ভাইরাস স্যাম্পলিং টিউব সম্পর্কে বেশ কিছু চিন্তাভাবনা

১. ভাইরাস নমুনা টিউব তৈরি সম্পর্কে
ভাইরাস স্যাম্পলিং টিউবগুলি মেডিকেল ডিভাইস পণ্যের অন্তর্গত। বেশিরভাগ দেশীয় নির্মাতারা প্রথম-শ্রেণীর পণ্য অনুসারে নিবন্ধিত, এবং কয়েকটি কোম্পানি দ্বিতীয়-শ্রেণীর পণ্য অনুসারে নিবন্ধিত। সম্প্রতি, উহান এবং অন্যান্য স্থানের জরুরি চাহিদা মেটাতে, অনেক কোম্পানি "জরুরি চ্যানেল" গ্রহণ করেছে "প্রথম-শ্রেণীর রেকর্ড অনুমতির জন্য আবেদন করুন। ভাইরাস স্যাম্পলিং টিউবটি একটি নমুনা সোয়াব, ভাইরাস সংরক্ষণ সমাধান এবং বাইরের প্যাকেজিং দিয়ে গঠিত। যেহেতু কোনও ঐক্যবদ্ধ জাতীয় মান বা শিল্প মান নেই, তাই বিভিন্ন নির্মাতাদের পণ্যগুলি ব্যাপকভাবে পরিবর্তিত হয়।

১. স্যাম্পলিং সোয়াব: স্যাম্পলিং সোয়াব সরাসরি স্যাম্পলিং সাইটের সাথে যোগাযোগ করে এবং স্যাম্পলিং হেডের উপাদান পরবর্তী সনাক্তকরণের সাথে ঘনিষ্ঠভাবে সম্পর্কিত। স্যাম্পলিং সোয়াব হেডটি পলিয়েস্টার (PE) সিন্থেটিক ফাইবার বা রেয়ন (মানবসৃষ্ট ফাইবার) দিয়ে তৈরি করা উচিত। ক্যালসিয়াম অ্যালজিনেট স্পঞ্জ বা কাঠের স্টিক সোয়াব (বাঁশের কাঠি সহ) ব্যবহার করা যাবে না এবং সোয়াব হেডের উপাদান তুলাজাত পণ্য হতে পারে না। যেহেতু তুলার ফাইবারে প্রোটিনের তীব্র শোষণ থাকে, তাই পরবর্তী স্টোরেজ দ্রবণে এটি প্রবেশ করা সহজ নয়; এবং যখন ক্যালসিয়াম অ্যালজিনেট এবং কাঠের উপাদানযুক্ত কাঠের কাঠি বা বাঁশের কাঠি ভেঙে যায়, তখন স্টোরেজ দ্রবণে ভিজিয়ে রাখলে প্রোটিনও শোষণ করবে এবং এমনকি পরবর্তী পিসিআর প্রতিক্রিয়াও বাধাগ্রস্ত করতে পারে। সোয়াব হেডের উপাদানের জন্য পিই ফাইবার, পলিয়েস্টার ফাইবার এবং পলিপ্রোপিলিন ফাইবারের মতো সিন্থেটিক ফাইবার ব্যবহার করার পরামর্শ দেওয়া হয়। তুলার মতো প্রাকৃতিক তন্তু সুপারিশ করা হয় না। নাইলন ফাইবারও সুপারিশ করা হয় না কারণ নাইলন ফাইবার (টুথব্রাশ হেডের মতো) জল শোষণ করে। দুর্বল, যার ফলে পর্যাপ্ত নমুনার পরিমাণ থাকে না, যা সনাক্তকরণের হারকে প্রভাবিত করে। সোয়াব উপাদানের নমুনা নেওয়ার জন্য ক্যালসিয়াম অ্যালজিনেট স্পঞ্জ নিষিদ্ধ! সোয়াব হ্যান্ডেল দুটি ধরণের: ভাঙা এবং অন্তর্নির্মিত। নমুনা সংগ্রহের পরে ভাঙা সোয়াব স্টোরেজ টিউবে স্থাপন করা হয়, এবং নমুনা সংগ্রহের মাথার কাছাকাছি অবস্থান থেকে ভেঙে যাওয়ার পরে টিউব ক্যাপটি ভেঙে যায়; বিল্ট-ইন সোয়াব নমুনা সংগ্রহের পরে সরাসরি স্যাম্পলিং সোয়াবকে স্টোরেজ টিউবে প্রবেশ করায় এবং স্টোরেজ টিউব টিউব কভারটি হ্যান্ডেলের উপরের অংশের সাথে ছোট গর্তটি সারিবদ্ধ করে টিউব কভারটি শক্ত করে তৈরি করা হয়। দুটি পদ্ধতির তুলনা করলে, পরবর্তীটি তুলনামূলকভাবে নিরাপদ। যখন ভাঙা সোয়াবটি ছোট আকারের স্টোরেজ টিউবের সাথে ব্যবহার করা হয়, তখন ভাঙা অবস্থায় টিউবে তরল ছড়িয়ে পড়তে পারে এবং পণ্যটির অনুপযুক্ত ব্যবহারের ফলে দূষণের ঝুঁকির দিকে পূর্ণ মনোযোগ দেওয়া উচিত। সোয়াব হ্যান্ডেলের উপাদানের জন্য ফাঁপা পলিস্টাইরিন (PS) এক্সট্রুডেড টিউব বা পলিপ্রোপিলিন (PP) ইনজেকশন ক্রিজিং টিউব ব্যবহার করার পরামর্শ দেওয়া হয়। যে উপাদানই ব্যবহার করা হোক না কেন, ক্যালসিয়াম অ্যালজিনেট অ্যাডিটিভ যোগ করা যাবে না; কাঠের লাঠি বা বাঁশের লাঠি। সংক্ষেপে, স্যাম্পলিং সোয়াবটি নমুনা সংগ্রহের পরিমাণ এবং মুক্তির পরিমাণ নিশ্চিত করবে এবং নির্বাচিত উপকরণগুলিতে এমন পদার্থ থাকা উচিত নয় যা পরবর্তী পরীক্ষাকে প্রভাবিত করে।

