresa gutxi batzuk bigarren mailako produktuen arabera erregistratuta daude. Duela gutxi, Wuhanen eta beste leku batzuetako larrialdi-beharrei erantzuteko, enpresa askok "larrialdi-kanala" hartu dute: "Eskatu lehen mailako erregistro-baimena". Birusen laginketa-hodia laginketa-iskotxo batez, birusak kontserbatzeko soluzio batez eta kanpoko ontzi batez osatuta dago. Ez dagoenez estandar nazional edo industria-estandar bateraturik, fabrikatzaile desberdinen produktuak asko aldatzen dira.
1. Laginketa-iskotoia: Laginketa-iskotoia zuzenean kontaktuan jartzen da laginketa-gunearekin, eta laginketa-buruaren materiala estuki lotuta dago ondorengo detekzioarekin. Laginketa-iskotoiaren burua poliesterrezko (PE) zuntz sintetikoz edo rayonez (zuntz artifiziala) egina izan behar da. Ezin dira kaltzio alginatozko belakirik edo zurezko makil-iskotoirik (banbu-makilak barne) erabili, eta iskotoiaren buruaren materiala ezin da kotoizko produkturik izan. Kotoi-zuntzak proteinen xurgapen handia duenez, ez da erraza ondorengo biltegiratze-soluzioan eluzioa egitea; eta kaltzio alginatoa eta zurezko osagaiak dituen zurezko edo banbu-makil bat hautsita dagoenean, biltegiratze-soluzioan bustitzeak proteinak ere xurgatuko ditu, eta baita ondorengo PCR erreakzioa inhibitu ere. Gomendagarria da PE zuntza, poliester-zuntza eta polipropileno-zuntza bezalako zuntz sintetikoak erabiltzea iskotoiaren buruaren material gisa. Ez dira gomendatzen zuntz naturalak, hala nola kotoia. Nylon-zuntzak ere ez dira gomendatzen, nylon-zuntzek (hortzetako eskuilen buruen antzekoek) ura xurgatzen baitute. Txarra, laginketa-bolumen nahikorik ez izatea eraginez, detekzio-tasan eragina izanik. Kaltzio alginatozko belakia debekatuta dago iskotoiaren laginketa-materialerako! Iskotoiaren heldulekuak bi mota ditu: hautsia eta integratua. Laginketa egin ondoren, hautsitako hisopoa biltegiratze-hodian jartzen da, eta hodiaren tapoia laginketa-burutik gertu dagoen posiziotik hautsi ondoren hautsi egiten da; barneko hisopoak zuzenean sartzen du laginketa-isopoa biltegiratze-hodian laginketa egin ondoren, eta biltegiratze-hodiaren hodi-estalkia sartzen da. Lerrokatu zulo txikia heldulekuaren goialdearekin eta estutu hodi-estalkia. Bi metodoak alderatuta, azken hau nahiko segurua da. Hautsitako hisopoa biltegiratze-hodi txikiago batekin batera erabiltzen denean, likidoa zipriztin daiteke hodian hausten denean, eta arreta osoa jarri behar da produktuaren erabilera desegokiak eragindako kutsadura-arriskuan. Gomendagarria da poliestirenozko (PS) hodi estrusatu hutsa edo polipropilenozko (PP) injekziozko tolestura-hodia erabiltzea hisopoaren heldulekuaren materialarentzat. Edozein material erabili arren, ezin dira kaltzio alginato gehigarriak gehitu; zurezko makilak edo banbuzko makilak. Laburbilduz, laginketa-isopoak laginketa-kopurua eta askapen-kopurua bermatu behar ditu, eta hautatutako materialek ez dute ondorengo probetan eragina duten substantziarik izan behar.
2. Birusak kontserbatzeko soluzioa: Merkatuan oso erabiliak diren bi birusak kontserbatzeko soluzio mota daude, bata garraio-euskarrian oinarritutako birusak mantentzeko soluzio aldatua da, eta bestea azido nukleikoak erauzteko lisatuarentzako soluzio aldatua.
Lehenengoaren osagai nagusia Eagle-ren oinarrizko kultura-ingurunea (MEM) edo Hank-en gatz orekatua da, eta birusaren biziraupenerako beharrezkoak diren gatzak, aminoazidoak, bitaminak, glukosa eta proteinak gehitzen zaizkio. Biltegiratze-soluzio honek fenol gorri sodio gatza erabiltzen du adierazle eta soluzio gisa. pH-a 6,6-8,0 denean, soluzioa arrosa kolorekoa da. Beharrezko glukosa, L-glutamina eta proteinak kontserbazio-soluzioari gehitzen zaizkio. Proteina behi-fetuaren serumaren edo behi-serumaren albuminaren moduan ematen da, eta horrek birusaren proteina-geruza egonkortu dezake. Kontserbazio-soluzioa mantenugaietan aberatsa denez, birusaren biziraupenerako lagungarria da, baina baita bakterioen hazkuntzarako ere. Kontserbazio-soluzioa bakterioekin kutsatuta badago, kantitate handitan ugalduko da. Bere metabolitoetako karbono dioxidoak kontserbazio-soluzioaren pH-a arrosa koloretik horira jaistea eragingo du. Hori dela eta, fabrikatzaile gehienek osagai antibakterianoak gehitu dizkiete beren formulazioei. Gomendatutako agente antibakterianoak penizilina, estreptomizina, gentamizina eta polimixina B dira. Sodio azida eta 2-metiloa ez dira gomendatzen 4-metil-4-isotiazolin-3-ona (MCI) eta 5-kloro-2-metil-4-isotiazolin-3-ona (CMCI) bezalako inhibitzaileak, osagai hauek PCR erreakzioan eragina baitute. Kontserbazio-soluzio honek ematen duen lagina funtsean birus bizia denez, laginaren originaltasuna ahalik eta gehien mantendu daiteke, eta ez da soilik birusen azido nukleikoak erauzteko eta detektatzeko erabil daiteke, baita birusak hazteko eta isolatzeko ere. Hala ere, kontuan izan behar da detekziorako erabiltzen denean, azido nukleikoen erauzketa eta purifikazioa inaktibatu ondoren egin behar direla.