২. ভাইরাস সংরক্ষণ সমাধান: বাজারে দুই ধরণের ভাইরাস সংরক্ষণ সমাধান ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত হয়, একটি হল পরিবহন মাধ্যমের উপর ভিত্তি করে পরিবর্তিত ভাইরাস রক্ষণাবেক্ষণ সমাধান, এবং অন্যটি হল নিউক্লিক অ্যাসিড নিষ্কাশন লাইসেটের জন্য পরিবর্তিত সমাধান।
প্রথমটির প্রধান উপাদান হল ঈগলের মৌলিক কালচার মিডিয়াম (MEM) অথবা হ্যাঙ্কের সুষম লবণ, যা ভাইরাস বেঁচে থাকার জন্য প্রয়োজনীয় লবণ, অ্যামিনো অ্যাসিড, ভিটামিন, গ্লুকোজ এবং প্রোটিনের সাথে যোগ করা হয়। এই স্টোরেজ দ্রবণে ফেনল লাল সোডিয়াম লবণ একটি সূচক এবং দ্রবণ হিসেবে ব্যবহার করা হয়। যখন pH মান 6.6-8.0 হয়, তখন দ্রবণটি গোলাপী হয়। প্রয়োজনীয় গ্লুকোজ, L-glutamine এবং প্রোটিন সংরক্ষণ দ্রবণে যোগ করা হয়। প্রোটিনটি ভ্রূণ গবাদি পশুর সিরাম বা গবাদি পশুর সিরাম অ্যালবুমিন আকারে সরবরাহ করা হয়, যা ভাইরাসের প্রোটিন শেলকে স্থিতিশীল করতে পারে। যেহেতু সংরক্ষণ দ্রবণ পুষ্টিতে সমৃদ্ধ, এটি ভাইরাসের বেঁচে থাকার জন্য সহায়ক কিন্তু ব্যাকটেরিয়ার বৃদ্ধির জন্যও উপকারী। যদি সংরক্ষণ দ্রবণটি ব্যাকটেরিয়া দ্বারা দূষিত হয়, তবে এটি প্রচুর পরিমাণে বৃদ্ধি পাবে। এর বিপাকীয় পদার্থে কার্বন ডাই অক্সাইড সংরক্ষণ দ্রবণের pH গোলাপী থেকে হলুদ হয়ে যাবে। অতএব, বেশিরভাগ নির্মাতারা তাদের ফর্মুলেশনে অ্যান্টিব্যাকটেরিয়াল উপাদান যুক্ত করেছেন। প্রস্তাবিত অ্যান্টিব্যাকটেরিয়াল এজেন্ট হল পেনিসিলিন, স্ট্রেপ্টোমাইসিন, জেন্টামাইসিন এবং পলিমিক্সিন বি। সোডিয়াম অ্যাজাইড এবং 2-মিথাইল 4-মিথাইল-4-আইসোথিয়াজোলিন-3-ওয়ান (MCI) এবং 5-ক্লোরো-2-মিথাইল-4-আইসোথিয়াজোলিন-3-ওয়ান (CMCI) এর মতো ইনহিবিটার ব্যবহার করার পরামর্শ দেওয়া হয় না কারণ এই উপাদানগুলি পিসিআর বিক্রিয়ার উপর প্রভাব ফেলে। যেহেতু এই সংরক্ষণ দ্রবণ দ্বারা সরবরাহিত নমুনাটি মূলত একটি জীবন্ত ভাইরাস, তাই নমুনার মৌলিকত্ব সর্বাধিক পরিমাণে রাখা যেতে পারে এবং এটি কেবল ভাইরাস নিউক্লিক অ্যাসিড নিষ্কাশন এবং সনাক্তকরণের জন্যই নয়, ভাইরাসের চাষ এবং বিচ্ছিন্নকরণের জন্যও ব্যবহার করা যেতে পারে। তবে, এটি লক্ষ করা উচিত যে সনাক্তকরণের জন্য ব্যবহার করার সময়, নিষ্ক্রিয়করণের পরে নিউক্লিক অ্যাসিড নিষ্কাশন এবং পরিশোধন করতে হবে।
নিউক্লিক অ্যাসিড নিষ্কাশন লাইসেটের উপর ভিত্তি করে তৈরি আরেকটি ধরণের সংরক্ষণ দ্রবণ, যার প্রধান উপাদানগুলি হল সুষম লবণ, EDTA চেলেটিং এজেন্ট, গুয়ানিডিন লবণ (যেমন গুয়ানিডিন আইসোথিওসায়ানেট, গুয়ানিডিন হাইড্রোক্লোরাইড ইত্যাদি), অ্যানিওনিক সার্ফ্যাক্ট্যান্ট (যেমন ডোডেকেন সোডিয়াম সালফেট), ক্যাটানিক সার্ফ্যাক্ট্যান্ট (যেমন টেট্রাডেসিলট্রাইমিথাইল্যামোনিয়াম অক্সালেট), ফেনল, 8-হাইড্রোক্সিকুইনোলিন, ডাইথিওথ্রেইটল (DTT), প্রোটিনেজ K এবং অন্যান্য উপাদান। এই স্টোরেজ দ্রবণটি সরাসরি ভাইরাসকে ক্লিভ করে নিউক্লিক অ্যাসিড মুক্ত করে এবং RNase নির্মূল করে। যদি শুধুমাত্র RT-PCR এর জন্য ব্যবহার করা হয়, তবে এটি আরও উপযুক্ত, তবে লাইসেট ভাইরাসকে নিষ্ক্রিয় করতে পারে। এই ধরণের নমুনা ভাইরাস সংস্কৃতি পৃথকীকরণের জন্য ব্যবহার করা যাবে না।