Beste kontserbazio-soluzio mota bat azido nukleikoen erauzketa-lisatuan oinarrituta prestatzen da, osagai nagusiak gatz orekatuak, EDTA kelatzaile-agentea, guanidina gatza (guanidina isotiozianatoa, guanidina hidrokloruroa, etab.), gainazal-aktibo anionikoa (dodekano sodio sulfatoa, adibidez), gainazal-aktibo kationikoak (tetradeziltrimetilamonio oxalatoa, adibidez), fenola, 8-hidroxikinolina, ditiotreitola (DTT), proteinasa K eta beste osagai batzuk dira. Biltegiratze-soluzio honek birusa zuzenean zatitzeko balio du azido nukleikoa askatzeko eta RNasa ezabatzeko. RT-PCRrako bakarrik erabiltzen bada, egokiagoa da, baina lisatuak birusa inaktibatu dezake. Lagin mota hau ezin da erabili birusen kultura-bereizketarako.
Birusak kontserbatzeko soluzioan erabiltzen den metal ioien kelatzaile gisa EDTA gatzak erabiltzea gomendatzen da (adibidez, dipotasio etilendiaminotetraazetiko azidoa, disodio etilendiaminotetraazetiko azidoa, etab.), eta ez da gomendagarria heparina erabiltzea (adibidez, sodio heparina, litio heparina), PCR detekzioan eraginik ez izateko.
3. Kontserbazio-hodia: Kontserbazio-hodiaren materiala arretaz aukeratu behar da. Datuak daude iradokitzen dutenak polipropilenoa (polipropilenoa) azido nukleikoaren adsorzioarekin erlazionatuta dagoela, batez ere tentsio-ioien kontzentrazio altuan, polietilenoa (polietilenoa) nahiago da polipropilenoa (polipropilenoa) baino. Erraz heltzen da DNA/RNA. Polietileno-propileno polimero (polialomero) plastikoa eta polipropileno (polipropileno) plastikozko ontziak egokiagoak dira DNA/RNA gordetzeko. Gainera, hautsi daitekeen hisopo bat erabiltzean, biltegiratze-hodiaren altuera 8 cm-tik gorako ontzi bat aukeratu behar da, hisopoa hausten denean edukia zipriztindu eta kutsatu ez dadin.
4. Ekoizpenerako kontserbazio-soluziorako ura: Ekoizpenerako kontserbazio-soluziorako erabiltzen den ur ultrapuroa 13.000ko pisu molekularra duen ultrafiltrazio-mintz baten bidez iragazi behar da, iturri biologikoetatik datozen polimeroen ezpurutasunak, hala nola RNasa, DNasa eta endotoxina, kentzen direla ziurtatzeko, eta ez da gomendatzen ohiko arazketa. Ura edo ur destilatua.
2. Birusen laginketa-hodien erabilera
Birusen laginketa-hodia erabiliz laginketa orofaringeko laginketan eta nasofaringeko laginketan banatzen da batez ere:
1. Aho-faringearen laginketa: Lehenik mihia mihi-jaislearekin sakatu, ondoren laginketa-iskotxoaren burua eztarrira luzatu faringearen amigdalak eta faringearen atzeko horma garbitzeko, eta garbitu faringearen atzeko horma indar arin batekin, mihi-unitatea ukitzea saihestuz.
2. Nasofaringeko laginketa: neurtu sudur-puntaren eta belarri-lobuluaren arteko distantzia hisopo batekin eta markatu hatz batekin, sartu laginketa-isopoa sudur-barrunbean sudur bertikalaren (aurpegiaren) norabidean, hisopoak belarri-lobuluaren luzeraren erdia gutxienez sudur-puntaraino luzatu behar du, utzi hisopoa sudurrean 15-30 segundoz, biratu astiro 3-5 aldiz eta atera hisopoa.
Ez da zaila erabilera-metodotik ikustea, orofaringeko frotisa edo nasofaringeko frotisa den, laginketa zeregin teknikoa da, zaila eta kutsatua. Bildutako laginaren kalitatea zuzenean lotuta dago ondorengo detekzioarekin. Bildutako laginak birus-karga baxua badu, erraz negatibo faltsuak eragitea, zaila da diagnostikoa baieztatzea.
Argitaratze data: 2020ko ekainaren 21a