ভাইরাস সংরক্ষণ দ্রবণে ব্যবহৃত ধাতব আয়ন চেলেটিং এজেন্টে EDTA লবণ (যেমন ডাইপোটাসিয়াম ইথিলিনেডিয়ামিনেটেট্রাএসেটিক অ্যাসিড, ডিসোডিয়াম ইথিলিনেডিয়ামিনেটেট্রাএসেটিক অ্যাসিড ইত্যাদি) ব্যবহার করার পরামর্শ দেওয়া হয় এবং হেপারিন (যেমন সোডিয়াম হেপারিন, লিথিয়াম হেপারিন) ব্যবহার করার পরামর্শ দেওয়া হয় না, যাতে পিসিআর সনাক্তকরণ প্রভাবিত না হয়।
৩. সংরক্ষণ নল: সংরক্ষণ নলের উপাদান সাবধানে নির্বাচন করা উচিত। এমন তথ্য রয়েছে যে পলিপ্রোপিলিন (পলিপ্রোপিলিন) নিউক্লিক অ্যাসিডের শোষণের সাথে সম্পর্কিত, বিশেষ করে উচ্চ টেনশন আয়ন ঘনত্বে, পলিপ্রোপিলিন (পলিপ্রোপিলিন) এর চেয়ে পলিথিন (পলিপ্রোপিলিন) বেশি পছন্দনীয়। ডিএনএ/আরএনএ ধরা সহজ। পলিথিন-প্রোপিলিন পলিমার (পলিঅ্যালোমার) প্লাস্টিক এবং কিছু বিশেষভাবে প্রক্রিয়াজাত পলিপ্রোপিলিন (পলিপ্রোপিলিন) প্লাস্টিকের পাত্র ডিএনএ/আরএনএ সংরক্ষণের জন্য বেশি উপযুক্ত। এছাড়াও, ভাঙা যায় এমন সোয়াব ব্যবহার করার সময়, স্টোরেজ নলটি ৮ সেন্টিমিটারের বেশি উচ্চতার একটি পাত্র নির্বাচন করার চেষ্টা করা উচিত যাতে সোয়াব ভেঙে গেলে এর উপাদানগুলি স্প্ল্যাশ এবং দূষিত না হয়।

৪. উৎপাদন সংরক্ষণের জন্য জল দ্রবণ: উৎপাদন সংরক্ষণের জন্য ব্যবহৃত অতি-বিশুদ্ধ জল ১৩,০০০ আণবিক ওজনের একটি অতি-পরিস্রাবণ ঝিল্লির মাধ্যমে ফিল্টার করা উচিত যাতে জৈবিক উৎস, যেমন RNase, DNase এবং এন্ডোটক্সিন থেকে পলিমার অমেধ্য অপসারণ নিশ্চিত করা যায় এবং সাধারণ পরিশোধন সুপারিশ করা হয় না। জল বা পাতিত জল।

২. ভাইরাস নমুনা টিউবের ব্যবহার

ভাইরাস স্যাম্পলিং টিউব ব্যবহার করে নমুনা সংগ্রহ প্রধানত অরোফ্যারিঞ্জিয়াল স্যাম্পলিং এবং ন্যাসোফ্যারিঞ্জিয়াল স্যাম্পলিং এ বিভক্ত:

১. ওরোফ্যারিঞ্জিয়াল স্যাম্পলিং: প্রথমে জিহ্বা ডিপ্রেসার দিয়ে জিহ্বা টিপুন, তারপর স্যাম্পলিং সোয়াবের মাথাটি গলায় প্রসারিত করুন যাতে দ্বিপাক্ষিক ফ্যারিঞ্জিয়াল টনসিল এবং পোস্টেরিয়র ফ্যারিঞ্জিয়াল প্রাচীর মুছে ফেলা যায়, এবং হালকা শক্তি দিয়ে পোস্টেরিয়র ফ্যারিঞ্জিয়াল প্রাচীর মুছুন, জিহ্বা ইউনিট স্পর্শ করা এড়িয়ে চলুন।

২. নাসোফ্যারিঞ্জিয়াল নমুনা: একটি সোয়াব দিয়ে নাকের ডগা থেকে কানের লতি পর্যন্ত দূরত্ব পরিমাপ করুন এবং আঙুল দিয়ে চিহ্নিত করুন, উল্লম্ব নাকের (মুখ) দিকে অনুনাসিক গহ্বরে স্যাম্পলিং সোয়াবটি প্রবেশ করান, সোয়াবটি কানের লতির দৈর্ঘ্যের কমপক্ষে অর্ধেক নাকের ডগা পর্যন্ত প্রসারিত হওয়া উচিত, সোয়াবটি নাকের ডগায় ১৫-৩০ সেকেন্ডের জন্য রেখে দিন, আলতো করে ৩-৫ বার ঘোরান এবং সোয়াবটি তুলে নিন।
ব্যবহারের পদ্ধতি থেকে বোঝা কঠিন নয়, এটি একটি অরোফ্যারিঞ্জিয়াল সোয়াব কিনা বা একটি ন্যাসোফ্যারিঞ্জিয়াল সোয়াব, নমুনা নেওয়া একটি প্রযুক্তিগত কাজ, যা কঠিন এবং দূষিত। সংগৃহীত নমুনার গুণমান পরবর্তী সনাক্তকরণের সাথে সরাসরি সম্পর্কিত। যদি সংগৃহীত নমুনায় ভাইরাল লোড কম থাকে, মিথ্যা নেতিবাচক ফলাফল তৈরি করা সহজ, রোগ নির্ণয় নিশ্চিত করা কঠিন।